RAGE/galectin-3通过sortilin介导斑块内钙化转归的研究
发布时间：2021-06-19 09:48
目的探讨sortilin在RAGE/galectin-3调控斑块内钙化转归中的作用机制。方法（1）临床研究选取2016年3月至2017年12月因“糖尿病足”在江苏大学附属医院骨科接受截肢手术的患者共30名,根据胫前动脉钙含量分为少钙化组（﹤5μmol/mg）和多钙化组。分析两组患者的临床资料,包括年龄,性别,BMI,糖尿病病程,既往疾病史、空腹血糖,胆固醇、甘油三酯和血清CML水平。Von Kossa钙盐染色显示各组患者胫前动脉钙结节形态并分析钙结节长径,免疫组织化学染色显示各组胫前动脉RAGE及galectin-3表达水平。（2）体外实验培养原代小鼠主动脉平滑肌细胞,利用成骨培养基、CML及oxLDL构建糖尿病血管钙化体外模型。在病毒沉默表达RAGE及galectin-3后,利用钙盐染色显示钙化形态,统计分析钙结节长径并判定钙化类型。利用Western blot明确RAGE、galectin-3沉默对于sortilin表达的影响。接着,在沉默RAGE/galectin-3的基础上,利用siRNA或重组蛋白分别阻断或增加sortiln的表达,行钙盐染色及钙定量分析,进一步探究sorti...
【文章来源】：江苏大学江苏省
【文章页数】：87 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
糖尿病足患者截肢后胫前动脉钙化类型及RAGE/galectin-3表达水平
< 0.05 compared with microcalcification of the less calcification group. Cith macrocalcifications or microcalcifications was detected by ELISA.化与微钙化血管中RAGE、galectin-3表达的情况内大钙化与微钙化患者的血清 CML 水平没有差异，因而我两个主要受体 RAGE 与 galectin-3 在大钙化与微钙化血管。通过免疫组织化学染色及其定量结果可知（图 1.1 第 2、3 行血管中 RAGE 表达明显少于 galectin-3，而微钙化的血管中 于 galectin-3。由此我们推测可能是 RAGE 和 galectin-3 在血挥了调控大钙化/微钙化转归的作用，为此我们设计了体外讨。
本部分所有数据分析均利用 SPSS 22.0 软件进行，计量资料以均数±标准差( ±s)的形式表示，两组正态分布的计量资料间差异比较采用 t 检验，非正态分布计量资料间差异比较采用 Wilcoxon 秩和检验。计数资料以频数和百分数表示，两组计数资料间的差异比较采用卡方检验。p<0.05 代表差异具有统计学意义。4 实验结果4.1 原代小鼠主动脉平滑肌细胞培养及鉴定取 C57 小鼠胸主动脉中膜平滑肌层，剪成组织块置于培养皿后，加入完全培养基培养约 3 天后镜下观察（图 2.1）。可见组织块边缘少许细胞爬出，形态多不规则。定期 2 天换液一次，可见爬出的细胞逐渐增多，并逐渐融合成片，此时细胞多成梭形，符合血管平滑肌细胞形态。利用 αSMA 抗体行免疫荧光染色标记平滑肌细胞，可见胞质中丝状物，且阳性细胞占细胞总数 90%以上，提示原代小鼠主动脉平滑肌细胞提取培养成功，可用于后续实验。
【参考文献】：
期刊论文
[1]Vascular calcification in chronic kidney disease: Pathogenesis and clinical implication[J]. Sinee Disthabanchong. World Journal of Nephrology. 2012(02)
本文编号：3237583
【文章来源】：江苏大学江苏省
【文章页数】：87 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
糖尿病足患者截肢后胫前动脉钙化类型及RAGE/galectin-3表达水平
< 0.05 compared with microcalcification of the less calcification group. Cith macrocalcifications or microcalcifications was detected by ELISA.化与微钙化血管中RAGE、galectin-3表达的情况内大钙化与微钙化患者的血清 CML 水平没有差异，因而我两个主要受体 RAGE 与 galectin-3 在大钙化与微钙化血管。通过免疫组织化学染色及其定量结果可知（图 1.1 第 2、3 行血管中 RAGE 表达明显少于 galectin-3，而微钙化的血管中 于 galectin-3。由此我们推测可能是 RAGE 和 galectin-3 在血挥了调控大钙化/微钙化转归的作用，为此我们设计了体外讨。
本部分所有数据分析均利用 SPSS 22.0 软件进行，计量资料以均数±标准差( ±s)的形式表示，两组正态分布的计量资料间差异比较采用 t 检验，非正态分布计量资料间差异比较采用 Wilcoxon 秩和检验。计数资料以频数和百分数表示，两组计数资料间的差异比较采用卡方检验。p<0.05 代表差异具有统计学意义。4 实验结果4.1 原代小鼠主动脉平滑肌细胞培养及鉴定取 C57 小鼠胸主动脉中膜平滑肌层，剪成组织块置于培养皿后，加入完全培养基培养约 3 天后镜下观察（图 2.1）。可见组织块边缘少许细胞爬出，形态多不规则。定期 2 天换液一次，可见爬出的细胞逐渐增多，并逐渐融合成片，此时细胞多成梭形，符合血管平滑肌细胞形态。利用 αSMA 抗体行免疫荧光染色标记平滑肌细胞，可见胞质中丝状物，且阳性细胞占细胞总数 90%以上，提示原代小鼠主动脉平滑肌细胞提取培养成功，可用于后续实验。
【参考文献】：
期刊论文
[1]Vascular calcification in chronic kidney disease: Pathogenesis and clinical implication[J]. Sinee Disthabanchong. World Journal of Nephrology. 2012(02)
本文编号：3237583
本文链接：https://www.wllwen.com/yixuelunwen/nfm/3237583.html
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