脂肪干细胞联合富血小板血浆促进糖尿病创面愈合的研究
发布时间：2021-07-24 20:57
目的:观察脂肪干细胞（ADSC）联合富血小板血浆（PRP）对糖尿病创面修复的影响,并探讨其机制。方法:（1）采用酶消法分离培养雄性SD大鼠ADSC;采用Sonnleitner法制备PRP;采用高脂高糖饲料喂养联合腹腔注射1%链脲霉素溶液构建雌性糖尿病SD大鼠模型;（2）在糖尿病大鼠中构建创面模型,分别采用PBS、PRP、ADSC以及ADSC+PRP治疗创面。定期于术后第1、3、7、10、14天观察创面肉芽组织生长情况,留取创面组织进行石蜡包埋并制作切片,采用HE染色、免疫组化及免疫荧光法观察创面血管化、再上皮化、巨噬细胞浸润程度、上皮-间质转化及瘢痕形成情况;（3）采用MTS法、流式细胞技术和原位杂交法分别观察PRP与ADSC对内皮细胞（EC）与成纤维细胞（3T3）增殖与迁移能力的影响以及PRP对ADSC存活、转归和功能维持的影响;（4）采用免疫组化法及Q-PCR技术观察PRP、ADSC以及ADSC联合PRP对创面修复相关分子SDF1/CXCR7表达的影响。结果:（1）ADSC联合PRP可显著促进糖尿病创面修复过程中的微血管形成,再上皮化、胶原成熟度,并减轻巨噬细胞浸润程度与细胞外基质...
【文章来源】：福建医科大学福建省
【文章页数】：78 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
ADSC的培养及鉴定Figure1.1DevelopmentandidentificationofADSC.A（.a）P0脂肪干细胞培养40X（标尺100um）；（b）P3脂肪干细胞培养40X（标尺100um）；
图 1.2 PRP 的制备及其与 ADSC 的最佳配比Figure 1.2 Preparation of PRP and its Optimum Ratio to ADSCA.TRANSWELL 下室中不同浓度 PRP 对上室等量 ADSC 的迁移趋化作用，（a）-（h）TRANSWELL 小室分别为 10%FBS+DMEM/LG、5%PRP+DMEM/LG、10%PRP+DMEM/LG、20%PRP+DMEM/LG、30%PRP+DMEM/LG、40%PRP+DMEM/LG、80%PRP+DMEM/LG、100%PRP+DMEM/LG，(标尺 100um); B. TRANSWELL 下室中不同浓度 PRP 对上室等量 ADSC 的迁移细胞数，示 20%PRP+DMEM/LG 对 ADSC 迁移趋化作用最佳（*,P<0.05;**,P<0.01;***,P<0.001）3.ADSC 联合 PRP 促进糖尿病创面愈合ADSC 与 PRP 均能促进创面愈合，为进一步研究二者联用对糖尿病创面愈合的影响，本研究在糖尿病大鼠中构建创面模型，并分别采用 ADSC 单用、PRP 单用与 ADSC 联合 PRP 法治疗创面。实验结果表明，单用 ADSC 或 PRP均对糖尿病创面有治疗效果，然而当联合 ADSC 与 PRP 时，对糖尿病创面愈合的治疗效果最佳（图 1.3），二者呈协同作用。
29图 1.3 脂肪干细胞联合富血小板血浆促进糖尿病大鼠皮肤创面修复Figure 1.3 Adipose-derived stem cells combined with platelet-rich plasma promote the healingof wound in diabetic ratsA．糖尿病大鼠皮肤创面构建术后 1、3、7、10、14 天创面闭合情况，(标尺 1cm).B.创面闭合率曲线，ADSC+PRP 组创面闭合显著快于 PBS 组，在术后 10 天创面闭合，而其余各组在术后 14 天均未闭合（*,P<0.05;**,P<0.01;***,P<0.001）4. ADSC 联合 PRP 调控糖尿病创面愈合的多个生物学进程创面愈合包括凝血期、炎症期、增殖期和重塑期，其中涉及血管形成、组织再上皮化、炎症应答、上皮-间质转化以及瘢痕形成等多个有序而重叠的阶段。为观察 ADSC 联合 PRP 在促进糖尿病创面愈合过程中所发挥的作用，本研究依次研究二者对多个创面修复进程的影响。采用 HE 染色法观察 ADSC与 PRP 对糖尿病创面组织血管化的影响，结果发现 ADSC 联合 PRP 组能明显
