利拉鲁肽诱导肥胖2型糖尿病大鼠白色脂肪组织FGF21表达及对AMPK信号通路影响的初步探讨

发布时间：2020-08-25 02:34

【摘要】：背景成纤维细胞生长因子21(FGF-21)是FGF超家族的调控内分泌系统的成员其中之一,在糖尿病及肥胖等相关代谢性疾病中,具有调节能量稳态,尤其在调节体重和脂质代谢中发挥及其的重要作用。另外,FGF21还可以提高胰岛素敏感性。利拉鲁肽是GLP-1类似物的一种,与艾塞那肽相似,具有多种作用,既可以刺激胰岛素分泌和改善胰腺β细胞功能,又可以减轻体重和降低血脂。但利拉鲁肽在治疗肥胖2型糖尿病大鼠过程中,是否影响白色脂肪组织(WAT)中的信号通路,另外FGF-21是否参与其中?目前为止相关文献报道仍不多见。目的1.观察肥胖2型糖尿病(T2DM)大鼠的血清FGF-21水平与2型糖尿病的关系。2.观察利拉鲁肽(Liraglutide)对肥胖T2DM大鼠WAT和细胞中FGF-21水平及AMPK信号通路的影响,探究FGF-21在利拉鲁肽其降低血糖和减轻体重效应中发挥的作用。方法1.动物实验:雄性SD大鼠随机分为对照组(CON)、2型糖尿病组(DM)及2型糖尿病+利拉鲁肽组(DM+LRG),后2组先给予高脂饮食一个月然后腹腔注射40mg·kg-1链脲佐菌素(STZ)进行肥胖2型糖尿病大鼠造模,DM+LRG组再皮下注射0.4mg·kg-1·d-1利拉鲁肽,每天2次,干预6周。生化指标检测血清ALT、AST、TG、TC、HDL-C以及血清FGF21水平,白色脂肪组织的病理学变化用HE染色检测,蛋白印迹法和RT-PCR检测WAT中FGF21、PPARγ、FGFR2、FGFR3、AMPK信号通路的m RNA和蛋白表达。2.细胞实验:采用诱导分化后的RAW264.7作为细胞模型,将细胞分成6组,CON,HGHP,脂多糖(LPS),LRG(L),LRG(M),LRG(H)。CON组(10%FBS的DMEM),HGHP组(12.5mmol/L Glucose+25mmol/L PA),LPS(1μg/ml LPS+25mmol/L PA+12.5mmol/L Glucose),LRG(L)(25mmol/L PA+12.5mmol/L Glucose+1μg/ml LPS+LRG 10-9mol/L),LRG(M)(25mmol/LPS+12.5mmol/L Glucose+1μg/ml LPS+LRG10-8mol/L),LRG(H)(25mmol/L PA+12.5mmol/L Glucose+1μg/ml LPS+LRG 10-7mol/L)。ELISA法测定上清液中FGF21的水平,还有蛋白和m RNA实验。结果1.动物实验:与CON组相比,DM组大鼠血清LDL-C、TC、TG明显增高,HDL-C、FGF21明显降低,体重显著增加,脂肪细胞体积大小明显增大,FGF21、FGFR2、FGFR3、PPARγ、β-Klotho、AMPK的m RNA和蛋白表达显著降低;而在皮下注射利拉鲁肽后能减低了血脂水平和明显降低体重变化,明显上调改善了肾周脂肪组织中FGF21、PPARγ、p-FGFR3、β-Klotho、AMPK的蛋白表达和它们磷酸化LKB1、AMPK、ACC的表达。2.细胞实验:高糖高脂可以显著降低RAW264.7细胞的FGF-21水平,利拉鲁肽则可以逆转这种效应,表现为一定的剂量效应,且可能通过GLP-R调节下游的AMPK信号通路;realtime RT-PCR结果实验表明利拉鲁肽组FGF21 m RNA比高糖高脂组表达要高,而且呈剂量效应;在GLP-1R抑制剂实验中,利拉鲁肽改善了抑制剂作用后细胞的蛋白表达。结论1.利拉鲁肽拥有较为明显的降脂降糖作用,其作用机制可能与增加白色脂肪组织中FGF21的表达、进而激活AMPK和抑制MAPK通路有关。2.高糖高脂可以显著降低RAW264.7细胞的FGF-21水平,利拉鲁肽则可以逆转这种效应,而且呈现剂量效应,这为利拉鲁肽改善胰岛素抵抗及降糖减重的作用机制提供了新的证据。
【学位授予单位】：安徽医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：R587.1

