不同干预方式改善高脂诱导大鼠瘦素抵抗状态的比较及机制研究

发布时间：2020-11-14 06:31

　　 目的:瘦素抵抗在2型糖尿病发生发展过程中具有重要意义,本研究通过高脂饮食诱导形成瘦素抵抗肥胖大鼠模型,综合比较经皮穴位电刺激、游泳运动和药物干预对肥胖大鼠血糖血脂相关指标及下丘脑中PTP-1B及SOCS-3水平的不同影响,探讨其在改善机体瘦素抵抗状态和胰岛素敏感性中的可能机制,以期为临床干预瘦素抵抗导致的肥胖及相关疾病提供实验依据。方法:50只8周龄SPF级雄性wistar大鼠适应性喂养一周后,随机分为正常对照组(n=10)和高脂组(n=40),分别予以正常饲料喂养和高脂饲料喂养8周造模。造模期间一周一次记录各组大鼠体重、进食量、肛鼻长,计算Lee's指数,评定肥胖模型。造模成功后将高脂组大鼠随机分为模型对照组(n=8)、电刺激组(n=8)、游泳运动组(n=8)、西药立普妥降脂组(西药降脂组)(n=8)、中药山楂籽油降脂组(中药降脂组)(n=8),各组仍予以高脂饮食。于干预第8周末立即处死并取材,处死前测定各组大鼠的体重及肛鼻长,计算Lee's指数。大鼠心尖取血,生化试剂盒检测总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、游离脂肪酸(FFA)、糖化血红蛋白(GHb)含量;ELISA试剂盒检测大鼠血清胰岛素(Insulin)、瘦素(Leptin)、抵抗素(Resistin)含量;HE染色法观察大鼠肝脏肝小叶的组织形态学变化;透射电镜观察大鼠肝脏细胞内线粒体形态变化及相关结构变化状况;RT-PCR法检测下丘脑蛋白酪氨酸磷酸酶-1B(PTP-1B)、细胞因子信号转导抑制因子-3(SOCS-3)的mRNA水平及白色脂肪组织内Leptin、Resistin蛋白表达水平;Western Blotting法检测大鼠下丘脑PTP-1B、SOCS-3蛋白相对表达量。结果:1.高脂喂养8周后,高脂组大鼠的体重、Lee's指数及饮食量均高于正常对照组(P0.01),表明肥胖模型造模成功。与正常对照组相比,高脂组大鼠血清胰岛素、瘦素、抵抗素含量及糖化血红蛋白、空腹血糖、餐后2h血糖等均高于正常对照组(P0.01),表明肥胖大鼠模型同时具备瘦素抵抗状态。2.干预8周后各组脂代谢变化情况总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、游离脂肪酸(FFA):与正常对照组比较,其余五组TC、TG、FFA均升高(P0.01)。与模型对照组相比,其余四组TC、TG、FFA均降低(P0.01);与游泳运动组比较,电刺激组、西药降脂组TC、TG、FFA均升高(P0.01),中药降脂组除TC稍升高外(P0.05),TG、FFA与正常对照组无明显差异(P0.05)。3.HE染色和透射电镜结果:与模型对照组比较,经游泳运动干预后的肥胖大鼠肝脏组织及细胞形态有明显的改善,中央静脉明显,肝小叶形态基本清晰,肝索排列相对规则,凋亡细胞减少,脂质细胞数量较少,炎性浸润不明显,细胞排列相对紧密;细胞结构相对完整,凋亡现象不明显;电刺激组大鼠表现为肝脏组织结构相对清晰,肝小叶结构基本恢复,细胞内结构相对完整,线粒体数量减少;中药降脂组大鼠表现为肝脏组织结构相对完整,肝小叶形态基本正常,突出表现为细胞内脂肪聚集增多,细胞形态变大;西药降脂组大鼠表现为肝脏基本结构可见,显著存在内质网溶解,线粒体增多及部分融合,细胞形态偏瘦。4.白色脂肪组织内Leptin、Resistin表达水平:与正常对照组比较,其余五组白色脂肪组织内Leptin、Resistin表达水平均升高(P0.01)。与模型对照组比较,不同干预组均显著降低了白色脂肪组织内Leptin及Resistin的表达(P0.01)。且西药降脂组与游泳运动组无显著差异(P0.05);电刺激组和中药降脂组则显著高于游泳运动组(P0.01)。5.下丘脑内PTP-1B及SOCS-3蛋白相对表达量和mRNA水平:正常对照组下丘脑内PTP-1B及SOCS-3蛋白相对表达量和mRNA水平均显著低于其余五组(P0.01),模型对照组PTP-1B蛋白相对表达量和mRNA水平则显著高于不同干预组(P0.05或(P0.01))。其中,游泳运动组在抑制下丘脑神经元内PTP-1B及SOCS-3的mRNA水平方面显著优于电刺激组及中药降脂组(P0.05),西药降脂组则与游泳运动组无显著差异(P0.05)。结论:1.不同干预方式对改善机体瘦素抵抗状态和胰岛素敏感性均有明显作用,其中游泳和西药降脂组作用优于经皮穴位电刺激和中药降脂组。2.机体瘦素抵抗状态和胰岛素敏感性的改善与下丘脑内PTP-1B及SOCS-3的蛋白表达和转录活性下调有关。
【学位单位】：武汉体育学院
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2019
【中图分类】：R589.2
【部分图文】：

