过量碘/ROS/NLRP3介导的细胞焦亡途径在桥本氏甲状腺炎中的作用及机制研究

发布时间：2022-07-29 20:39

　　目的:桥本氏甲状腺炎（Hashimoto’s thyroiditis,HT）是一种临床上常见的慢性自身免疫性疾病,其病理损伤主要表现为甲状腺滤泡上皮细胞及甲状腺滤泡腔的受损,导致甲状腺相关自身抗体的产生以及甲状腺激素合成异常,引起多器官功能受损,会对人体造成较严重的长期慢性损害。HT发病原因多样,其中碘过量摄入是重要原因之一,但目前关于过量碘如何导致HT发病的机制暂不很明确。本研究旨在探讨过量碘导致甲状腺滤泡上皮细胞损伤引起HT发病的具体机制,为HT病理研究提供新的方向,为HT临床治疗探索寻找新的干预靶点。方法:1.免疫印迹和免疫组化方法检测桥本氏甲状腺炎和单纯性甲状腺结节（作为对照）患者甲状腺组织中细胞焦亡关键蛋白gasdermin D（GSDMD）的表达情况。2.用不同NaI浓度（0,1,10,20,50 mM）处理甲状腺滤泡上皮细胞（Nthyori 3-1）24 h后,免疫印迹方法检测细胞中GSDMD-FL和GSDMD-N蛋白表达情况,评价细胞焦亡水平。3.用NaI（0,1,10,20,50 mM）处理Nthy-ori 3-1细胞24 h后,CCK-8试剂检测甲状腺滤泡上皮细胞活... 

【文章页数】：72 页

【学位级别】：硕士

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摘要
abstract
英文缩略词
第一章 绪论
    1.1 桥本氏甲状腺炎
        1.1.1 简介
        1.1.2 临床表现
        1.1.3 流行病学
    1.2 碘
    1.3 活性氧
        1.3.1 活性氧介绍
        1.3.2 活性氧与甲状腺
        1.3.3 研究现状
    1.4 NF-κB信号通路
    1.5 细胞焦亡
        1.5.1 简介
        1.5.2 细胞焦亡与自身免疫性疾病
        1.5.3 细胞焦亡与桥本氏甲状腺炎
    1.6 白介素-1β
        1.6.1 简介
        1.6.2 白细胞介素-1β与疾病
    1.7 小结
第二章 研究目的、内容、方法、意义及实验方案设计
    2.1 研究目的
    2.2 研究内容
    2.3 研究方法及技术
    2.4 研究意义
    2.5 实验方案设计
        2.5.1 桥本氏甲状腺炎及甲状腺结节的甲状腺组织中GSDMD、IL-1β表达水平
        2.5.2 过量碘对Nthy-ori3-1 细胞焦亡和IL-1β分泌的影响以及具体机制研究
第三章 实验材料与方法
    3.1 临床标本收集
    3.2 主要试剂和材料
        3.2.1 细胞株
        3.2.2 相关抗体及主要试剂
            3.2.2.1 细胞培养试剂
            3.2.2.2 蛋白提取试剂
            3.2.2.3 Western blot主要抗体及相关试剂
            3.2.2.4 实验相关检测试剂盒
        3.2.3 主要仪器设备和耗材
    3.3 实验方法
        3.3.1 免疫组织化学
        3.3.2 细胞培养
        3.3.3 细胞内活性氧检测
            3.3.3.1 检测原理
            3.3.3.2 活性氧检测步骤
        3.3.4 免疫印迹
            3.3.4.1 蛋白提取
            3.3.4.2 蛋白含量测定
            3.3.4.3 电泳上样样品准备
            3.3.4.4 蛋白电泳
        3.3.5 瞬时转染
        3.3.6 ELISA检测细胞上清中IL-1β含量
        3.3.7 CCK-8 检测细胞活性
    3.4 统计学分析
第四章 实验结果
    4.1 桥本氏甲状腺炎组织中细胞焦亡水平升高
    4.2 过量碘对甲状腺滤泡上皮细胞焦亡的影响
    4.3 过量碘通过ROS-NF-κB通路诱导细胞焦亡
    4.4 过量碘通过活化NLRP3 炎症小体诱导细胞焦亡
    4.5 细胞焦亡的异常激活促进甲状腺滤泡上皮细胞中IL-1β释放
第五章 讨论
第六章 主要结论及展望
    6.1 主要结论
    6.2 工作展望
参考文献
在学期间发表的学术论文
致谢



本文编号：3667147