葛根素联合ADSCs支架修复绝经后骨质疏松大鼠胫骨缺损的实验研究及机制初探
发布时间：2021-11-22 13:37
目的:通过SD（Sprague Dawley,SD）大鼠体内实验,探索葛根素联合脂肪干细胞（adipose-derived stem cells,ADSCs）支架修复绝经后骨质疏松（postmenopausal osteoporosis,PMOP）大鼠胫骨缺损的能力。方法:（1）将36只3月龄雌性SD大鼠,采用双侧卵巢切除法进行绝经后骨质疏松大鼠造模,造模成功3个月后,均实施双侧胫骨近端骨缺损造模,之后按干预措施不同随机分为3组:A组右侧胫骨缺损处植入载ADSCs羟基磷灰石支架,左侧胫骨缺损处未行特殊处理作为对照,腹腔注射葛根素注射液,2g/d;B组右侧胫骨缺损处植入载ADSCs羟基磷灰石支架,左侧未处理作为对照,腹腔注射生理盐水;C组右侧骨缺损处植入普通羟基磷灰石支架,左侧未处理作为对照,腹腔注射生理盐水。3组分别于骨缺损术后第2、4、8、12周行体重测量、体脂率检测、骨密度扫描及处死后进行大体观察、左右两侧胫骨缺损处病理切片观察。（2）计算机检索MEDLINE、Web of Science、EBSCO、The Cochrane Library等数据库,筛选葛根素治疗骨质疏松症的相关...
【文章来源】：广西中医药大学广西壮族自治区
【文章页数】：75 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
葛根素化学结构式
8范围区域进行备皮，备皮完成后于固定板上俯卧位固定，再次用碘伏消毒液消毒背部备皮区域皮肤，取备皮区域原点处，作一长约0.5-1.0cm切口，逐层切开皮肤、肌肉，可见乳白色脂肪团，钝性分离，找到粉红色或黄红色卵巢，丝线结扎输卵管根部，小型电刀切除卵巢，观察无活动性出血后，将输卵管轻柔还纳至原位，逐层缝合肌肉、皮肤，碘伏消毒，术后3天肌肉注射青霉素8万U（0.1ml）。术后复苏期间以取暖器加热保暖，待大鼠苏醒且可自由取食、活动后放回笼中常规饲养。图2去卵巢大鼠模型制备（2）ADSCs提取取造模后3个月的SD大鼠，采取左侧腹股沟切口入路提取脂肪，所有手术均由同一组实验人员完成。术前使用动物备皮刀对左侧腹股沟区域进行备皮，碘伏消毒液消毒腹部左下部注射点周围皮肤3遍，左手抓持大鼠背部皮肤，翻转使大鼠腹部朝上，保持头低臀高位使腹腔脏器前移，避免注射器进针时损伤脏器，由腹腔左下区域，倾斜45°，“Z”形进针，边进针边回抽，观察无血液回流后，10%的水合氯醛(0.3ml/100g体重)腹
122.2.1ADSCs形态观察原代细胞接种24h后可见大部分细胞开始贴壁，为多角形的单层细胞，部分细胞呈长梭形，类似成纤维细胞，细胞核居中，细胞成簇分布（图3）。图3ADSCs形态观察（40×）2.2.2ADSCs免疫表型根据我们课题组前期的实验发现，该方法所提取的细胞，流式细胞术鉴定发现，其表面抗原CD29、CD90、CD44表达阳性,CD45，CD11b表达阴性，符合ADSCs的表面抗原特征[22]。2.2.3ADSCs成骨诱导实验茜素红S属一种蒽醌类衍生物，是茜素磺酸钠盐，它能与碳酸钙或磷酸钙中的钙盐螯合形成橙红色复合物，其对少量的沉积物及可得到可靠的结果。ADSCs成骨诱导14d后出现聚集趋势，围绕着成骨结节生长，成骨结节被茜素红S染成红色，而加入完全培养基的对照组仍为梭形、多角形的ADSCs，未见明显红色结节（图4）。2.2结果
【参考文献】：
期刊论文
[1]骨组织工程支架材料研究进展[J]. 刘洋,王欢,朱晔,沈之政,戚孟春. 临床口腔医学杂志. 2019(10)
[2]原发性骨质疏松症诊疗指南（2017）[J]. 夏维波,章振林,林华,金小岚,余卫,付勤. 中国骨质疏松杂志. 2019(03)
[3]纯钛微弧氧化载葛根素复合膜层骨结合的动物实验研究[J]. 李鑫鑫,李慕勤,肖月,彭书浩,张慧明,姚海涛,焦玉凤. 中国体视学与图像分析. 2017(04)
[4]葛根素对炎症相关疾病研究进展[J]. 曾祥伟,冯倩,张莹莹,赵凤鸣,詹秀琴. 中国药理学通报. 2018(01)
[5]葛根素对过氧化氢致成骨细胞氧化损伤的影响[J]. 王昌,汤旭磊,陈克明,张莉,刘伟宁,赵瑾. 中国骨质疏松杂志. 2017(11)
[6]葛根素促进体外培养大鼠颅骨成骨细胞增殖和分化过程中对cAMP/PKA信号通路的影响[J]. 邓银栓,樊宇,惠升明,杨小杰,董成辉. 解放军医药杂志. 2017(07)
[7]葛根素通过p38MAPK通路抑制MC3T3-E1成骨细胞凋亡[J]. 于冬冬,赵丹阳. 中国现代医学杂志. 2017(05)
[8]葛根素抑制吡格列酮诱导的成骨细胞凋亡[J]. 卢宇,费小蔷,杨淑芳,徐邦奎,马咏梅,赵成媛,李湘怡. 中国骨质疏松杂志. 2017(02)