图１－４游泳运动组?图１－５西药降脂组?图１－６中药降脂组??：各片均为２００倍镜下观。ａ中央静脉（肝窦区）；ｂ肝细胞生（双核细胞）；ｃ脂质异位沉（脂肪变性或坏死）??如图１－１示，正常肝脏镜下观组织界线清晰，肝小叶完整，以中央静脉（一般为）为中心，肝索排列整齐，肝脏细胞大小均匀，细胞核居中，细胞形态以梭形为夹少量脂质沉积，无空泡状细胞出现，肝内胆管排列相对规则，在肝窦区汇集，可量坏死细胞和巨噬细胞，未见明显炎性浸润，无假包膜形成。图１－２是造模完成后对照组大鼠的肝脏染色镜下观，可见中央静脉缺如，细胞排列紊乱，肝索形态不常肝小叶出现分离现象，有假小叶形成，肝脏细胞弥漫性肥大，中央静脉附近出现肝细胞再生，再生肝细胞体积较大、细胞核超出正常肝细胞细胞核体积、染色较深双核现象；此外可见弥漫性的细胞坏死及脂质沉积，坏死细胞被吞噬后出现大量空性浸润明显。图１－３，经电刺激处理后可见肝小叶形态相对完整，但仍可见肝脏细

图１－４游泳运动组?图１－５西药降脂组?图１－６中药降脂组??：各片均为２００倍镜下观。ａ中央静脉（肝窦区）；ｂ肝细胞生（双核细胞）；ｃ脂质异位沉（脂肪变性或坏死）??如图１－１示，正常肝脏镜下观组织界线清晰，肝小叶完整，以中央静脉（一般为）为中心，肝索排列整齐，肝脏细胞大小均匀，细胞核居中，细胞形态以梭形为夹少量脂质沉积，无空泡状细胞出现，肝内胆管排列相对规则，在肝窦区汇集，可量坏死细胞和巨噬细胞，未见明显炎性浸润，无假包膜形成。图１－２是造模完成后对照组大鼠的肝脏染色镜下观，可见中央静脉缺如，细胞排列紊乱，肝索形态不常肝小叶出现分离现象，有假小叶形成，肝脏细胞弥漫性肥大，中央静脉附近出现肝细胞再生，再生肝细胞体积较大、细胞核超出正常肝细胞细胞核体积、染色较深双核现象；此外可见弥漫性的细胞坏死及脂质沉积，坏死细胞被吞噬后出现大量空性浸润明显。图１－３，经电刺激处理后可见肝小叶形态相对完整，但仍可见肝脏细

一电阂激组
【参考文献】

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本文编号：2883189