多聚左旋精氨酸通过ERK1/2信号通路诱导NCI-H292细胞凋亡的机制研究

发布时间：2024-05-18 07:46

　　目的:研究多聚左旋精氨酸(Poly-L-arginine,PLA)诱导气道上皮细胞NCI-H292细胞凋亡的通路机制以及对细胞内Bcl-2/Bax、Caspase-3表达的影响,从而揭示PLA参与哮喘气道上皮损伤的部分机制。方法:1、细胞培养常规培养基(RPMI1640+10%胎牛血清)培养NCI-H292细胞,于37℃、5%二氧化碳环境的培养箱内孵育。每2³天换液一次,细胞分裂铺展至培养瓶70%⁸0%时用0.25%胰酶消化传代,用于后续实验。2、透射电镜制片观察NCI-H292细胞凋亡NCI-H292细胞分为对照组、PLA(60 mg/L)组两组,PLA作用24 h后,收集细胞,固定后脱水,包埋干燥,切片浸染后用透射电镜摄片观察两组细胞的超微结构。3、Annexin V-FITC/PI双染色法检测细胞凋亡率按加入PLA浓度不同将细胞分为空白对照组、10 mg/L PLA组、20 mg/L组PLA、40 mg/L PLA组、60 mg/L PLA组,按是否加入ERK1/2信号通路抑制剂PD98059分为空白对照组、PD组、PLA组、PLA+P...

【文章页数】：66 页

【学位级别】：硕士

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中文摘要
Abstract
1 前言
2 实验材料
    2.1 实验细胞
    2.2 实验试剂
    2.3 实验器材
    2.4 实验试剂配制
3 实验方法
    3.1 细胞培养
    3.2 细胞分组
    3.3 透射电镜制片观察NCI-H292细胞凋亡
    3.4 Annexin V-FITC/PI法检测细胞凋亡率
    3.5 Western Blot 法检测凋亡相关蛋白 Bax、Bcl-2、Caspase-3 及信号通路 ERK1/2的表达
    3.6 统计学处理
4 实验结果
5 讨论
6 结论
7 参考文献
附录
致谢
综述
    参考文献



本文编号：3976662