RNF186通过诱导内质网应激在小鼠胰岛素敏感性中的作用和机制研究

发布时间：2021-06-05 04:53

　　RNF（RING finger）家族包含有众多成员,其中的一些蛋白质具有E3泛素连接酶（RING finger E3）活性,大量研究表明它们在炎症反应和癌症的发生和发展中起重要作用。RNF186是RNF家族的一员,参与内质网应激（ER Stress）介导的细胞凋亡和不同细胞类型（例如HeLa细胞和结肠上皮细胞）的炎症发生过程,然而,RNF186在外周组织中的生理功能尚未明确。在本研究中,我们探讨了RNF186在内质网应激中的生理功能以及在调节小鼠胰岛素敏感性中的作用。我们的研究结果证实在糖尿病、肥胖和高脂饮食诱导的肥胖（DIO）小鼠肝脏中RNF186表达水平显著增加;分离小鼠肝原代细胞体外培养,并用腺病毒上调RNF186的表达,结果证实上调RNF186的表达将增加内质网应激传感器肌醇需要激酶1（IRE1）和C/EBP同源蛋白（CHOP）的表达水平,并且真核起始因子2α（eIF2α）的磷酸化水平也有所增加。进一步研究发现在肝原代细胞中上调RNF186可促进c-Jun N-末端激酶（JNK）介导的胰岛素受体底物1（IRS1）的磷酸化,降低了胰岛素的敏感性。同时,RNF186的过表达也显著增... 

【文章来源】：安徽医科大学安徽省

【文章页数】：64 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

肝脏RNF186基因表达水平在糖尿病和肥胖小鼠中失调(A-B)qPCR（A）和westernblot（B）结果显示db/m和db/db小鼠肝脏中RNF186的

RNF186 过表达诱导 IRE1α 和 CHOP 蛋白水平增加（图 2B 和 C）并促进 eIF2α 蛋白的磷酸化（图2D-E）。然而，剪接的 X-box 结合蛋白 1（XBP1s）和葡萄糖调节蛋白 78（GRP78）的 mRNA 及蛋白质水平未发生变化（图 3）。除此之外，我们也在 HepG2 细胞中进行了相同的实验，得到了与肝脏原代细胞中的相似的结果（图 4A）。Ad-RNF186处理组的 IRE1α 磷酸化水平显著高于对照组（图 4B）。在肝原代细胞中，过表达RNF186 后 IRE1α 的磷酸化水平并没有明显变化（数据未展示）。通过以上结果，我们观察到在不同的细胞类型中，RNF186 的功能有相同也有不同。

安徽医科大学硕士学位论文F186 for 24 h.) The protein expression levels of IRE1α and CHOP were quantified after normalization to β-) The phosphorylation levels of eIF2α were analysed by western blot in mouse primary hepatoected with Ad-GFP or Ad-RNF186 for 24 h.) eIF2α phosphorylation densitometry in (D).l experiments were conducted at least three times and included three technical replicateperiment. Data are presented as the means ±SEM. **p <0.01, ***p <0.001.


本文编号：3211474