瘦素受体缺陷对小鼠肝、肾功能的影响及机制

发布时间：2020-08-08 21:08

【摘要】：背景糖尿病是由遗传、环境、自身免疫等多种因素引起的代谢紊乱综合征,持续性高血糖导致其发展成为慢性病,糖尿病对人类健康的威胁日益加重,发病率在全球范围内亦呈增长趋势。硫辛酸(lipoic acid,LA)是一种强抗氧化剂,硫辛酸的生物学功能已被广泛研究,而硫辛酸在哺乳动物的代谢方面研究报道并不多。硫辛酸的合成是在线粒体内进行的,硫辛酸合成酶(lipoic acid synthetase,LIAS)是其合成的关键酶,其含量与硫辛酸合成酶的表达有密切关系。瘦素受体缺陷的Lepr~(db/db)小鼠由于阻断了其瘦素信号通路,使得食物的摄入量增加,能量消耗下降,导致小鼠肥胖,其发病过程与我们人类的2型糖尿病的发生过程非常相近~([1])。目前关于瘦素作用与硫辛酸合成酶之间的作用关系还不清楚,Lepr~(db/db)小鼠体内LIAS蛋白的表达研究也未见报道。目的探讨阻断瘦素信号通路导致的小鼠糖脂代谢紊乱是否与硫辛酸合成酶(LIAS)蛋白的表达量相关,检测瘦素受体缺陷的Lepr~(db/db)小鼠体内肝、肾中LIAS的表达,为肥胖和糖尿病的防治提供新策略依据。方法分别取10周龄Lepr~(db/+)与Lepr~(db/db)雄性小鼠各8只,禁食8h后,测量两组小鼠体重及空腹血糖(FPG);用乙醚麻醉动物,经腹主动脉采血,处死动物,取肝脏、肾脏并称重。取肝右叶和左肾经4%多聚甲醛固定,进行肝、肾组织病理学检查。分离血清,用试剂盒检测血清中总胆固醇(total cholesterol,T-CHO)、甘油三酯(triglyceride,TG)、高密度脂蛋白(high-density lipoprotein,HDL)、低密度脂蛋白(low density lipoprotein,LDL)、丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase,ALT)、天冬氨酸转氨酶(aspartate aminotransferase,AST)、血肌酐(serum creatinine,SCr)、尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)及C反应蛋白(C reactive protein,CRP)含量。应用线粒体分离试剂盒分离肝、肾组织线粒体,提取总蛋白,采用Western Blot方法检测LIAS蛋白的表达。结果1.与Lepr~(db/+)小鼠比较,Lepr~(db/db)小鼠体重、FPG、T-CHO、TG、LDL、AST及CRP明显增高,差异有统计学意义(P0.05)。2.组织病理观察发现,Lepr~(db/+)小鼠肝肾结构完整,而Lepr~(db/db)小鼠肝细胞出现脂肪变性,肾小球肥大,基底膜增厚,系膜区增宽。3.与Lepr~(db/+)小鼠比较,Lepr~(db/db)小鼠肝肾线粒体内LIAS蛋白表达量均增高,差异有统计学意义(P0.05)。结论瘦素受体缺陷的Lepr~(db/db)小鼠存在糖脂代谢紊乱、肝肾细胞损伤、肝肾组织线粒体LIAS蛋白的表达增高。LIAS蛋白的表达增高可能与Lepr~(db/db)小鼠体内氧化应激反应较Lepr~(db/+)小鼠强烈而代偿性升高有关。这将为糖尿病的抗氧化治疗提供新思路。
【学位授予单位】：新乡医学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R587.1
【图文】：

反应终点,点图,探针,小鼠

2.2 Leprdb/+和 Leprdb/db小鼠体重及其脏器系数比较与 Leprdb/+小鼠比较，Leprdb/db小鼠体重、肝重、肝脏器系数及肾重均明显升高，而肾脏器系数降低，差异有统计学意义（P<0.05）。见表 8。表 8 Leprdb/+和 Leprdb/db小鼠体重、肝肾重量及其脏器系数比较（n=8, x ± s)组别体重（g）肝重（g）肝脏器系数（%）肾重（g）肾脏器系数（%）Leprdb/+组 23.33±1.92 1.06±0.15 4.52±0.46 0.32±0.02 1.37±0.18Leprdb/db组 50.17±5.14*2.83±0.43*5.74±1.19*0.42±0.03*0.96±0.22*注：*与 Leprdb/+组比较，P<0.05。2.3 Leprdb/+和 Leprdb/db小鼠生化指标的测定表 9、表 10 可见，与 Leprdb/+小鼠比较，Leprdb/db小鼠 FPG 及 ALT、CHO、TG及 LDL 值均明显升高，差异有统计学意义（P<0.05）。表 9 Leprdb/+和 Leprdb/db小鼠糖、脂代谢相关生化指标比较（n=8, x ± s)

图 3. Leprdb/+小鼠与 Leprdb/db小鼠 AST 及 ALT 的比较表 11 Leprdb/+小鼠与 Leprdb/db小鼠 SCr 及 BUN 的比较（n=8, x ± s)。组别 SCr(μmmol/L) BUN(mmol/L)Leprdb/+组 8.20±2.30 7.29±1.71Leprdb/db组 14.65±1.56* 8.39±0.89注：*与 Leprdb/+组比较，P<0.05。

【参考文献】