不同分子分型假性甲状旁腺功能减退症的临床特点研究

发布时间：2021-06-23 01:31

　　研究背景:假性甲状旁腺功能减退症（假性甲旁减）是一组以低血钙、高血磷以及甲状旁腺激素（PTH）抵抗为特征的内分泌疾病。可分为PHP1A/C,散发和家族PHP1B及PHP2。临床诊疗中主要以部分特殊的临床表现如Albright遗传性骨营养不良症（AHO）及除PTH外多种激素抵抗、家族史及遗传方式等进行分型。但是近年来多项研究显示各型间临床表现有重叠,且不同类型PHP患者致病分子机制及遗传方式不同。因此分子分型对明确诊断、比较不同PHP分型患者的临床特点有重要意义。假性甲状旁腺功能减退症患者的骨密度（BMD）异质性较大,从类似甲状旁腺功能亢进的纤维囊性骨炎到类似甲状旁腺功能减退症患者的骨密度升高均有个案报道。对PHP1B患者,虽然多数病例报道及队列研究观察到部分骨转换指标升高等骨重建增加的证据,但对BMD的改变却结论不一。研究目的:对中国人群PHP患者进行较准确的分子分型,基于该分型:1)比较临床表现方面的异同;2)探索不同分型PHP患者骨组织对PTH的反应性。对象与方法:1)不同分子分型PHP患者临床表现的比较:收集2000年到2016年至北京协和医院内分泌门诊就诊并临床诊断为PHP的患... 

【文章来源】：北京协和医学院北京市 211工程院校 985工程院校

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【学位级别】：博士

【部分图文】：

图１．ＧＡＭ５１基因及其上游５７Ｘ／６的结构与相应突变造成的甲基化异常

研％方法??一．研究流程（图１．１）??患者招暮－Ｉ纳入标淮：??持续性低血ＰＴＨ水平升高??排除标准：??｜?２０１０－２０１６间?１）?Ｈ旁昧功能减退症；??枳暮１２０例患者?２）继发性ｆ时味功蚊进；???—?１丨?３）严重肾或犴功能异常；??１４）近半年内有除钙制？維生Ｄ以外??对骨代读有明确影响的药物使同史：??５）低镁血症??牯集临床信息??Ｉ??检測?ＧＡ２Ｓ－ＮＥＳＰ：?ＴＳＳ－ＤＭＲ，?Ｇ．Ｙ：！孓ＡＳＬＴＳＳ－ＤＭＲ：?ＧＸ４孓ＸＬ：Ｅｘｌ－Ｄ＿ＭＲ：－ｆｅ??ＧＡ：４Ｓ?Ａ／Ｂ?ＴＳＳ－ＤＭＲ的甲基！Ｌ水乎及拷贝榖??甲基化ｉ常?／?＼?｜大于１个ＤＭＲ位点ｆ??（越）?／?ｒ＾Ｔｓ?ｂ弄索：???／?ＡＢ：ＴＳＳ－ＤＭＲ?＼??／?低甲基化?＼??ＧＮＡＳ，ＰＲＫＡＲＩＡ＇ＰＴＨＩＲ?散犮?ＰＨＰ?１Ｂ????家族性?ＰＨＰ１Ｂ?＾＝７３）??ＧＪＶ１Ｓ?突变?（Ｎ＝２１）?／??ｉｔ／??基因螌及表轚分折（Ｎ＝１０４）??图１．１研究流程图??二．假性甲状旁腺功能减退症患者临床资料收集??（１）临床表现及体征：通过询问病史和查体，收集以下信息：起病年龄；病??程，性别、身高、体重；主要症状：包括手足搐搦、感觉异常、癫痫发作史、智力??及青春发育状况、家族史等；慢性并发症：包括低钙性白内障、颅内钙化、肾脏钙??化或泌尿系结石等。??体格检查：血压、身高、体重；低钙血症相关体征包括面神经叩击征、束臂征；??１９??

用该方法被检测２０００－２０１０年间３５份样本及２０１０－２０１６年４６份新样本。??２．１）基本原理：ＭＬＰＡ的基本原理主要包括３部分：基因捕获连接、ＰＣＲ扩??增和毛细管电泳，其基本原理如图２．２［３０］。第一步，利用一组和目标序列互补的探??针，但是上游探针（与目标序列的３’端互补）仅在其５’端有ＰＣＲ引物序列Ｙ，??而下游探针（与目标序列的５’端互补）仅在３’端有ＰＣＲ引物序列Ｘ。因此，仅??当上下游探针均与目标序列结合时才能被连接酶链接。第二步，加入ＰＣＲ引物，仅??无序列改变的ＤＮＡ样本才能有效扩增探针序列，因此间接反映目的基因序列有无??突变。第三步，ＰＣＲ扩増产物（１３０－５００ｎｔ）用毛细管电泳分离，其相对数量以毛细??管电泳分离峰值与试剂盒内提供的标准ＤＮＡ样本量比较，可间接反应目标序列的??拷贝数目。ＭＬＰＡ可探测出小至点突变，大至大片段染色体序列缺失／重复，其敏感??度介于ｌｂｐ－１０Ｍｂｐ之间（图２．２Ａ）。ＭＳ－ＭＬＰＡ即在传统ＭＬＰＡ基础上


本文编号：3243945