MPST抑制NaAsO 2 经GRP78/CHOP通路诱导神经细胞凋亡机制的研究

发布时间：2023-12-02 08:22

　　第一部分MPST基因过表达载体的构建及鉴定目的:构建MPST基因慢病毒表达载体,获得稳定表达外源MPST基因的SH-SY5Y细胞株。方法:采用聚合酶链式反应(PCR)扩增出MPST目的基因并将其克隆到慢病毒表达载体p EB-GFP(T2A)PURO上。将重组慢病毒表达载体和慢病毒包装质粒系统(p LP/VSVG、p LP1、p LP2)共转染293T细胞,用获得重组慢病毒液感染SH-SY5Y细胞,嘌呤霉素筛选稳定表达MPST基因的过表达细胞株(SH-MPST)。用Real-time PCR和Western blot以及ELISA等方法对筛出来的稳转细胞中MPST蛋白表达及功能进行鉴定。结果:与空转组相(SH-PEB)比,稳转组细胞MPST m RNA及蛋白的表达水平显著增加(p<0.01),且细胞MPST酶活性、含量及硫化氢的相对水平显著增加(p<0.01)。结论:成功构建MPST基因慢病毒表达载体并获得稳定表达外源MPST基因的SH-SY5Y细胞株,为内源性H2S功能的深入研究奠定基础。第二部分MPST对砷损伤SH-SY5Y细胞的保护目的:探讨MPST基因过表达对SH-S...

【文章页数】：82 页

【学位级别】：硕士

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略缩词表
引言
第一部分 MPST基因过表达SH-SY5Y细胞株的构建及鉴定
    1 材料与方法
    2 结果
    3 讨论
第二部分 MPST对砷损伤SH-SY5Y细胞的保护
    1 材料与方法
    2 结果
    3 讨论
第三部分 ERS参与MPST对GRP78/CHOP通路的影响
    1 材料与方法
    2 结果
    3 讨论
全文总结
参考文献
综述
    参考文献
作者简历
致谢
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本文编号：3869278