NGF调控RHO/ROCK信号转导通路在哮喘发病机制中的研究

发布时间：2020-12-08 09:54

　　目的:支气管哮喘（简称哮喘）是影响全球公共健康的最常见的慢性疾病之一,哮可以由多种因素引起,其发病机制复杂,至今尚未完全阐明。近年来的研究表明,哮喘的发生和哮喘的持续状态与免疫-神经机制有着十分密切的关系,而神经生长因子（nerve growth factor,NGF）作为联系气道免疫与神经机制的中介物质,在哮喘的发病过程中起着十分重要的作用。Rho GTP酶又称小G蛋白,是目前研究最为清楚的Ras相关单体GTP酶。它通过激活其下游靶分子—Rho相关卷曲螺旋形成蛋白激酶（Rho associatedcoiled coil forming protein kinase,Rock）调节细胞的多种行为与功能,包括细胞的收缩、游走及黏附、生长分裂以及肿瘤细胞的转化与浸润等。近年来的研究发现,Rho/Rock信号转导通路参与多种平滑肌和非平滑肌功能异常相关疾病的发生机制,因而引起了广泛关注。但在支气管哮喘中NGF是否通过Rho/Rock信号转导通路引起气管平滑肌的收缩,气道阻力增加,进一步引起哮喘的发生、发展和持续尚不清楚。本课题旨在通过对NGF和Rho/Rock信号转导通路进行相关性的研究,进... 

【文章来源】：中国医科大学辽宁省

【文章页数】：86 页

【学位级别】：博士

【文章目录】：
摘要
Abstract
英文缩略语
第一部分 NGF和RhoA/ROCK在哮喘小鼠肺组织中的表达及其在哮喘发病机制中的作用
    1 前言
    2 材料和方法
        2.1 主要试剂和仪器
        2.2 研究对象和分组
        2.3 研究方法
    3 结果
        3.1 哮喘小鼠的临床表现
        3.2 小鼠气道反应性测定
        3.3 血涂片及支气管肺泡灌洗液涂片的留取及细胞计数
        3.4 肺组织标本的留取及HE染色病理学观察
        3.5 ELISA检测血清及BALF中IL-13、IFN-γ的含量
        3.6 免疫组化检测肺组织中NGF、RhoA、ROCK、P-MLC的表达
        3.7 WesternBlot检测肺组织中NGF、RhoA、ROCK、P-MLC的表达
        3.8 RealTimeRT-PCR检测肺组织中NGF、RhoA、ROCK、P-MLCmRNA
    4 讨论
    5 结论
第二部分 Rho激酶抑制剂Y-27632在OVA诱导的哮喘小鼠平滑肌收缩中的作用
    1 前言
    2 材料和方法
        2.1 主要试剂和仪器
        2.2 研究对象和分组
        2.3 研究方法
    3 结果
        3.1 哮喘小鼠的临床表现
        3.2 小鼠气道反应性测定
        3.3 血涂片及BALF中嗜酸性粒细胞计数
        3.4 肺组织HE染色
        3.5 ELISA检测血清及BALF中IL-13、IFN-γ的含量
        3.6 免疫组化检测肺组织中ROCK、P-MLC的表达
        3.7 WesternBlot检测肺组织中ROCK、P-MLC的表达
        3.8 RealTimeRT-PCR检测肺组织中ROCK、P-MLCmRNA
    4 讨论
    5 结论
第三部分 NGF调控Rho/ROCK信号转导通路在哮喘小鼠发病机制中的研究
    1 前言
    2 材料和方法
        2.1 主要试剂和仪器
        2.2 研究对象和分组
        2.3 研究方法
    3 结果
        3.1 哮喘小鼠的临床表现
        3.2 小鼠气道反应性测定
        3.3 血清及支气管肺泡灌洗液涂片的留取及细胞计数
        3.4 肺组织标本的留取及HE染色病理学观察
        3.5 ELISA检测血清及BALF中IL-13、IFN-γ的含量
        3.6 免疫组化检测肺组织中NGF、RhoA、ROCK、P-MLC的表达
        3.7 WesternBlot检测肺组织中NGF、RhoA、ROCK、P-MLC的表达
        3.8 RealTimeRT-PCR检测肺组织中NGF、RhoA、ROCK、P-MLCmRNA
    4 讨论
    5 结论
本研究创新性的自我评价
参考文献
文献综述
    参考文献
攻读学位期间取得的研究成果
致谢
个人简历


【参考文献】：
期刊论文
[1]Rho/ROCK signaling in motility and metastasis of gastric cancer[J]. Tasuku Matsuoka,Masakazu Yashiro.  World Journal of Gastroenterology. 2014(38)
[2]巨噬细胞移动抑制因子经Rho途径促进人肺成纤维细胞Ⅰ型胶原合成[J]. 陈培芬,罗雅玲,赖文岩,邢晓雯,谭家余,骆子义,邱智辉.  医学理论与实践. 2011(14)
[3]哮喘小鼠肺组织Rho、ROCK信号通路与气道炎症及选择性拮抗剂Y-27632的干预[J]. 项蔷薇,李海静,罗运春,王强,朱妍艳,李昌崇.  中国免疫学杂志. 2010(12)
[4]实验性哮喘时神经生长因子对神经激肽A的上调作用[J]. 方秀斌,刘晓湘,张鸿.  中国病理生理杂志. 2004(01)
[5]法舒地尔对支气管哮喘小鼠肺组织Rho激酶-1表达及气道炎症的影响[J]. 吴丰芹,朱述阳,何彩霞,谷名晓.  中华结核和呼吸杂志. 2009 (11)



本文编号：2904895