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虾过敏患者TM-sIgE和sIgG4抗体表达水平及抗原表位谱分析

发布时间:2021-09-01 19:53
  目的:海产品过敏患病率较高,对人体健康危害也较大,可是目前食物过敏的精确诊断仍然存在困难。原肌球蛋白是甲壳类海产品的主要致敏组分,基于原肌球蛋白的组分诊断可以显著提高虾过敏的诊断准确度。原肌球蛋白对于其他种类海产品过敏的诊断也有重要的意义。但是,由于食物过敏反应具有显著地域和种族特征,饮食文化不同,同样给食物过敏带来复杂性,参阅文献显示,关于原肌球蛋白在虾过敏患者中sIgE、sIgG4的反应频率、识别的抗原表位、跟尘螨/蟑螂等其他物种的交叉反应都存在争议。此外IgG4在虾过敏中的临床意义还不明确。本研究的目的是分析中国北方沿海地区虾过敏患者TM-sIgE和sIgG4抗体表达水平以及所识别的抗原表位谱。方法:1.研究对象本研究所有血清样本均来自天津市港口医院和天津市中医药研究院附属医院。过敏的诊断根据病史和血清sIgE水平确定。2.TM-sIgE和sIgG抗体表达水平制备虾的重组TM蛋白。用生物素标记重组TM蛋白,用抗人IgE/IgG4包被发光微球,构建光激化学发光分析检测体系。优化最优的血清稀释度、包被抗体的浓度等条件。测定过敏患者TM-sIgE和sIgG4抗体表达水平。确定最佳诊断阈... 

【文章来源】:天津医科大学天津市 211工程院校

【文章页数】:92 页

【学位级别】:硕士

【部分图文】:

虾过敏患者TM-sIgE和sIgG4抗体表达水平及抗原表位谱分析


pET-28a质粒载体结构示意图

分子量,PCR扩增,后产物,产物


1.3 TM 目的基因 PCR 扩增的 SDS-PAGE-PAGE analysis of PCR amplification of th注:1:PCR 产物, M: 分子量标记 TM 目的基因 PCR 扩增后产物约 930 b段大小加上保护碱基后 930bp 相符。

酶切图,重组克隆,质粒,重组蛋白


图 1.4 重组克隆质粒酶切 SDS-PAGE 鉴定re 1.4 SDS-PAGE analysis of recombinant plwith restriction enzymes digestion 质粒; 2. 用 BamH I 和 Hind III 酶切的 pET-28a(+蛋白在 E.coli 中表达,将构建到 pET-28a(粒用 BamHI-HindIII 酶切,获得的条带约400bp 的大小一致。酶切结果表明获得了含分析电泳结果表明重组蛋白的纯度为 95-

【参考文献】:
期刊论文
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硕士论文
[1]蛋清sIgE抗体光激化学发光分子诊断方法的建立及应用[D]. 边颖.天津医科大学 2018



本文编号:3377587

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