BMDC通过Jagged1/Notch3信号抑制胸腺上皮细胞系mTEC1细胞增殖

发布时间：2021-10-26 05:22

　　目的:探索因严重感染、器官移植排斥反应等临床重大疾病所导致的胸腺退化和萎缩的可能机制,以期为临床治疗上述疾病引起的胸腺萎缩和T细胞免疫缺陷的重建提供理论依据和技术支持。方法:采用GM-CSF和IL-4体外诱导EGFP^Tg/+小鼠骨髓细胞分化为髓源树突状细胞（bone marrow derived dendritic cell,BMDC）,经LPS诱导活化成为成熟的DC后,心内注射过继到同品系小鼠体内,并通过流式细胞术检测过继小鼠胸腺中GFP⁺CD11c⁺细胞比例。流式细胞术检测BMDC上Jagged1的表达水平,免疫荧光检测Notch受体（Notch1和Notch3）在不同周龄的小鼠胸腺中的分布。将BMDC与小鼠胸腺上皮细胞系mTEC1共培养以及包被不同浓度的Jagged1重组蛋白与mTEC1细胞共培养,Edu增殖试剂盒检测mTEC1细胞增殖水平变化。在两个共培养的体系中分别加入高浓度和低浓度γ分泌酶抑制剂DAPT处理,Edu增殖试剂盒检测mTEC1细胞增殖水平的改变。最后构建Notch3胞内活化片段NICD3的慢病毒表... 

【文章来源】：江苏大学江苏省

【文章页数】：68 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

小鼠DC发育图解

ged1/Notch3 信号抑制胸腺上皮细胞系 mTEC1 细胞增殖； 4℃预冷的 10%CaCl2-甘油，轻轻吹打重悬，0 μL/管，-80℃储存。载体的构建及扩增nk 中 Notch3 基因（NM_008716.2），NICD3 位，共计 1968bp，按照该序列进行人工合成包含D3 的 DNA 序列（生工生物工程（上海）股份有3.1，将合成的 NICD3 的 DNA 片段退火酶载体；

BMDC上MHC-Ⅱ,CD80,CD86的表达Fig4.1TheexpressionofMHC-Ⅱ,CD80,CD86inBMDC


本文编号：3458915