IL-1β/MRP14介导的趋化因子途径在桥本氏甲状腺炎中的作用及机制研究

发布时间：2024-06-12 04:18

　　目的:桥本氏甲状腺炎(Hashimoto’s thyroiditis,HT)的病理特点是大量的免疫活性细胞浸润甲状腺组织以及机体异常识别自身抗原发生免疫应答,导致甲状腺组织肿大、纤维化和甲状腺结构完整性破坏,最终导致甲状腺功能紊乱。本文旨在探讨人髓样相关蛋白14(Myeloid-Related Protein14,MRP14)是否通过调节趋化因子的表达参与桥本氏甲状腺炎淋巴细胞的浸润,以及IL-1β对MRP14的调控作用及分子机制,阐明IL-1β、MRP14在淋巴细胞浸润机制中的作用,为HT治疗提供潜在的干预靶点。方法:1.免疫组织化学法检测MRP8/MRP14、MRP14在单纯性甲状腺结节组织(作为正常对照)、桥本氏甲状腺炎组织及甲状腺乳头状癌组织中的表达情况。2.收集健康体检者的血清标本和桥本氏甲状腺炎患者的血清标本各20例,采用蛋白浓缩法浓缩蛋白,随后用免疫印迹法测定血清中MRP14的水平。3.分别用不同浓度IL-1β(0、10、20、50 ng/mL),TGF-β(0、10、20、40、80 ng/mL)和TNF-α(0、1、10、20、40、60 ng/mL)处理甲状腺滤泡上...

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【学位级别】：硕士

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摘要
abstract
第一章 绪论
    1.1 桥本氏甲状腺炎
        1.1.1 简介
        1.1.2 流行病学
        1.1.3 免疫病理特征
        1.1.4 主要临床表现
        1.1.5 研究现状
    1.2 白介素-1β
        1.2.1 白介素
        1.2.2 白细胞介素-1β
        1.2.3 白细胞介素-1β与桥本氏甲状腺炎
    1.3 MRP
        1.3.1 MRP14简介
        1.3.2 MRP14与自身免疫疾病
    1.4 MAPK/NF-κB信号通路
    1.5 趋化因子
        1.5.1 趋化因子简介
        1.5.2 趋化因子与自身免疫性疾病
    1.6 小结
第二章 研究目的、内容、方法、意义及实验方案设计
    2.1 研究目的
    2.2 研究内容
    2.3 研究方法及技术
    2.4 研究意义
    2.5 实验方案设计
        2.5.1 桥正常甲状腺组织、桥本氏甲状腺炎甲状腺组织与乳头状癌甲状腺组织中MRP8/MRP14、MRP14的表达情况
        2.5.2 正常甲状腺患者与桥本氏甲状腺炎患者血清中MRP14的表达及组织中IL-1β的表达
        2.5.3 MRP14对甲状腺滤泡上皮细胞Nthy-ori3-1趋化因子表达的影响及其机制的研究
第三章 实验材料与方法
    3.1 临床标本收集
        3.1.1 桥本氏甲状腺炎、甲状腺乳头状癌及正常对照组甲状腺组织标本
    3.2 主要试剂和材料
        3.2.1 细胞株
        3.2.2 相关抗体及主要试剂
        3.2.3 主要仪器设备和耗材
    3.3 实验方法
        3.3.1 Nthy-ori3-1、TPC-1细胞的培养
        3.3.2 免疫组织化学
        3.3.3 上清蛋白的浓缩
        3.3.4 免疫印迹
        3.3.5 细胞免疫荧光
        3.3.6 瞬时转染
        3.3.7 提取RNA(Trizol法提取)
        3.3.8 逆转录和实时定量PCR
        3.3.9 统计学分析
第四章 实验结果
    4.1 桥本氏甲状腺炎患者MRP8/14,MRP14的表达情况
        4.1.1 桥本氏甲状腺炎组织中MRP14表达增加
        4.1.2 桥本氏甲状腺炎患者血清中的MRP14表达明显升高
    4.2 IL-1β诱导甲状腺滤泡上皮细胞MRP14的表达
        4.2.1 IL-1β促进甲状腺滤泡上皮细胞MRP14的mRNA上调
        4.2.2 IL-1β促进甲状腺滤泡上皮细胞MRP14蛋白的表达
    4.3 桥本甲状腺炎患者的甲状腺组织中IL-1β表达量增多
    4.4 IL-1β通过MAPK和NF-κB信号通路促进MRP14的表达
    4.5 IL-1β促进甲状腺滤泡上皮细胞趋化因子的分泌
    4.6 MRP14对甲状腺滤泡上皮细胞趋化因子的分泌影响
        4.6.1 siRNA-MRP14抑制甲状腺滤泡上皮细胞趋化因子的分泌
        4.6.2 过表达MRP14(pcDNA3.1-MRP14)可以促进甲状腺滤泡上皮细胞趋化因子的分泌
第五章 讨论
第六章 主要结论及展望
    6.1 主要结论
    6.2 展望
参考文献
在学期间发表的论文
致谢



本文编号：3993215