MicroRNA-126对人肝细胞糖代谢影响的机制研究
发布时间：2021-07-14 15:44
背景随着生活节奏的加快,生活水平的提高,在人们的生活方式发生巨大变化的同时,代谢性疾病的发病率也在全世界范围内逐年攀升,其中糖尿病是代谢性疾病中最常见的一种。在2型糖尿病的发生发展过程中,肝脏、肌肉、脂肪等组织对胰岛素反应能力下降甚至抵抗胰岛素的作用,继而会引起一些如肥胖、多囊卵巢综合症、高脂血症及动脉粥样硬化等疾病。肝脏是糖代谢的重要器官,胰岛素主要通过胰岛素受体底物（IRS）/磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）/蛋白激酶B（Akt）信号传导通路影响肝脏的糖代谢,然而肝脏胰岛素抵抗的发病机制,目前仍不明确。Micro RNAs（mi RNAs）是一类短小的、非编码的微小RNAs,对维持机体自身稳态的平衡、疾病的产生和发展过程中有着重要影响,它们与靶信使RNA（m RNA）的3’非翻译区（3’-UTRs）结合,抑制编码蛋白基因的转录后表达。Micro RNA-126不仅在内皮细胞中含量丰富,在凋亡小体中的表达也很高,国内外的研究发现,在糖尿病动物模型以及在糖尿病患者的血浆中,Micro RNA-126的表达量明显降低,因此我们认为Micro RNA-126可能与糖尿病的发生与发展有联系。R...
【文章来源】：郑州大学河南省 211工程院校
【文章页数】：64 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
培养的张氏肝细胞照片
图 2A-F FAM-NC 及 inhibitor FAM-NC 在张氏肝细胞转染效率的验证Figure2 A-F Transfection efficiency of FAM-NC and inhibitor FAM-NC in Chang liver cells注：A: FAM-NC（20 nmol/L）B: FAM-NC（40 nmol/L）C:FAM-NC（80 nmol/L）D:inhibitorFAM-NC （20 nmol/L） E: inhibitor FAM-NC (40 nmol/L) F: inhibitor FAM-NC (80 nmol/L)1.3 实时荧光定量 PCR 检测细胞中 MicroRNA-126 相对表达量:为了改变张氏肝细胞中 MicroRNA-126 的表达，合成了 MicroRNA-126 类似物（MicroRNA-126 mimics）、MicroRNA-126 抑制物（MicroRNA-126 inhibitor）、MicroRNA-126 类似物阴性对照物（MicroRNA-126 mimics negative control）、MicroRNA-126 抑制物阴性对照物（MicroRNA-126 inhibitor negative control），按照实验方法 2.3.1 的分组，用脂质体 Lipofectamine2000 分别转染上述核苷酸序列，利用实时荧光定量 PCR 检测不同转染组细胞中 MicroRNA-126 相对表达量。结果显示：MicroRNA-126 类似物转染组细胞中 MicroRNA-126 的相对表达量较正常对照组显著增加（t=20.82，P<0.05）；其他组 MicroRNA-126 表达量与正
图3 Western blot法测定不同组细胞中IRS-1的蛋白表达量水平，GA氢酶) 作为内参蛋白Figure 3 The expression of IRS-1 in different groups was detecteGAPDH was used for protein level normalization.注: 1.正常对照组 2. Lipofectamine 2000组 3.MicroRNA-126抑制物4. MicroRNA-126类似物阴性对照组 5.MicroRNA-126抑制物组 6.M1 2 3 4 5 6PG图 4 Western blot法测定不同组细胞中PIK3R2的蛋白表达量水平，脱氢酶) 作为内参蛋白
【参考文献】：
期刊论文
[1]循环miRNA-126在2型糖尿病患者中的表达变化及其相关性研究[J]. 任彦红,黄婷,时学秀,闫丹丹,栗夏连. 中国糖尿病杂志. 2014(07)
