诱导中性粒细胞非经典铁死亡缓解气道炎症的作用及机制研究

发布时间：2021-12-11 07:40

　　背景:哮喘是由多种类型细胞和细胞组分参与的气道慢性炎症性疾病。虽然嗜酸性粒细胞和肥大细胞的局部浸润作用在疾病的发生发展中早已被认识,研究也评估了中性粒细胞的浸润情况,气道内以中性粒细胞增高为表型的患者对皮质类固醇的治疗具有抗性。因此,探索靶向诱导中性粒细胞死亡、有别于激素的其他通路对治疗激素不敏感型哮喘格外重要。急性肺损伤(ALI)/急性呼吸窘迫综合征(ARDS)是一种低氧性呼吸功能不全或衰竭的危重症,是由于在各种非心源性疾病过程中,肺泡上皮细胞及毛细血管内皮细胞发生损伤造成的肺间质及肺泡水肿。病原体感染导致正常肺气血屏障功能破坏,造成弥漫性肺间质及肺泡水肿,并伴随大量的白细胞尤其是中性粒细胞浸润。靶向中性粒细胞死亡对改善ALI症状、控制ALI的进一步发展、降低病死率有着重要意义。铁死亡(ferroptosis)是铁依赖的,细胞内脂质过氧化堆积所导致的新型死亡方式,在细胞死亡形态、生化、遗传等方面与其他死亡方式存在明显不同。我们认为,靶向诱导中性粒细胞铁死亡可能是治疗气道中性粒细胞炎症的潜在途径。目的:本课题探讨通过铁死亡诱导剂(RSL3)能否诱导中性粒细胞铁死亡,并缓解气道炎症,探究...

【文章来源】： 浙江大学浙江省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

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致谢
中文摘要
Abstract
缩略语中英文对照
第一章 引言
第二章 材料与方法
    2.1 实验动物
    2.2 实验仪器和设备
    2.3 实验试剂
        2.3.1 主要试剂
        2.3.2 实验试剂配制
    2.4 实验方法
        2.4.1 人外周血白细胞培养
        2.4.2 人外周血中性粒细胞流式分析及鉴定
        2.4.3 LPS小鼠模型肺泡中性粒细胞提取
        2.4.4 小鼠肺泡中性粒细胞鉴定
        2.4.5 流式检测
            2.4.5.1 流式检测细胞死活
            2.4.5.2 流式检测ROS水平
        2.4.6 扫描电镜样本准备及观察
        2.4.7 中性粒细胞为主型哮喘小鼠模型构建(激素不敏感型哮喘)及分组给药
        2.4.8 急性肺损伤小鼠模型构建及分组给药
        2.4.9 动物模型处理及标本收集
            2.4.9.1 小鼠支气管肺泡灌洗液(BALF)收集
            2.4.9.2 BALF白细胞总数计数
            2.4.9.3 BALF白细胞分类计数
            2.4.9.4 肺组织处理
        2.4.10 组织总mRNA提取
        2.4.11 cDNA合成及Q-PCR
        2.4.12 细胞培养
        2.4.13 统计分析
第三章 研究结果
    3.1 RSL3诱导中性粒细胞死亡
        3.1.1 RSL3诱导人外周血中性粒细胞死亡
        3.1.2 RSL3诱导LPS模型小鼠BALF中性粒细胞死亡
    3.2 RSL3可以诱导中性粒细胞非经典途径铁死亡
        3.2.1 自噬参与RSL3诱导的中性粒细胞死亡
        3.2.2 RSL3 诱导的中性粒细胞死亡与铁相关,并呈脂质ROS累积
    3.3 RSL3 介导的铁死亡与线粒体ROS有关
    3.4 RSL3缓解中性粒细胞型哮喘
    3.5 RSL3缓解急性肺损伤
第四章 讨论
第五章 结论
参考文献
综述 铁死亡在呼吸系统疾病的研究进展及应用
    参考文献
作者简历及在读期间所取得的科研成果


【参考文献】：
期刊论文
[1]Chromatin remodeling factor lymphoid-specific helicase inhibits ferroptosis through lipid metabolic genes in lung cancer progression [J]. Yiqun Jiang,Yuchen He,Shuang Liu,Yongguang Tao.  Chinese Journal of Cancer. 2017(12)



本文编号：3534275