n-3多不饱和脂肪酸对小鼠血液外泌体中miRNA的调节和抑制肥胖的作用

发布时间：2021-06-24 12:23

　　研究目的:利用可转化n-6多不饱和脂肪酸（Polyunsaturated fatty acids,PUFAs）为n-3多不饱和脂肪酸（n-3PUFAs）的fat-1转基因小鼠,研究体内n-3PUFAs的增加对小鼠体重和小鼠血液中外泌体mi RNA表达的影响,探讨n-3PUFAs通过外泌体的miRNA抑制肥胖的作用机制。研究方法:取健康的6周龄同窝小鼠,提取鼠尾中的DNA,通过PCR-琼脂糖凝胶电泳实验进行fat-1基因鉴定,判断其是否为fat-1转基因的小鼠。将鉴定好的小鼠分为四组:fat-1普通饮食（Normal Diet,ND）组、野生普通饮食组、fat-1高脂饮食组（High Fat Diet,HFD）和野生高脂饮食组,每组6只,进行8周的喂食。测量体长和体重,并且计算小鼠的Lee’s指数,判断高脂饮食喂养诱导的肥胖模型是否建立成功。模型建立成功后获取小鼠外周血,用超速离心法抽提血浆中的外泌体。电镜观察外泌体的表观情况;粒径技术检测外泌体颗粒大小;WB追踪鉴定外泌体。提取分离外泌体内的RNA,构建文库并进行mi RNA高通量测序。根据测序结果,运用生物信息学的方法,筛选差异表达的... 

【文章来源】：青岛大学山东省

【文章页数】：55 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

fat-1基因琼脂糖凝胶电泳鉴定结果

外泌体鉴定结果

结果17图3有效序列中各SmallRNA分类注释图Fig3.AnnotationsofSmallRNAClassificationinEffectiveSequence注：HFD-FAT-1、HFD-FAT-2、HFD-FAT-3为高脂饮食的fat-1小鼠血浆样本，HFD-WT-1、HFD-WT-2、HFD-WT-3为高脂饮食的野生型小鼠血浆对照样本。不同类型smallRNA（包括miRNA、rRNA、tRNA等）基因组位置的序列数目及比例，采用不同颜色进行区分，扇形面积越大，所占比例就越高，其中Others表示所占比例低于1%的smallRNA序列总和，Unmatched表示未比对上的序列。

【参考文献】：
期刊论文
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硕士论文
[1]n-3PUFAs调节小鼠体重及对下丘脑自噬与炎症的影响[D]. 房鑫.青岛大学 2018
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本文编号：3247091