【相似文献】

相关期刊论文 前10条

1 张子婷;叶卓淼;陈永欣;;AMPK信号通路在非酒精性脂肪肝病中的研究进展[J];南京医科大学学报(自然科学版);2019年08期

2 MA Wei-guo;WANG Jie;BU Xiang-wei;ZHANG Hong-hong;ZHANG Jian-ping;ZHANG Xiao-xu;HE Yu-xi;WANG Da-li;ZHANG Zheng-ju;MENG Feng-xian;;Effects of Polygonum cuspidatum on AMPK-FOXO3α Signaling Pathway in Rat Model of Uric Acid-Induced Renal Damage[J];Chinese Journal of Integrative Medicine;2019年03期

3 Yenan Feng;Youyi Zhang;Han Xiao;;AMPK and cardiac remodelling[J];Science China(Life Sciences);2018年01期

4 许梦川;吴跃峰;李东明;;AMPK的功能调控及其与肿瘤之间的关系[J];生理科学进展;2018年01期

5 Jing Wang;Zhenyu Li;Li Gao;Yanshuang Qi;Haibo Zhu;Xuemei Qin;;The regulation effect of AMPK in immune related diseases[J];Science China(Life Sciences);2018年05期

6 赵伟;王耀光;王成盼;;运动改善AMPK的研究现状[J];中国学校体育(高等教育);2018年02期

7 于辰曦;孙水;;AMPK在骨关节炎发生发展中的作用[J];生命的化学;2016年06期

8 Zhao-Ying Liu;Shun-Peng Hu;Qing-Rong Ji;Hai-Bo Yang;Dong-Hao Zhou;Fang-Fang Wu;;Sevoflurane pretreatment inhibits the myocardial apoptosis caused by hypoxia reoxygenation through AMPK pathway:An experimental study[J];Asian Pacific Journal of Tropical Medicine;2017年02期

9 方明珠;徐艳秋;;AMPK与肥胖相关性肾病[J];贵阳中医学院学报;2016年06期

10 Jin Li;Liping Zhong;Fengzhong Wang;Haibo Zhu;;Dissecting the role of AMP-activated protein kinase in human diseases[J];Acta Pharmaceutica Sinica B;2017年03期

相关会议论文 前10条

1 孙宏斌;;AMPK:new insights into an old molecule[A];第十四届中国药学会青年药学论坛报告集[C];2018年

2 刘不悔;何伟明;;Hyperoside Attenuates Renal Aging Induced by Dgalactose via Regulation of AMPK-ULK1-mediated Autophagy.[A];中国中西医结合学会肾脏疾病专业委员会2018年学术年会论文摘要汇编[C];2018年

3 曹勋红;徐平;廖尉廷;闫景瑶;罗宫薇;邹惟莹;杨蓓;张大雷;吴磊;邹挺;;AMPK对胚胎成纤维细胞干细胞基因表达的影响[A];中国生理学会张锡钧基金第十三届全国青年优秀生理学学术论文综合摘要、中国生理学会第十一届全国青年生理学工作者学术会议论文摘要[C];2015年

4 赵明华;余海燕;王蕴红;张雪琳;;运动前补糖对大鼠心肌AMPK激活的影响[A];第四届（2016）全国运动生理与生物化学学术会议——运动·体质·健康论文摘要汇编[C];2016年

5 陈苏宁;Lai Xiaofeng;Zhang Jian;;Combined cancer therapy:all roads lead to AMPK[A];中华医学会临床药学分会2014年全国学术会议论文汇编[C];2014年

6 李怡宁;胡济安;;AMP-activated protein kinase (AMPK) protects necrosis via regulation of Keap1-PGAM5 complex[A];2015年浙江省医学会病理学术年会论文汇编[C];2015年

7 杨敏;陈少贤;刘居理;刘晓颖;符永恒;张梦珍;林秋雄;朱杰宁;麦丽萍;单志新;余细勇;林曙光;;三七总皂苷通过调节AMPK抑制心肌细胞凋亡[A];第八届海峡两岸心血管科学研讨会论文集[C];2011年

8 Paul M Vanhoutte;;SIRT1 and AMPK:the Seesaw Effect in Regulating Endothelial Sene-scence[A];第八届海峡两岸心血管科学研讨会论文集[C];2011年

