中等强度运动干预对糖尿病形成过程中大鼠肝脏α-SMA和IV型胶原的研究

发布时间：2020-09-19 17:18

　　目的:应用高糖高脂膳食联合(腹腔)注射链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)建立2型糖尿病大鼠模型,并在模型建立过程中加入中等强度运动干预,探讨其对糖尿病发生过程中肝损伤情况的影响。方法:30只SPF级六周龄雄性SD健康大鼠在适应性饲养一周后,将30只大鼠随机分为3组,每组10只:A组(正常对照组);B组(糖尿病对照组);C组(中等强度运动组)。A组作为对照组普通膳食喂养,B、C组大鼠在高糖高脂膳食饲养8周后一次性小剂量STZ(30mg/kg)腹腔注射。其中A、B组大鼠在笼中自由活动,不施加额外运动干预。C组在高糖高脂膳食饲养同时施加中等强度跑台训练。在注射STZ第7天处死动物,取肝脏组织,HE及Masson染色进行形态学观察,并通过免疫组化法观察α-SMA在各组大鼠肝组织中的表达。同时眼眶采血检测血清ⅣV型胶原浓度。结果:1.B组大鼠出现多饮、多食、多尿,精神不振、毛色暗淡等现象,STZ注射后第7天取大鼠尾静脉血,测随机血糖,血糖在16.7mmol/L以上,提示糖尿病大鼠模型成功。2.肝细胞形态学改变:2)200×光镜下HE染色观察到:A组肝组织,肝小叶结构清晰,肝板明显,细胞核呈圆形,大小均匀,核膜完整,核仁清晰,肝索呈放射状规则排列,无空泡变性,肝血窦大小正常,汇管区胆小管无增生情况;B组肝组织,肝小叶结构紊乱,边界不清晰,可见大量脂肪空泡,肝细胞出现水样变性,细胞结构消失,细胞核固缩;肝血窦扩张,肝脏淤血,汇管区胆小管发生明显增生;C组肝组织,肝小叶结构尚且清晰,肝细胞索状结构排列尚清晰,可见肝板,无明显脂肪空泡,肝血窦狭窄,汇管区胆小管发生轻微增生。2)200×光镜下Masson染色可观察到:A组肝小叶结构正常,未见明显蓝染纤维;B组肝组织出现脂肪空泡,肝小叶结构严重破坏,并可见汇管区明显蓝染胶原纤维,肝细胞间可见轻度蓝染胶原纤维;C组肝小叶结构比较正常,未见明显脂肪空泡,肝细胞出现水肿增大,肝细胞间隙未见明显蓝染胶原纤维。3.免疫组化法观察α-SMA在各组大鼠肝组织中的表达,光镜下观察A组肝组织α-SMA蛋白免疫组织化学染色阳性多表达于小动脉及小静脉,在胆管表达较少;B组肝组织α-SMA蛋白免疫组织化学染色阳性主要表达于汇管区及纤维间隔;C组肝组织α-SMA蛋白免疫组织化学染色阳性在汇管区表达较少。图片分析软件测得累计光密度值(IOD)结果显示,B组、C组α-SMA的表达量较A组有明显增多(p0.05);而C组α-SMA的表达量较B组有明显减少(p0.05)。4.糖尿病对照组大鼠的肝脏出现了早期纤维化,其Ⅳ型胶原增高。A组大鼠Ⅳ型胶原浓度为3.45±2.26ng/ml,B组的糖尿病大鼠Ⅳ型胶原浓度为7.53±2.02ng/ml,P0.05有统计学意义。但C组大鼠Ⅳ型胶原浓度为4.27±3.46ng/ml,明显低于B组,P0.05有统计学意义。表明运功干预可以减轻糖尿病形成过程中大鼠肝脏早期纤维化。结论:1.中等强度运动干预可以保护高糖高脂膳食联合注射STZ诱导的糖尿病大鼠肝脏组织形态结构,减少大鼠肝脏组织脂肪空泡的形成,有效改善肝细胞水样变性及肝血窦扩张。2.中等强度运动干预可以降低高糖高脂膳食联合注射STZ诱导的糖尿病大鼠肝脏组织汇管区α-SMA的表达,降低肝星状细胞激活,从而减轻肝脏纤维化。3.中等强度运动干预可以降低高糖高脂膳食联合注射STZ诱导的糖尿病大鼠肝脏组织汇管区及肝细胞间胶原纤维的增生,同时可以降低其血清ⅣV型胶原浓度,从而减轻肝脏纤维化。
【学位单位】：武汉体育学院
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2018
【中图分类】：R587.1

【参考文献】