miR-103通过结合circRNAs调节机体脂肪发育的分子机制

发布时间：2022-12-22 00:13

　　miR-103是miRNA家族的重要分子,通过靶向下游mRNA发挥生物功能。miR-103最初是由Mourelatos等人在2002年从人宫颈癌细胞株Hela中克隆测序并鉴定出来的。近年来,miR-103越来越受到人们的重视。研究发现miR-103调节细胞分裂、代谢和应激反应等。在脂肪组织中,miR-103含量丰富,促进脂肪细胞分化,诱导肥胖个体中的胰岛素抵抗等。除此之外,miR-103对脂肪其他生理功能影响还知之甚少。circRNA是一种通过3’-5’共价键首尾连接的环状非编码RNA,富含miRNA结合位点,通过吸附miRNA解除对miRNA靶基因的抑制作用,从而调控机体生理功能。本研究以miR-103为研究中心,寻找miR-103下游靶向的mRNA和上游结合的circRNA,检测其对脂肪细胞凋亡、脂肪炎症和白脂棕色化的影响并深入探究其调控机制。本研究将为肥胖和肥胖相关的代谢性疾病提供治疗靶点。研究结果主要有:1.miR-103通过靶向Wnt3a/β-catenin/ATF6促进前体脂肪细胞内质网应激诱导的凋亡。（1）在脂肪前体细胞中构建细胞凋亡模型,发现miR-103在凋亡过程中上... 

【文章页数】：110 页

【学位级别】：博士

【文章目录】：
摘要
abstract
文献综述
    第一章 CIRCULARRNA的生物合成和功能
        1.1 circRNA的广泛表达
        1.2 circRNA的生物发生
            1.2.1 剪接体依赖的生物发生
            1.2.2 顺式元件促进circRNA生物合成
            1.2.3 RNA结合蛋白调节circRNA的生物合成
        1.3 circRNA调控基因表达
            1.3.1 circRNA可以作为miRNA海绵体
            1.3.2 circRNA调节基因转录
            1.3.3 circRNA加工会影响剪接
    第二章 脂肪组织中的MIRNA调控
        2.1 miRNA调节肥胖
        2.2 WAT中miRNA分布
        2.3 miRNA调节胰岛素敏感性和2型糖尿病
        2.4 miRNA调节炎症
        2.5 miRNA调节分化
        2.6 miRNA调节白色脂肪棕色化
        2.7 miRNA调控网络
    第三章 miR-103研究进展
        3.1 miR-103的生物学活性
        3.2 miR-103的生物功能
            3.2.1 miR-103调节糖脂代谢
            3.2.2 miR-103调控肿瘤发生
            3.2.3 miR-103调节神经性疾病
试验研究
    第四章 miR-103通过靶向Wnt3a/β-catenin/ATF6促进前体脂肪细胞内质网应激诱导的凋亡
        4.1 前言
        4.2 材料与方法
            4.2.1 主要实验仪器设备
            4.2.2 脂肪前体细胞的培养和转染
            4.2.3 RNA提取和反转录
            4.2.4 Western Blot
            4.2.5 Caspase3活性检测
            4.2.6 流式细胞术
            4.2.7 TUNEL染色
            4.2.8 细胞免疫荧光
            4.2.9 数据分析
        4.3 结果
            4.3.1 Wnt3a是miR-103的靶基因
            4.3.2 miR-103在脂肪细胞凋亡模型中表达上调
            4.3.3 miR-103促进脂肪前体细胞凋亡和内质网应激
            4.3.4 miR-103通过靶向Wnt3a促进脂肪前体细胞凋亡和内质网应激
            4.3.5 miR-103通过抑制Wnt/β-catenin信号通路促进脂肪前体细胞凋亡和内质网应激
            4.3.6 ATF6是Wnt/β-catenin信号通路的下游靶基因
            4.3.7 miR-103促进的凋亡是由内质网应激介导的
        4.4 讨论
        4.5 小结
    第五章 circARF3通过靶向miR-103/TRAF3抑制小鼠脂肪组织中线粒体自噬介导的炎症
        5.1 前言
        5.2 材料与方法
            5.2.1 主要实验仪器设备
            5.2.2 动物实验
            5.2.3 脂肪细胞的培养和转染
            5.2.4 RNA提取和反转录
            5.2.5 WesternBlot
            5.2.6 线粒体膜电位检测
            5.2.7 细胞免疫荧光
            5.2.8 细胞线粒体分析
            5.2.9 数据分析
        5.3 结果
            5.3.1 miR-103促进脂肪炎症并抑制自噬
            5.3.2 miR-103通过抑制线粒体自噬激活NLRP3炎性小体
            5.3.3 TRAF3是miR-103的靶基因
            5.3.4 miR-103通过靶向TRAF3调节线粒体自噬介导的NLRP3炎性小体活化
            5.3.5 脂肪细胞中circARF3作为miR-103海绵体发挥作用
            5.3.6 circARF3通过吸附miR-103抑制线粒体自噬介导的脂肪炎症
            5.3.7 circARF3通过抑制NF-κB信号通路抑制线粒体自噬介导的脂肪炎症
            5.3.8 circARF3抑制体内线粒体介导的脂肪炎症
        5.4 讨论
        5.5 小结
    第六章 circNRXN2-miR103-FGF10通过提高M2型ATM极化促进白脂棕色化
        6.1 前言
        6.2 材料和方法
            6.2.1 主要实验仪器设备
            6.2.2 脂肪细胞和巨噬细胞的培养和转染
            6.2.3 RNA提取和反转录
            6.2.4 Western Blot
            6.2.5 免疫荧光染色
            6.2.6 数据分析
        6.3 结果
            6.3.1 脂肪组织中circNrxn2-miR103-FGF10形成一个调控环路
            6.3.2 circNrxn2促进小鼠白脂棕色化
            6.3.3 circNrxn2促进M2型巨噬细胞极化
            6.3.4 circNrxn2通过提高M2型巨噬细胞极化促进白脂棕色化
        6.4 讨论
        6.5 小结
本研究主要结论、创新点与进一步研究内容
    1.本研究主要结论
    2.创新点
    3.下一步研究内容
参考文献
附录
致谢
作者简介


【参考文献】：
期刊论文
[1]miRNA-103: Molecular link between insulin resistance and nonalcoholic fatty liver disease[J]. Qian Xu,Ying Li,Yong-Fang Shang,Hui-Ling Wang,Min-Xiu Yao.  World Journal of Gastroenterology. 2015(02)



本文编号：3723042