HIF-1α调控Notch1信号通路在百草枯中毒致肺纤维化机制上的研究

发布时间：2021-04-26 12:33

　　目的:百草枯（Paraquat,简称PQ）是一种广泛使用的除草剂,对人畜均有较强的毒性,且无解毒剂,PQ中毒晚期可导致肺部纤维化直至呼吸衰竭而死亡。根据中毒后肺部上皮细胞转化为间质细胞的生理过程。我们认为缺氧诱导因子（HIF）在PQ中毒导致肺纤维化中起到了重要作用。在PQ中毒导致细胞严重缺氧的条件下,HIF通过结合缺氧反应元件激活下游众多靶基因,从而参与与肺部上皮细胞的血管生成和上皮间质转化（EMT）的环节。HIF也可以直接与细胞信号通路发生反应。本文旨在探索HIF-1α通过Notch1信号通路来调节PQ中毒所致肺部EMT的机制,从而控制纤维化的发生和进展,为PQ中毒的治疗寻找潜在的靶点。方法:1、PQ中毒的小鼠模型建立:以腹腔注射方式染毒,构建PQ染毒后小鼠的肺纤维化模型。方法:A组（生理盐水对照组）,B组10mg/kg（单次染毒组）,C组:20mg/kg（单次染毒组）,D组（10mg/kg隔日一次染毒组,共三次）染毒后观察至第21天麻醉处死小鼠取肺组织,镜下观察病理组织变化,马松染色,Ashcroft评分等方法来评估纤维化程度,提取小鼠肺组织蛋白以Western Blot检测HIF... 

【文章来源】：中国医科大学辽宁省

【文章页数】：53 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
Abstract
英文缩略语
第一部分 百草枯中毒致小鼠肺纤维化模型建立
    1 前言
    2 材料与方法
        2.1 动物与试剂
        2.2 处理方法
        2.3 苏木精-伊红染色（hematoxylin-eosin,HE染色）、马松（Masson染色）三色染色及Ashcroft评分
        2.4 Western Blot蛋白检测
        2.5 观察指标
        2.6 统计学方法
    3 结果
        3.1 一般情况
        3.2 生存分析
        3.3 苏木精-伊红（HE）染色
        3.4 Masson染色
        3.5 小鼠肺组织的Ashcroft评分
        3.6 Western Blot检测
    4 讨论
    5 结论
第二部分 HIF-1α通过调控Notch1通路诱导百草枯中毒发生EMT机制研究
    1 材料与方法
        1.1 材料人肺腺癌A549细胞
        1.2 主要试剂
        1.3 主要仪器设备
    2 方法
        2.1 细胞模型制备
        2.2 Western Blot
        2.3 Transwell实验
        2.4 MTT法检测细胞活性检测
        2.5 Realtime RT-PCR
        2.6 瞬时转染
        2.7 免疫共沉（Co-IP）
    3 结果
        3.1 在体外模拟百草枯中毒致纤维化的细胞模型
        3.2 Transwell结果
        3.3 Western Blot结果
        3.4 MTT结果
        3.5 Realtime RT-PCR结果
        3.6 HIF-1α和Notch1的Co-IP结果
        3.7 HIF-1α通过调控Notch1 通路调节PQ诱导的EMT
    4 讨论
    5 结论
本研究创新性的自我评价
参考文献
综述
    参考文献
攻读学位期间取得的研究成果
致谢
个人简历


【参考文献】：
期刊论文
[1]Hypoxia inducible factor（HIF） in the tumor microenvironment:friend or foe?[J]. Yanqing Huang,Daniel Lin,Cullen M.Taniguchi.  Science China（Life Sciences）. 2017(10)
[2]雷帕霉素对小鼠百草枯中毒导致肺纤维化的治疗作用(英文)[J]. Xue SHAO,Meng LI,Chong LUO,Ying-ying WANG,Ying-ying LU,Shi FENG,Heng LI,Xia-bing LANG,Yu-cheng WANG,Chuan LIN,Xiu-jin SHEN,Qin ZHOU,Hong JIANG,Jiang-hua CHEN.  Journal of Zhejiang University-Science B（Biomedicine & Biotechnology）. 2015(01)



本文编号：3161420