9 ;AMPK mediated an apoptotic response to combined effect of hypoxia stress and ER stress[A];2012全国发育生物学大会摘要集[C];2012年

10 ZHANG Jian-wei;MA Xiao-wei;DENG Rui-fen;DING Shan;GU Nan;GUO Xiao-hui;;Genetic variability in AMPKαl gene may have synergetic effect with smoking on risk of coronary artery disease in chinese type 2 diabetics[A];中华医学会糖尿病学分会第十六次全国学术会议论文集[C];2012年

相关重要报纸文章 前5条

1 陈丹;激活一关键基因可延缓果蝇衰老进程[N];科技日报;2014年

2 ;探索心中的奥秘[N];健康报;2012年

3 实习生 程凤;不爱锻炼可能与基因缺失有关[N];科技日报;2011年

4 记者 李鹏;她在解构蛋白“机器”[N];北京科技报;2011年

5 记者 佘峥;降血糖“百年神药”秘密被发现[N];厦门日报;2016年

相关博士学位论文 前10条

1 孙晓妍;TRB3/AMPK信号通路介导肥胖和糖尿病状态下脂肪组织功能紊乱的机制研究[D];山东大学;2019年

2 赵旭;医用臭氧介导AMPK/mTOR信号通路对大鼠骨性关节炎软骨自噬调节及镇痛机制的研究[D];山东大学;2019年

3 苗志强;早期日粮能量水平调控肉仔鸡小肠磷转运的机理研究[D];山西农业大学;2017年

4 宋海英;冬眠心肌AMPK/PGC-1α/PPARα/UCP2通路的作用及理气活血中药的干预效应研究[D];中国中医科学院;2018年

5 郭旭光;PavA通过激活AMPK/mTOR通路诱导肺泡上皮细胞自噬在肺炎链球菌感染中的作用机制研究[D];南方医科大学;2018年

6 孟一迪;Ca~(2+)/钙调蛋白依赖性激酶Ⅱ调节AMP激活蛋白激酶靶向调控缺血性心脏病脂肪酸代谢的机制研究[D];华中科技大学;2017年

7 钟娟;含笑内酯富马酸盐激活PPAR-γ介导NF-κB和AMPK/mTOR通路对db/db鼠肝肾损害的保护作用[D];南方医科大学;2018年

8 李政委;microRNA-135b表达沉默Ppm1e激活AMPK信号通路抑制人骨肉瘤细胞增殖[D];苏州大学;2018年

9 闫鹏;AMPK-SIRT1信号通路在脊髓损伤后神经细胞自噬和细胞凋亡调节中的作用[D];中国医科大学;2018年

10 赵浩东;酒精上调CCL5表达通过激活AMPK通路诱导自噬促进结直肠癌转移[D];安徽医科大学;2018年

相关硕士学位论文 前10条

1 安怡斐;去乙酰化酶SIRT1激活AMPK/FOXO3正反馈环路调控胃癌耐药及肿瘤干性的研究[D];山东大学;2019年

2 曾燕琴;AMPK在小鼠慢性脑缺血中的作用研究[D];福建医科大学;2018年

3 张冰洲;CTRP9通过AMPK通路对巨噬细胞源性泡沫细胞程序性坏死的影响[D];山西医科大学;2019年

4 刘晓霞;利拉鲁肽通过AMPK/mTOR信号通路对高糖环境下内皮细胞自噬活性的影响[D];山西医科大学;2019年

5 樊文静;泊马度胺对多发性骨髓瘤细胞MM1.S凋亡作用及其对Cereblon表达的调控研究[D];兰州大学;2019年

6 商景洲;EAAT3通过调控AMPK以及Akt/mTOR介导的细胞自噬参与心肌肥厚的病理进程[D];江汉大学;2019年

7 施丛健;基于AMPK/mTOR信号通路研究对乙酰氨基酚抑制自噬加重非酒精性脂肪肝脂质沉积[D];安徽医科大学;2019年

8 李坤;AMPK/ACC信号通路在TRPP2介导的头颈部肿瘤增殖和凋亡中的重要作用[D];安徽医科大学;2019年

9 张一;利拉鲁肽诱导肥胖2型糖尿病大鼠白色脂肪组织FGF21表达及对AMPK信号通路影响的初步探讨[D];安徽医科大学;2019年

10 邓文娟;黄芪汤通过AMPK/Nrf2信号通路抑制氧化应激改善C57小鼠糖尿病肾病足细胞损伤[D];安徽医科大学;2019年

本文编号：2803148