【参考文献】：
期刊论文
[1]人脂肪干细胞复合富血小板血浆治疗裸鼠放射性皮肤损伤的实验研究[J]. 张琳,富泽龙,冯锐. 医学研究杂志. 2015(07)
本文编号：3301415
【文章来源】：福建医科大学福建省
【文章页数】：78 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
ADSC的培养及鉴定Figure1.1DevelopmentandidentificationofADSC.A（.a）P0脂肪干细胞培养40X（标尺100um）；（b）P3脂肪干细胞培养40X（标尺100um）；
图 1.2 PRP 的制备及其与 ADSC 的最佳配比Figure 1.2 Preparation of PRP and its Optimum Ratio to ADSCA.TRANSWELL 下室中不同浓度 PRP 对上室等量 ADSC 的迁移趋化作用，（a）-（h）TRANSWELL 小室分别为 10%FBS+DMEM/LG、5%PRP+DMEM/LG、10%PRP+DMEM/LG、20%PRP+DMEM/LG、30%PRP+DMEM/LG、40%PRP+DMEM/LG、80%PRP+DMEM/LG、100%PRP+DMEM/LG，(标尺 100um); B. TRANSWELL 下室中不同浓度 PRP 对上室等量 ADSC 的迁移细胞数，示 20%PRP+DMEM/LG 对 ADSC 迁移趋化作用最佳（*,P<0.05;**,P<0.01;***,P<0.001）3.ADSC 联合 PRP 促进糖尿病创面愈合ADSC 与 PRP 均能促进创面愈合，为进一步研究二者联用对糖尿病创面愈合的影响，本研究在糖尿病大鼠中构建创面模型，并分别采用 ADSC 单用、PRP 单用与 ADSC 联合 PRP 法治疗创面。实验结果表明，单用 ADSC 或 PRP均对糖尿病创面有治疗效果，然而当联合 ADSC 与 PRP 时，对糖尿病创面愈合的治疗效果最佳（图 1.3），二者呈协同作用。
29图 1.3 脂肪干细胞联合富血小板血浆促进糖尿病大鼠皮肤创面修复Figure 1.3 Adipose-derived stem cells combined with platelet-rich plasma promote the healingof wound in diabetic ratsA．糖尿病大鼠皮肤创面构建术后 1、3、7、10、14 天创面闭合情况，(标尺 1cm).B.创面闭合率曲线，ADSC+PRP 组创面闭合显著快于 PBS 组，在术后 10 天创面闭合，而其余各组在术后 14 天均未闭合（*,P<0.05;**,P<0.01;***,P<0.001）4. ADSC 联合 PRP 调控糖尿病创面愈合的多个生物学进程创面愈合包括凝血期、炎症期、增殖期和重塑期，其中涉及血管形成、组织再上皮化、炎症应答、上皮-间质转化以及瘢痕形成等多个有序而重叠的阶段。为观察 ADSC 联合 PRP 在促进糖尿病创面愈合过程中所发挥的作用，本研究依次研究二者对多个创面修复进程的影响。采用 HE 染色法观察 ADSC与 PRP 对糖尿病创面组织血管化的影响，结果发现 ADSC 联合 PRP 组能明显
【参考文献】：
期刊论文
[1]人脂肪干细胞复合富血小板血浆治疗裸鼠放射性皮肤损伤的实验研究[J]. 张琳,富泽龙,冯锐. 医学研究杂志. 2015(07)
本文编号：3301415
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