Nrf2调控小鼠代谢稳态和炎症因子分泌的多重功能及机制研究

发布时间：2021-07-14 12:02

　　第一部分脂肪组织特异性敲除Nrf2小鼠通过调节糖脂及能量代谢延缓高脂饮食诱导的肥胖研究背景和目的:核转录因子Nrf2是熟知的抗氧化应激和降解毒素的总管因子。白色脂肪组织是能量储存库,也是内分泌器官,分泌多种免疫和炎症介质调节心血管疾病、胰岛素抵抗、2型糖尿病和脑功能失调等。最近有研究表明,全身性敲除Nrf2小鼠可以调节糖脂及能量代谢。为了理解Nrf2在脂肪生成和脂肪功能中的复杂作用,本实验研究了脂肪组织特异性敲除Nrf2小鼠对饮食诱导肥胖的影响。实验方法:本实验利用转基因小鼠杂交技术成功获得脂肪组织特异性敲除Nrf2（ASAN/NK）小鼠模型。选取6周龄ASAN（NK）小鼠和Nrf2对照小鼠（NC）,分别给与14周对照饮食（CD）或高脂饮食（HFD）。本实验分成四组,分别为:对照饮食的Nrf2对照小鼠组（NC-CD）、高脂饮食的Nrf2对照小鼠组（NC-HFD）、对照饮食的ASAN小鼠组（NK-CD）、高脂饮食的ASAN小鼠组（NK-HFD）,每组各6只。记录小鼠每周体重变化,并用活鼠身体组成分析仪检测小鼠总体脂及肌肉含量。在CD/HFD喂食第8周时用最大氧耗间接热量测定系统持续监测小... 

【文章来源】：华中科技大学湖北省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

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【学位级别】：博士

【部分图文】：

巨噬细胞中敲低Nrf2（NK）导致AKT和mTOR信号通路改变

73图 2-4.HUVEC 分离鉴定以及巨噬细胞条件培养基对其细胞活力的影响。(A)成功分离人脐静脉内皮细胞（HUVEC），并连续培养直 PDL8 代，在倒置显微镜下观察其形态，并拍照（200X）；（B）用 CD31 抗体染色鉴定 HUVEC，细胞纯度大于 98%；（C）用 CCK8试剂盒检测不同浓度巨噬细胞条件培养基对内皮细胞活力的影响。不同字母表示干预组间有差异；n=6/组，本研究使用独立样本 T 检验，P<0.05 表示有统计学差异。

74图 2-5 不同组巨噬细胞条件培养基（Con-CM、M1-CM、NK-CM、NK-M1-CM）对内皮细胞炎症和衰老指标的影响。（A）各组 CM 对内皮细胞炎症指标 ICAM-1 和 VCAM-1 mRNA 表达的影响；（B）各组 CM 对内皮细胞衰老指标 P53，P21，P16 mRNA 表达的影响；（C）WB 检测各组 CM 对内皮细胞炎症和衰老指标蛋白水平的影响；（D）条件培养基干预内皮细胞后，各组内皮细胞中 ICAM-1 蛋白相对表达水平；（E）条件培养基干预内皮细胞后，各组内皮细胞中 VCAM-1 蛋白相对表达水平；（F）条件培养基干预内皮细胞后，各组内皮细胞中各衰老指标的蛋白相对表达水平。不同字母表示干预组间有差异；n=4/组，本研究使用独立样本 T 检验，P<0.05 表示有统计学差异。ICAM-1，细胞间黏附分子-1；VCAM-1，血管细胞黏附分子-1；CM，条件培养基；Con-CM,正常对照组巨噬细胞条件培养基；M1-CM，M1 激活巨噬细胞条件培养基；NK-CM，Nrf2 敲低组巨噬细胞条件培养基；NK-M1-CM，敲低 Nrf2 的 M1 激活巨噬细胞条件培养基。


本文编号：3284109