高糖胁迫诱发家蝇氧化应激与线粒体功能损伤

发布时间：2021-10-14 17:23

　　高糖饮食会诱发多种代谢性疾病,然而高糖摄入导致的损伤机制尚不清晰,该科学问题值得深入研究。本论文以家蝇（Musca domestica）为实验材料,旨在研究高糖摄入对家蝇的机体损伤机制,从生长发育、糖脂代谢和氧化应激3个层次深入阐述,重点关注线粒体功能变化。本研究涉及的主要内容和结果如下:1)家蝇线粒体转录因子A（mitochondrial transcription factor A,TFAM）基因MdTFAM的克隆鉴定。MdTFAM基因cDNA（GenBank登录号:MK519375）包含一个762 bp的完整开放阅读框,编码253个氨基酸残基。MdTFAM蛋白结构中含有2个串联的HMG（high mobility group）结构域。利用qRT-PCR（quantitative real-time PCR）技术对MdTFAM在不同发育阶段和不同组织中的表达水平进行分析,结果表明MdTFAM在家蝇卵期和幼虫的肠道及脂肪体中呈高表达。该基因受到紫外线（ultraviolet,UV）,盐酸阿霉素（doxorubicin,DOX）和氯化镉胁迫刺激后会显著上调表达,说明此基因可能参与家蝇的... 

【文章来源】：河北大学河北省

【文章页数】：65 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
abstract
第一章 文献综述
    1.1 高糖饮食的危害及昆虫中糖代谢机制
    1.2 线粒体的功能
    1.3 家蝇
    1.4 研究目的及意义
第二章 实验材料与实验方法
    2.1 实验材料
    2.2 实验仪器
    2.3 TFAM基因克隆实验方法
    2.4 TFAM功能分析
    2.5 高糖胁迫家蝇幼虫
        2.5.1 家蝇糖胁迫方案
        2.5.2 蔗糖胁迫对家蝇生长发育的影响
        2.5.3 台盼蓝(Trypan blue)染色实验
        2.5.4 家蝇幼虫爬行实验
        2.5.5 MDA、ROS测定
        2.5.6 DNA损伤检测
        2.5.7 q RT-PCR检测线粒体基因表达
        2.5.8 高糖胁迫后家蝇幼虫葡萄糖海藻糖含量的测定
        2.5.9 家蝇幼虫糖原含量的测定
        2.5.10 家蝇幼虫 TAG 含量的测定和脂肪体染色观察
        2.5.11 脂代谢相关基因测定
第三章 实验结果
    3.1 Md TFAM基因的表达及其功能分析
        3.1.1 Md TFAM基因的鉴定及生物信息分析
        3.1.2 Md TFAM在家蝇不同发育阶段和组织中的表达规律
        3.1.3 Md TFAM在氯化镉胁迫条件下的表达分析
        3.1.4 氯化镉处理引发家蝇幼虫氧化应激反应和线粒体受损
        3.1.5 DOX和紫外线处理家蝇幼虫引发Md TFAM的表达变化
    3.2 高糖胁迫对家蝇幼虫生长发育的影响
        3.2.1 蔗糖胁迫后家蝇幼虫生长发育的变化
        3.2.2 家蝇幼虫肠道台盼蓝染色结果
        3.2.3 家蝇幼虫爬行能力测定
    3.3 高糖胁迫造成家蝇幼虫糖脂代谢紊乱
        3.3.1 家蝇幼虫葡萄糖海藻糖含量的变化
        3.3.2 家蝇幼虫糖原含量的变化
        3.3.3 家蝇幼虫中TAG含量变化
        3.3.4 脂代谢相关基因定量分析
    3.4 高糖胁迫造成家蝇幼虫氧化应激诱发线粒体功能损伤
        3.4.1 高糖胁迫后家蝇幼虫MDA及ROS含量的变化
        3.4.2 DNA损伤实验
        3.4.3 线粒体活性的测定
        3.4.4 线粒体电镜观察
        3.4.5 线粒体相关基因表达量的测定
第四章 讨论
    4.1 家蝇线粒体转录因子(Md TFAM)
    4.2 高糖胁迫导致家蝇幼虫生长发育变缓
    4.3 高糖胁迫导致家蝇幼虫肠道组织受损并伴随运动能力下降
    4.4 高糖胁迫造成家蝇幼虫糖脂代谢紊乱
    4.5 高糖胁迫引发家蝇幼虫氧化应激反应并损伤线粒体功能
第五章 结论
参考文献
致谢
攻读学位期间取得的科研成果


【参考文献】：
期刊论文
[1]粘质沙雷氏菌PS-1菌株对甜菜夜蛾幼虫中肠结构及消化酶活性的影响[J]. 赵晓峰,向亚林,凌冰,许小霞,张茂新.  环境昆虫学报. 2017(03)
[2]昆虫糖脂代谢研究进展[J]. 魏琪,苏建亚.  昆虫学报. 2016(08)
[3]氡暴露致小鼠肺组织线粒体转录因子A及核因子-κB表达的改变[J]. 裴炜炜,陶立静,聂继华,童建.  环境与职业医学. 2016(04)
[4]高脂饲料喂饲C57小鼠诱发胰岛素抵抗过程中肝脏氧化应激水平及Nrf2、NRF-1和mtTFA蛋白表达的变化[J]. 刘颖,傅晗,师腾瑞,刘江正,王欣,海春旭.  癌变·畸变·突变. 2015(03)
[5]以成熟果蝇为模型研究血糖动态变化[J]. 李昆朋.  中国畜牧兽医文摘. 2013(04)
[6]糖尿病小鼠肝脏脂肪酸合成酶的动态表达[J]. 王冰,程丽静,刘明川,高政南.  大连医科大学学报. 2013(02)
[7]线粒体脂质过载与胰岛素抵抗[J]. 邹琪婧,曹仁贤,洪涛.  现代医药卫生. 2012(06)
[8]2型糖尿病患者三酰甘油脂肪酶水平与肥胖及其胰岛素抵抗的关系[J]. 杨莉,邸阜生,王璐,贾国瑜,洪燕青,刘聪.  中国慢性病预防与控制. 2011(04)
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[10]高效液相色谱法快速检测海藻糖[J]. 王成君,林建平,岑沛霖.  江南大学学报. 2005(05)

博士论文
[1]棉铃虫蛹滞育的糖代谢相关基因研究[D]. 林先武.中山大学 2016
[2]LBP-4a改善胰岛素抵抗及治疗糖尿病肾病作用的研究[D]. 赵蕊.燕山大学 2007

硕士论文
[1]镉胁迫和细菌感染对家蝇线粒体功能的影响[D]. 李亚静.河北大学 2018
[2]白藜芦醇在家蝇体内的转化以及抗氧化功能的研究[D]. 邢建晓.河北大学 2017
[3]家蝇MdSirt1和MdSirt4基因的克隆及功能分析[D]. 顾冀海.河北大学 2016



本文编号：3436544