人甲状旁腺激素(1-34)在人成骨肉瘤细胞中对基质Gla蛋白及Wnt/β-catenin信号通路的调节作用

发布时间：2023-02-10 07:12

　　目的观察人甲状旁腺激素(PTH)的N端活性片段PTH(1-34)对人成骨肉瘤细胞MG63基质Gla蛋白(MGP)表达的影响,以及PTH通过Wnt/β-catenin信号通路介导MGP表达调控的作用,探讨PTH(1-34)在防治骨质疏松症作用中可能的分子机制。方法(1)用不同浓度PTH(1-34)(10-9、10-8、10-7mol/L),单独或联合Wnt/β-catenin信号通路抑制剂DKK-1(200 ng/m L)干预MG63细胞;(2)检测碱性磷酸酶(ALP)染色及活力测定用于判断细胞分化情况;(3)MGP及Wnt/β-catenin信号通路各组分的m RNA及蛋白的表达分别采用实时定量RT-PCR及Western blotting方法。结果 (1)PTH(1-34)上调MGP基因的表达,MGP m RNA的表达分别是对照组的2.56倍、4.14倍、7.81倍(P<0.05或P<0.01),且呈剂量依赖性增高;(2)PTH增强MG63细胞ALP活力,Dkk-1抑制ALP活性,Dkk-1与PTH联用部分阻断PTH上调ALP活力(P<0.05);(3)PTH上调M...

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【文章目录】：
1 材料和方法
    1.1 试剂
    1.2 细胞培养及药物干预
    1.3 碱性磷酸酶(ALP)活性检测
    1.4 荧光实时定量PCR(q PCR)检测m RNA表达
    1.5 Western blot检测蛋白表达
    1.6 统计学分析
2 结果
    2.1 PTH上调MG63细胞MGP表达,且呈剂量依懒性
    2.2 PTH增加MG63细胞碱性磷酸酶(ALP)活性
    2.3 PTH及Dkk-1对人MG63细胞MGP及wnt/β-catenin经典信号通路相关因子基因表达的影响
    2.4 PTH(1-34)及DKK-1对MG63细胞MGP及Wnt/β-catenin信号通路中相关因子蛋白表达的影响
3 讨论



本文编号：3739244