外源性硫化氢通过调控瘦素/瘦素受体通路抑制高糖诱导的人脐静脉内皮细胞损伤

发布时间：2022-12-10 01:54

　　目的探讨外源性硫化氢（H2S）能否通过调控瘦素/瘦素受体（LEPR）通路抑制高糖引起的人脐静脉内皮细胞（HUVECs）损伤。方法 CCK-8法检测细胞存活率;Hoechst 33258核染色荧光显微镜照相检测凋亡细胞的形态学和数量改变;双氯荧光素（DCFH-DA）染色荧光显微镜照相法检测细胞内活性氧（ROS）水平;罗丹明123（Rh123）染色荧光显微镜照相法检测线粒体膜电位（MMP）水平;Western blotting法测定瘦素及瘦素受体蛋白的表达水平。结果应用40 mmol/L葡萄糖处理HUVECs 3~24 h可以明显上调瘦素、瘦素受体的表达水平,在高糖处理9 h时瘦素、瘦素受体的表达水平达到峰值;在高糖处理HUVECs前,400μmol/L硫氢化钠（NaHS,为H2S的供体）预处理30 min能明显抑制高糖对瘦素及瘦素受体表达的上调作用;400μmol/L NaHS预处理HUVECs 30 min、50 ng/m L瘦素拮抗剂（LA）预处理HUVECs 1 h均可明显抑制高糖引起的HUVECs损伤,使细胞存活率升高,细胞凋亡数量减少,胞内活性氧（ROS）堆积及MMP降低（P＜... 

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【文章目录】：
1 材料和方法
    1.1 材料
    1.2 细胞培养
    1.3 实验分组
    1.4 CCK-8法检测细胞存活率
    1.5 Western blot法检测瘦素、瘦素受体(LEPR)蛋白的表达
    1.6 Hoechst 33258核染色法检测细胞凋亡
    1.7 DCFH-DA染色测定ROS水平
    1.8 罗丹明123(Rh123)染色法检测HUVECs线粒体膜电位(MMP)
    1.9 统计学处理
2 结果
    2.1 外源性H2S和LA抑制高糖引起的HUVECs细胞毒性
    2.2 外源性H2S抑制高糖对HUVECs瘦素表达的上调作用
    2.3 外源性H2S抑制高糖对HUVECs瘦素受体表达的上调作用
    2.4 外源性H2S和LA抑制高糖引起的致HUVECs凋亡作用
    2.5 外源性H2S和LA抑制高糖引起的HUVECs氧化应激反应
    2.6外源性H2S和LA抑制高糖对HUVECs线粒体的损伤作用
3 讨论


【参考文献】：
期刊论文
[1]硫化氢对氧化型低密度脂蛋白诱导的人脐静脉内皮细胞凋亡的影响[J]. 任重,赵战芝,彭湘萍,谢巍,刘艳文,索荣,姜志胜.  中国动脉硬化杂志. 2011(11)
[2]抑制胞浆型磷脂酶A2活性对内毒素诱导人脐静脉内皮细胞分泌瘦素的影响[J]. 齐菲,颜光涛.  中国危重病急救医学. 2011 (02)



本文编号：3715819