lncRNA MEG3在不同糖代谢状态下的表达差异及相关功能分析

发布时间：2023-04-29 04:17

　　目的:2型糖尿病的发病率在全球范围内逐渐增加,目前尚没有发现2型糖尿病的特异性预测标志物,为糖尿病的早期诊断带来了难度。我们通过构建基因芯片旨在发现正常人、糖耐量受损、糖尿病之间的差异表达lncRNA,寻找能够早期预测2型糖尿病的特异性标志物,同时在糖尿病相关靶器官、靶组织中验证特异性标志物的表达水平差异,为2型糖尿病的早期预测和诊断提供参考。方法:1、芯片分析:选取健康人、糖调节受损患者、2型糖尿病患者各2名,抽取空腹静脉全血制作基因芯片,筛选各组之间表达有差异的非编码RNA,标记出倍数差异。应用芯片数据进行GO、KEGG等生物信息分析预测可能相关的蛋白及通路,预测糖尿病的相关发病机制。2、人群验证:选取正常人25名,糖调节受损患者27名,T2DM患者35名,抽取早上7点空腹外周静脉血,应用PCR技术检测入组对象lncRNA MEG3的表达量。3、细胞实验:检测不同糖浓度下(5.5mmol/L,25mmol/L)胰岛β细胞ins-1、正常人肝脏细胞7702中lncRNA MEG3的表达差异。结果:1、基因芯片结果:糖调节受损患者与正常人之间有376个差异lncRNA(倍数差异>...

【文章页数】：72 页

【学位级别】：硕士

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中文摘要
Abstract
缩略语/符号说明
前言
    研究现状、成果
    研究目的、方法
一、不同糖代谢状态下基因芯片筛查lncRNA的血清差异表达及相关分析
    1.1 对象和方法
        1.1.1 芯片介绍
        1.1.2 研究对象
        1.1.3 相关诊断标准
        1.1.4 纳入排除标准
        1.1.5 样本的提取
        1.1.6 样本质检标准与结果
        1.1.7 芯片实验操作步骤
        1.1.8 芯片实验质控方法
    1.2 结果
        1.2.1 箱线图
        1.2.2 散点图
        1.2.3 差异基因功能分析
    1.3 小结
二、糖尿病、糖调节受损患者与正常人全血中差异表达的lncRNA相关验证
    2.1 对象和方法
        2.1.1 研究对象
        2.1.2 相关诊断标准
        2.1.3 实验分组
        2.1.4 纳入排除标准
        2.1.5 仪器设备
        2.1.6 实验试剂
        2.1.7 引物设计
        2.1.8 实验试剂配置
        2.1.9 RNA的提取
        2.1.10 RNA沉淀清洗
        2.1.11 RNA沉淀溶解
        2.1.12 RNA纯度浓度分析
        2.1.13 cDNA合成
        2.1.14 SYBR Green qPCR方法
    2.2 结果
        2.2.1 临床资料结果
        2.2.2 LncRNA MEG3在三组不同糖代谢人群中存在差异表达
        2.2.3 LncRNA MEG3在正常人、糖调节受损患者、糖尿病患者间具有极高诊断价值
    2.3 小结
三、细胞中表达差异的lncRNA的验证
    3.1 对象和方法
        3.1.1 研究对象
        3.1.2 实验仪器设备
        3.1.3 实验试剂
        3.1.4 引物设计
        3.1.5 细胞培养
        3.1.6 RNA提取、cDNA合成、PCR方法
    3.2 结果
        3.2.1 高糖条件下LncRNA MEG3表达下降
四、讨论
结论
参考文献
发表论文和参加科研情况说明
综述
    综述参考文献
致谢
个人简历



本文编号：3805149