Angptl4在体内和体外足细胞损伤中的作用研究

发布时间：2017-06-04 07:17

  本文关键词：Angptl4在体内和体外足细胞损伤中的作用研究，，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：研究背景：微小病变(Minimal Change Disease, MCD)是肾病综合征的常见类型,病理特点为电镜下足细胞足突广泛融合、消失。足细胞损伤在MCD的发病与进展中发挥重要作用。血管生成素样蛋白4(Angiopoietin-like4, Angptl4)是血管生成素样蛋白家族成员,在糖脂代谢、肿瘤代谢、动脉粥样硬化、血管发生等方面具有重要作用。近年来研究发现,Angptl4也参与肾脏疾病的发生发展,与足细胞损伤的机制存在密切联系。 研究目的：对比分析足细胞损伤肾病患者血尿中Angptl4的表达特点。检测Angptl4在足细胞及大鼠模型肾脏的表达差异,并探索甲强龙对MCD大鼠模型的治疗作用。 实验方法： 第一部分：Angptl4在足细胞损伤患者的血浆、尿液中的表达 将入选者分为足细胞损伤肾病综合征组(NS组)、足细胞损伤非肾病综合征组(non-NS组)、IgA肾病组(IgAN组)和健康对照组,收集四组入选者的血浆、尿液标本,运用ELISA法测定Angptl4表达情况,并结合电镜检查足细胞损伤情况、尿蛋白等分析Angptl4表达的特点。 第二部分：MCD大鼠模型的研究将健康SD大鼠分为正常对照组、模型组、治疗组,模型组给予嘌呤霉素(PAN)静脉注射,治疗组在PAN静注同时予甲强龙治疗。在各时间点留集大鼠肾脏、血清、尿液标本,并测定其生化指标(尿蛋白、血清白蛋白、血甘油三酯、血胆固醇等)。ELISA法测定大鼠血尿中Angptl4表达情况。 第三部分：Angptl4在足细胞、大鼠肾脏上的表达 将体外培养的足细胞经爬片培养后,分别予以PAN和对照处理。再分别予以鬼笔环肽和Angptl4免疫荧光染色,观察细胞骨架形态和Angptl4分布情况。取正常组、模型组、治疗组大鼠的肾脏组织切片进行免疫组化分析检测肾组织上的Angptl4表达。 研究结果： 1、血浆中,NS组、non-NS组Angptl4含量显著低于IgAN组和Control组；尿液中,NS组、non-NS组和IgAN组Angptl4含量较control组显著升高,其中NS组显著明显高于其他三组。电镜下足突融合程度高组血浆Angptl4水平降低,尿液Angptl4含量升高。 2、尿蛋白、血甘油三酯和血胆固醇检测,模型组较对照组显著上升,而治疗组较模型组显著下降。血清白蛋白,模型组较对照组显著下降,治疗组较模型组显著上升。模型组血清Angptl4含量显著低于对照组；尿液中Angptl4含量,模型组显著高于对照组,治疗组较模型组明显下降。 3、经PAN处理后的足细胞骨架发生明显的断裂重组。Angptl4的荧光染色,PAN处理足细胞较正常足细胞Angptl4表达量明显增多。免疫组化分析,MCD大鼠相对正常鼠肾小球上出现明显的Angptl4较强阳性表达,而治疗组大鼠阳性程度相较对照组明显降低。 结论： 1、Angptl4在足细胞损伤患者中有特异性表达,尿液中Angptl4蛋白的差异可以反映足细胞损伤程度的差异。 2、对MCD大鼠模型予以甲强龙治疗,能显著减少其蛋白尿症状,并且也能改善血清白蛋白、甘油三脂等生理指标。 3、肾小球足细胞特异性表达Angptl4,且足细胞损伤时Angptl4表达明显上升,该蛋白与足细胞损伤机制密切相关,而予以甲强龙治疗能缓解这种作用。
【关键词】：血管生成素样蛋白-4 足细胞损伤 肾病综合征 微小病变大鼠模型 甲强龙
【学位授予单位】：浙江大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R587.2
【目录】：

• 致谢4-5
• 中文摘要5-8
• ABSTRACT8-12
• 缩略对照词表12-13
• 目录13-14
• 背景介绍14-17
• 第一部分：Angpt14在足细胞损伤肾病患者血浆、尿液中的表达特点17-28
• 1. 材料与方法17-20
• 2. 实验结果20-26
• 3. 分析与讨论26-28
• 第二部分：微小病变大鼠模型的建立及甲强龙的治疗作用评估28-39
• 1. 材料与方法28-31
• 2. 实验结果31-37
• 3. 分析与讨论37-39
• 第三部分：Angpt14在足细胞、大鼠肾脏上的表达及甲强龙治疗对其表达的影响39-48
• 1. 材料与方法39-44
• 2. 实验结果44-46
• 3. 分析与讨论46-48
• 全文总结48-52
• 结论52-53
• 参考文献53-56
• 综述56-68
• 参考文献64-68
• 作者简介68

【共引文献】

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本文编号：420303