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G-MDSCs外泌体通过调控Breg细胞减轻小鼠胶原诱导性关节炎发病的实验研究

发布时间:2025-04-01 05:01
  目的:制备粒细胞样髓源性抑制细胞(granulocytic myeloid-derived suppressor cells,G-MDSCs)来源的外泌体(exosomes),观察G-MDSCs来源的exosomes(G-exosomes)对小鼠胶原诱导性关节炎(collagen-induced arthritis,CIA)发生发展的影响,研究G-exosomes对调节性B细胞(regulatory B cell,Breg)的调控作用及其可能的机制。方法(1)小鼠右下腹皮下注射2×10~6个Lewis肺癌细胞,构建肺癌移植瘤模型。磁珠分选荷瘤小鼠脾脏中的G-MDSCs,于含10%超离胎牛血清培养液中培养16-20小时,收集培养上清。超速离心法联合外泌体提取试剂盒制备G-exosomes。利用Western blot检测G-exosomes表面分子,透射电子显微镜观察G-exosomes的形态,纳米颗粒追踪分析检测G-exosomes粒径大小。(2)将牛II型胶原(C-II)与弗氏完全佐剂1:1混合,充分研磨至油包水乳化物,取100μg乳化物于小鼠尾根部皮内注射,初次免疫当日为第0天;第2...

【文章页数】:71 页

【学位级别】:硕士

【部分图文】:

图1.2MVB的形成和外泌体胞吐的示意图

图1.2MVB的形成和外泌体胞吐的示意图

DSCs外泌体通过调控Breg细胞减轻小鼠胶原诱导性关节炎发病的实验研究osomes在CIA小鼠中的作用osomes的形成世纪八十年代,外泌体首次于绵羊网织红细胞中被发现,后被命mes”[49]。它们分布在整个身体中,并在体液中恢复[50]。目前外泌体不明确,但大多....


图1.3外泌体的合成及分子组成

图1.3外泌体的合成及分子组成

图1.3外泌体的合成及分子组成[59]Figure1.3Exosomebiogenesisandmolecularcomposition[59]mes的免疫调节作用家对外泌体的兴趣来自于1996年发现的免疫细胞,爱泼斯坦-转化的B淋巴细胞能够通过分泌MV....


图2.1磁珠分选G-MDSCs细胞的纯度

图2.1磁珠分选G-MDSCs细胞的纯度

pCS5软件检测exosomes的大小。析exosomes粒径大小分离的exosomes,利用ZetaView并分析exosomes的粒径大小。鉴定-MDSCs细胞用FITCanti-mouse染色,通过FCM进行检测,显示实验的要求(如图2.1)....


图2.2G-exosomes表面分子的检测

图2.2G-exosomes表面分子的检测

控Breg细胞减轻小鼠胶原诱导性关节炎发.1ThepurityofG-MDSCsselectedbyMAC子的检测exosomes特异性标志分子CD63及ca性表达CD63分子,但不表达calne



本文编号:4038963

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