利拉鲁肽对肥胖小鼠非酒精性脂肪肝病的作用

发布时间：2017-04-07 16:07

  本文关键词：利拉鲁肽对肥胖小鼠非酒精性脂肪肝病的作用，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的:探讨利拉鲁肽对单纯肥胖小鼠和2型糖尿病肥胖小鼠体重和非酒精性脂肪肝的作用以及与肝组织AC3mRNA间的相互关系，为改善肥胖及非酒精性脂肪肝提供新的方法及思路。 方法:1.动物分组及模型的制备：选取24只C57BL/6J和16只db/db小鼠，随机分为空白对照组、C57干预组、C57模型组及DB模型组、DB干预组，每组8只。空白对照组、DB模型组及DB干预组喂饲普通饲料，C57模型组及C57干预组喂饲高脂饲料。喂养4周时C57模型组及C57干预组小鼠体重明显大于对照组(P0.01)。8周时DB模型组及DB干预组血糖达16.7minol/L以上,体重达到40g以上。饲养第12周起，给C57干预组及DB干预组小鼠每日两次皮下注射利拉鲁肽100μg/kg，共进行12周注射。同时给空白对照组、C57模型组及DB模型组每日两次皮下注射等量生理盐水。 2.每周电子天平称取小鼠体重，强生血糖仪测随机血糖。 3．标本采集：干预12周后，小鼠禁食12小时，5%水合氯酵0.6ml/100g腹腔注射麻醉小鼠，摘取眼球采内眦静脉血，离心静脉血后留取血清用于胰岛素的测定。迅速分离取出肝脏，冲洗后超低温保存，用于AC3mRNA检测。部分肝组织用于肝组织学检查。 4.肝组织学检查：应用石蜡切片或冰冻切片，采用苏木精-伊红（hematoxylin-eosin HE）染色和Masson染色、油红O染色的方法，在光镜下观察肝脏病理学的变化情况。进行NAFLD活动度积分(NAS)和肝纤维化分期。 5. AC3mRNA表达：采用TaqMan realtime-PCR检测的方法测定各组小鼠肝组织中mRNA的表达水平。 6.血清生化学的检测：取血清样本，酶联免疫吸附测定（ELISA）测定胰岛素水平。 7.采用SPSS19.0统计软件，所有计量资料以均数标准差（错误！未找到引用源。）表示，各组间比较采用单因素方差分析(ANOVA),以α=0.05。计数资料以例数（n）表示，多组间比较采用秩和检验，先做整体比较α=0.05，再做分割比较，适当调整显著性水准。相关分析使用Spearman检验。结果 1、干预初时空白对照组体重明显低于其余各组，有统计学差异(P0.01)，DB模型组血糖明显高于3组C57BL小鼠，有统计学差异（P0.01）。干预周期里，C57BL小鼠三组间血糖均无差异;干预结束时，C57干预组较C57模型组在体重、胰岛素水平和HOMA-IR指标上明显下降，有统计学差异（P0.01）。DB干预组较DB模型组在血糖、体重和HOMA-IR指标上明显下降，有统计学差异（P0.01）；DB干预组较DB模型组在胰岛素水平明显升高，有统计学差异（P0.01）。 2、C57及DB干预组、C57模型组及DB模型组均出现不同程度的脂肪肝的特征性病理改变。C57模型组及DB模型组小鼠出现肝脏体积增大、肝脂质沉积、肝细胞脂肪变性、炎性细胞浸润和肝细胞气球样变等脂肪肝的特征性病理改变，NAFLD活动度积分显著高于对照组，有统计学差异，(P0.01)。C57及DB干预组与各自模型组相比肝脏体积增大、肝脂质沉积、肝细胞脂肪变性、炎性细胞浸润和肝细胞气球样变的病理改变明显较轻，，NAS积分低于模型组，有统计学差异(P0.05)。各组均未出现严重的肝组织纤维化。C57及DB模型组与空白对照组相比纤维化程度较重，有统计学差异（P0.01）。C57及DB治疗组较各自模型组相比纤维化程度轻，有统计学差异（P0.01），与空白对照组相比无差异（P0.05）。小鼠肝组织油红O染色面积比空白对照组明显低于其余各组（P0.05），C57干预组明显低于C57模型组，有显著性差异（P0.01），DB干预组明显低于DB模型组（P0.05）。 3、空白对照组小鼠肝组织AC3mRNA的表达明显高于C57模型组和干预组、DB模型组和干预组（P0.01）。C57及DB干预组小鼠肝组织AC3mRNA的表达较各自模型组AC3mRNA表达明显升高，有显著性差异（P0.05）。 4、小鼠的肝组织脂肪沉积面积比Aa与小鼠体重呈正相关，Spearsman相关系数（r=0.898,p0.001）。肝组织脂肪沉积面积比Aa与HOMA-IR呈正相关: Spearsman相关系数（r=0.836,p0.001）。肝组织脂肪沉积面积比Aa与AC3-mRMA表达呈负相关：Spearsman相关系数（r=－0.818,p0.001）结论： 1、利拉鲁肽能减轻单纯肥胖小鼠和2型糖尿病肥胖小鼠体重，改善胰岛素抵抗和减少肝脏脂质沉积，对肥胖、非酒精性脂肪肝病有治疗作用。 2、利拉鲁肽可能通过调控AC3基因表达水平，从而改善单纯肥胖小鼠和2型糖尿病肥胖小鼠的肥胖、胰岛素抵抗和非酒精性脂肪肝病。
【关键词】：肥胖 非酒精性脂肪肝 糖尿病 利拉鲁肽 胰岛素抵抗
【学位授予单位】：广西医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2014
【分类号】：R589.2;R575.5
【目录】：

• 英文缩略词表4-5
• 摘要5-8
• ABSTRACT8-12
• 前言12-15
• 材料与方法15-26
• 结果26-36
• 讨论36-44
• 结论44-45
• 参考文献45-49
• 综述 非酒精性脂肪性肝病的研究进展49-55
• 参考文献52-55
• 致谢55

【参考文献】

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1 高慧亭;徐丽姝;李东风;关丽嫦;邓卫平;;GLP-1对非酒精性脂肪肝大鼠肝氧化应激及TNF-α、TGF-β1的影响[J];南方医科大学学报;2013年11期

2 陈晓路;;非酒精性脂肪肝发病机制研究进展[J];人民军医;2010年02期

3 Elizabeth M Brunt;Dina G Tiniakos;;Histopathology of nonalcoholic fatty liver disease[J];World Journal of Gastroenterology;2010年42期

4 ;中国2型糖尿病防治指南(2010年版)[J];中国糖尿病杂志;2012年01期

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本文编号：290795