IL-17F对大鼠成骨细胞的作用及与ERK1/2的关系

发布时间：2020-12-29 16:59

　　目的本实验在课题组前期对骨质疏松大鼠成骨细胞代谢变化的研究基础上,以IL-17F干预大鼠成骨细胞,进一步探究IL-17F对大鼠成骨细胞矿化功能的影响,以及对特异性转录因子Osterix及相关调节因子Runx2蛋白表达及对ERK通路激酶ERK1/2磷酸化水平的影响,探讨IL-17F对成骨细胞有否直接作用,及是否影响MAPK/ERK通路的激活,揭示其作用机制。方法1大鼠成骨细胞的分离、培养和鉴定采用酶消化法和组织块培养法分离提取新生24h内Wistar大鼠颅盖骨原代成骨细胞,采用差速贴壁法进行细胞纯化。用倒置相差显微镜观察细胞形态、生长情况,并采用碱性磷酸酶染色（钙钴法）进行细胞鉴定,取第4代成骨细胞进行研究。2实验分组与处理将第4代的成骨细胞进行分组处理和指标检测:2.1采用茜素红染色法检测IL-17F对成骨细胞矿化功能的影响分为两组:对照组和IL-17F组。对照组用含10%胎牛血清低糖DMEM培养基,实验组在培养基中加入100ng/mL IL-17F。培养10d后,用pH 4.3,0.1%茜素红染液进行矿化结节染色。2.2采用Western blot法检测Runx2、Osterix蛋白... 

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【参考文献】：
期刊论文
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本文编号：2945971