烟酰胺单核苷酸在糖皮质激素诱导的骨质疏松症中的作用及其机制研究

发布时间：2021-02-07 04:50

　　糖皮质激素引起的骨质疏松是最常见的继发性骨质疏松症。烟酰胺单核苷酸（NMN）是一种重要的NAD+中间体,是一种有效的治疗年龄相关性疾病的药物。但是烟酰胺单核苷酸在糖皮质激素诱导的骨质疏松症中的作用及其机制尚未完全清楚。本研究探讨了烟酰胺单核苷酸对地塞米松（Dex）诱导的成骨抑制的保护作用及其机制。我们用一定浓度的地塞米松处理骨髓间充质干细胞,发现地塞米松可以降低成骨标志物碱性磷酸酶、runt相关转录因子2（Runx2）和OCN水平。烟酰胺单核苷酸治疗可以减轻地塞米松诱导的成骨分化抑制、SIRT1和过氧化物酶体增殖激活受体共激活物-1α（PGC-1α）。敲除SIRT1可以逆转烟酰胺单核苷酸对成骨分化的保护作用和减少PGC-1α的表达水平。总之,我们的研究结果表明,烟酰胺单核苷酸通过上调SIRT1/PGC-1α信号通路来缓解糖皮质激素诱导的成骨抑制,烟酰胺单核苷酸可能是糖皮质激素诱导的骨质疏松症的潜在治疗方法。 

【文章来源】：南昌大学江西省 211工程院校

【文章页数】：40 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

地塞米松诱导骨髓间充质干细胞成骨抑制

第3章结果13图2：烟酰胺单核苷酸在地塞米松诱导的骨髓间充质干细胞成骨抑制中的作用。骨髓间充质干细胞培养于成骨分化培养基、含有10-5M地塞米松成骨分化培养基、含有10-5M地塞米松和烟酰胺单核苷酸(1，5和10mM)成骨分化培养基。(A)定量PCR检测骨髓间充质干细胞中Runx2、ALP和OCNmRNA的表达。(B)采用蛋白质免疫印迹（Westernblotting）检测骨髓间充质干细胞中Runx2和ALP蛋白质表达水平。(C)茜素红和碱性磷酸酶染色法评价经骨髓间充质干细胞的成骨能力。比例尺=20μm规模。所有实验均进行3次以上。***P<0.001，**P<0.01，*P<0.05。NMN：烟酰胺单核苷酸；Dex：地塞米松;BMSC：骨髓间充质干细胞；ALP：碱性磷酸酶；Runx2：runt相关转录因子2；OCN：骨钙素。

第3章结果15图3：SIRT1/PGC-1α信号通路参与烟酰胺单核苷酸对地塞米松诱导成骨抑制的保护。骨髓间充质干细胞分别在成骨分化培养基、含有地塞米松的成骨分化培养基、含有地塞米松和烟酰胺单核苷酸的成骨分化培养基中培养。(A)荧光定量PCR用于检测SIRT1,PGC-1α,Runx2和ALPmRNA在骨髓间充质干细胞中的表达水平。(B)蛋白质免疫印迹（Westernblot）用于确定SIRT1,PGC-1α,Runx2和ALP在骨髓间充质干细胞的蛋白表达水平。(C)ALP在骨髓间充质干细胞中的相对活性。(D)免疫荧光实验确定诱导两天的骨髓间充质干细胞中SIRT1蛋白表达水平。比例尺=5μm。所有实验均进行3次以上。***P<0.001，**P<0.01，*P<0.05。SIRT1：sirtuin蛋白1;PGC-1α：过氧化物酶体增殖物激活受体-γ共激活因子-1α;NMN:烟酰胺单核苷酸;Dex:地塞米松;BMSC:骨髓间充质干细胞;ALP:碱性磷酸酶;Runx2:runt相关转录因子2。


本文编号：3021682