[2]MicroRNAs-126（miR-126）的生物学功能[J]. 杨东,张红. 现代生物医学进展. 2012(14)
[3]2型糖尿病患者血清miR-126表达的临床意义[J]. 卢佩颖,谷卫,陈岳明. 心脑血管病防治. 2012(01)
[4]短发夹状RNA干扰窖蛋白-1表达对人肝细胞增殖的影响[J]. 任刚,刘英,王孝敏,赵春晖,邹伟. 中华肝脏病杂志. 2008 (05)
[5]L02细胞人鼠嵌合肝模型的建立[J]. 林沪,毛青,王宇明,蒋业贵,邓国宏,蒋黎. 中华肝脏病杂志. 2006(08)
本文编号：3284430
【文章来源】：郑州大学河南省 211工程院校
【文章页数】：64 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
培养的张氏肝细胞照片
图 2A-F FAM-NC 及 inhibitor FAM-NC 在张氏肝细胞转染效率的验证Figure2 A-F Transfection efficiency of FAM-NC and inhibitor FAM-NC in Chang liver cells注：A: FAM-NC（20 nmol/L）B: FAM-NC（40 nmol/L）C:FAM-NC（80 nmol/L）D:inhibitorFAM-NC （20 nmol/L） E: inhibitor FAM-NC (40 nmol/L) F: inhibitor FAM-NC (80 nmol/L)1.3 实时荧光定量 PCR 检测细胞中 MicroRNA-126 相对表达量:为了改变张氏肝细胞中 MicroRNA-126 的表达，合成了 MicroRNA-126 类似物（MicroRNA-126 mimics）、MicroRNA-126 抑制物（MicroRNA-126 inhibitor）、MicroRNA-126 类似物阴性对照物（MicroRNA-126 mimics negative control）、MicroRNA-126 抑制物阴性对照物（MicroRNA-126 inhibitor negative control），按照实验方法 2.3.1 的分组，用脂质体 Lipofectamine2000 分别转染上述核苷酸序列，利用实时荧光定量 PCR 检测不同转染组细胞中 MicroRNA-126 相对表达量。结果显示：MicroRNA-126 类似物转染组细胞中 MicroRNA-126 的相对表达量较正常对照组显著增加（t=20.82，P<0.05）；其他组 MicroRNA-126 表达量与正
图3 Western blot法测定不同组细胞中IRS-1的蛋白表达量水平，GA氢酶) 作为内参蛋白Figure 3 The expression of IRS-1 in different groups was detecteGAPDH was used for protein level normalization.注: 1.正常对照组 2. Lipofectamine 2000组 3.MicroRNA-126抑制物4. MicroRNA-126类似物阴性对照组 5.MicroRNA-126抑制物组 6.M1 2 3 4 5 6PG图 4 Western blot法测定不同组细胞中PIK3R2的蛋白表达量水平，脱氢酶) 作为内参蛋白
【参考文献】：
期刊论文
[1]循环miRNA-126在2型糖尿病患者中的表达变化及其相关性研究[J]. 任彦红,黄婷,时学秀,闫丹丹,栗夏连. 中国糖尿病杂志. 2014(07)
[2]MicroRNAs-126（miR-126）的生物学功能[J]. 杨东,张红. 现代生物医学进展. 2012(14)
[3]2型糖尿病患者血清miR-126表达的临床意义[J]. 卢佩颖,谷卫,陈岳明. 心脑血管病防治. 2012(01)
[4]短发夹状RNA干扰窖蛋白-1表达对人肝细胞增殖的影响[J]. 任刚,刘英,王孝敏,赵春晖,邹伟. 中华肝脏病杂志. 2008 (05)
[5]L02细胞人鼠嵌合肝模型的建立[J]. 林沪,毛青,王宇明,蒋业贵,邓国宏,蒋黎. 中华肝脏病杂志. 2006(08)
本文编号：3284430
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