[9]葛根素联合国产多孔钽对人成骨细胞COL-I、OC、OPN表达和细胞增殖的影响[J]. 刘永庆,李琪佳,甘洪全,王茜,张大鹏,王志强. 中国骨质疏松杂志. 2017(02)
[10]肥胖与绝经期女性居民骨密度的相关性研究[J]. 安康,秦恳,李舍予,洋翰伟,吴琴琴,黄燕,于川,安振梅,李双庆. 四川大学学报(医学版). 2017(01)
硕士论文
[1]葛根素诱导绝经后骨质疏松大鼠脂肪来源干细胞成骨分化的研究[D]. 王珣.广西中医药大学 2018
本文编号：3511801
【文章来源】：广西中医药大学广西壮族自治区
【文章页数】：75 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
葛根素化学结构式
8范围区域进行备皮，备皮完成后于固定板上俯卧位固定，再次用碘伏消毒液消毒背部备皮区域皮肤，取备皮区域原点处，作一长约0.5-1.0cm切口，逐层切开皮肤、肌肉，可见乳白色脂肪团，钝性分离，找到粉红色或黄红色卵巢，丝线结扎输卵管根部，小型电刀切除卵巢，观察无活动性出血后，将输卵管轻柔还纳至原位，逐层缝合肌肉、皮肤，碘伏消毒，术后3天肌肉注射青霉素8万U（0.1ml）。术后复苏期间以取暖器加热保暖，待大鼠苏醒且可自由取食、活动后放回笼中常规饲养。图2去卵巢大鼠模型制备（2）ADSCs提取取造模后3个月的SD大鼠，采取左侧腹股沟切口入路提取脂肪，所有手术均由同一组实验人员完成。术前使用动物备皮刀对左侧腹股沟区域进行备皮，碘伏消毒液消毒腹部左下部注射点周围皮肤3遍，左手抓持大鼠背部皮肤，翻转使大鼠腹部朝上，保持头低臀高位使腹腔脏器前移，避免注射器进针时损伤脏器，由腹腔左下区域，倾斜45°，“Z”形进针，边进针边回抽，观察无血液回流后，10%的水合氯醛(0.3ml/100g体重)腹
122.2.1ADSCs形态观察原代细胞接种24h后可见大部分细胞开始贴壁，为多角形的单层细胞，部分细胞呈长梭形，类似成纤维细胞，细胞核居中，细胞成簇分布（图3）。图3ADSCs形态观察（40×）2.2.2ADSCs免疫表型根据我们课题组前期的实验发现，该方法所提取的细胞，流式细胞术鉴定发现，其表面抗原CD29、CD90、CD44表达阳性,CD45，CD11b表达阴性，符合ADSCs的表面抗原特征[22]。2.2.3ADSCs成骨诱导实验茜素红S属一种蒽醌类衍生物，是茜素磺酸钠盐，它能与碳酸钙或磷酸钙中的钙盐螯合形成橙红色复合物，其对少量的沉积物及可得到可靠的结果。ADSCs成骨诱导14d后出现聚集趋势，围绕着成骨结节生长，成骨结节被茜素红S染成红色，而加入完全培养基的对照组仍为梭形、多角形的ADSCs，未见明显红色结节（图4）。2.2结果
【参考文献】：
期刊论文
[1]骨组织工程支架材料研究进展[J]. 刘洋,王欢,朱晔,沈之政,戚孟春. 临床口腔医学杂志. 2019(10)
[2]原发性骨质疏松症诊疗指南（2017）[J]. 夏维波,章振林,林华,金小岚,余卫,付勤. 中国骨质疏松杂志. 2019(03)
[3]纯钛微弧氧化载葛根素复合膜层骨结合的动物实验研究[J]. 李鑫鑫,李慕勤,肖月,彭书浩,张慧明,姚海涛,焦玉凤. 中国体视学与图像分析. 2017(04)
[4]葛根素对炎症相关疾病研究进展[J]. 曾祥伟,冯倩,张莹莹,赵凤鸣,詹秀琴. 中国药理学通报. 2018(01)
[5]葛根素对过氧化氢致成骨细胞氧化损伤的影响[J]. 王昌,汤旭磊,陈克明,张莉,刘伟宁,赵瑾. 中国骨质疏松杂志. 2017(11)
[6]葛根素促进体外培养大鼠颅骨成骨细胞增殖和分化过程中对cAMP/PKA信号通路的影响[J]. 邓银栓,樊宇,惠升明,杨小杰,董成辉. 解放军医药杂志. 2017(07)
[7]葛根素通过p38MAPK通路抑制MC3T3-E1成骨细胞凋亡[J]. 于冬冬,赵丹阳. 中国现代医学杂志. 2017(05)
[8]葛根素抑制吡格列酮诱导的成骨细胞凋亡[J]. 卢宇,费小蔷,杨淑芳,徐邦奎,马咏梅,赵成媛,李湘怡. 中国骨质疏松杂志. 2017(02)
[9]葛根素联合国产多孔钽对人成骨细胞COL-I、OC、OPN表达和细胞增殖的影响[J]. 刘永庆,李琪佳,甘洪全,王茜,张大鹏,王志强. 中国骨质疏松杂志. 2017(02)
[10]肥胖与绝经期女性居民骨密度的相关性研究[J]. 安康,秦恳,李舍予,洋翰伟,吴琴琴,黄燕,于川,安振梅,李双庆. 四川大学学报(医学版). 2017(01)
硕士论文
[1]葛根素诱导绝经后骨质疏松大鼠脂肪来源干细胞成骨分化的研究[D]. 王珣.广西中医药大学 2018
本文编号：3511801
本文链接：https://www.wllwen.com/yixuelunwen/nfm/3511801.html
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