番石榴叶三萜化合物改善3T3-L1脂肪细胞胰岛素抵抗及其作用机制

发布时间：2017-06-04 06:05

  本文关键词：番石榴叶三萜化合物改善3T3-L1脂肪细胞胰岛素抵抗及其作用机制，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：研究目的： 观察番石榴叶三萜化合物对3T3-L1前脂肪细胞增殖、分化以及胰岛素抵抗脂肪细胞葡萄糖消耗、游离脂肪酸产生、脂联素分泌的影响，探讨其可能的作用机制。 研究方法： 培养3T3-L1前脂肪细胞，给予不同剂量的番石榴叶三萜单体化合物(Triterpenoids from Psidium Guajava Leaves，PGs)PG-1、PG-3、PG-5、PG-7(1μM、3μM、10μM、30μM、100μM)，阳性药罗格列酮10μM，作用48h后，采用MTT法检测对其增殖的影响，采用油红O染色法观察对其分化的影响。取分化成熟的脂肪细胞，建立地塞米松诱导的胰岛素抵抗模型，采用葡萄糖氧化酶-过氧化物酶法（GOD-POD法）检测细胞培养上清液中残余的葡萄糖含量，观察不同剂量的番石榴叶三萜化合物对胰岛素抵抗脂肪细胞葡萄糖消耗的影响；同时，采用比色法检测番石榴叶三萜化合物对胰岛素抵抗脂肪细胞游离脂肪酸产生的影响；ELISA法检测胰岛素抵抗脂肪细胞脂联素水平；WesternBlotting技术检测胰岛素抵抗脂肪细胞内关键调控蛋白PPARγ和PTP1B表达的变化。 研究结果： 1．与溶媒对照组相比，100μM PG-1、PG-5能显著促进3T3-L1前脂肪细胞增殖（P0.05）；PG-7则无明显促增殖作用（P0.05）；PG-3的作用则相反，在30μM、100μM时显著抑制前脂肪细胞增殖（P0.05，或P0.01）。 2．与溶媒对照组相比，100μM PG-1、PG-3、PG-7能明显促进3T3-L1前脂肪细胞分化（P0.05，或P0.01）；PG-5的作用则相反，在30μM、100μM时表现为抑制前脂肪细胞分化（P0.05，或P0.01）。 3．与模型对照组相比，无论在基础状态还是胰岛素刺激状态，番石榴叶三萜各单体化合物PG-1、PG-3、PG-5、PG-7(100μM)均能显著增加胰岛素抵抗脂肪细胞葡萄糖消耗（P0.05，或P0.01），其中尤以PG-1、PG-7的作用明显，其在30μM时即可显著增加胰岛素抵抗脂肪细胞葡萄糖消耗（P0.05）。 4．与模型对照组相比，PG-1和PG-7在30μM时即能显著减少胰岛素抵抗脂肪细胞游离脂肪酸的产生（P0.05，或P0.01）；PG-5则在100μM时明显减少游离脂肪酸的产生（P0.05）；PG-3则无明显的减少作用（P0.05）。 5．与模型对照组相比，PG-1在30μM、100μM均显著促进胰岛素抵抗脂肪细胞的脂联素分泌、上调PPARγ蛋白表达（P0.05，，或P0.01），但对PTP1B蛋白的表达则无明显影响（P0.05）；PG-5在30μM、100μM时对脂联素分泌以及PPARγ蛋白表达无明显影响（P0.05），但能显著下调胰岛素抵抗脂肪细胞PTP1B蛋白的表达（P0.05，或P0.01）。 研究结论： 1.番石榴叶三萜化合物PG-1、PG-3、PG-5、PG-7均能促进胰岛素抵抗脂肪细胞的葡萄糖消耗，提示其具有增加脂肪细胞葡萄糖摄取利用、改善胰岛素抵抗的作用。 2. PG-1促进3T3-L1前脂肪细胞的增殖和分化，增加胰岛素抵抗脂肪细胞葡萄糖摄取利用、抑制游离脂肪酸产生，促进脂联素的分泌，对脂肪细胞胰岛素抵抗有明显的改善作用，其机制可能与上调PPARγ蛋白表达、提高胰岛素敏感性有关。 3. PG-5增加胰岛素抵抗脂肪细胞葡萄糖摄取利用、抑制游离脂肪酸产生，对脂肪细胞胰岛素抵抗有明显改善作用，其机制可能是与下调PTP1B蛋白表达、促进胰岛素信号转导、提高胰岛素敏感性有关。 4.综合分析四种番石榴叶三萜化合物的实验结果，认为PG-1、PG-5可能改善胰岛素抵抗的作用较好，其次是PG-7；PG-3由于对游离脂肪酸的产生无明显影响，则作用最次。
【关键词】：番石榴叶三萜化合物 胰岛素抵抗 3T3-L1脂肪细胞 游离脂肪酸 葡萄糖消耗 脂联素 PPARγ PTP1B
【学位授予单位】：暨南大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2012
【分类号】：R587.1
【目录】：

• 中文摘要3-5
• ABSTRACT5-7
• 目录7-8
• 英文缩写对照表8-10
• 前言10-22
• 第一部分 番石榴叶三萜化合物对 3T3-L1 前脂肪细胞增殖与分化的影响22-31
• 1.材料与方法22-31
• 1.1 实验细胞22
• 1.2 溶液与试剂22-23
• 1.3 主要实验仪器23
• 1.4 主要试剂配制方法23-25
• 1.5 实验方法25-26
• 1.6 实验结果26-29
• 1.7 讨论29-31
• 第二部分 番石榴叶三萜化合物对胰岛素抵抗脂肪细胞糖脂代谢的影响31-42
• 2.材料与方法31-42
• 2.1 实验细胞31
• 2.2 溶液与试剂31
• 2.3 主要实验仪器31
• 2.4 主要试剂配制方法31-32
• 2.5 实验方法32-34
• 2.6 统计学处理34-35
• 2.7 实验结果35-40
• 2.8 讨论40-42
• 第三部分 番石榴叶三萜化合物对胰岛素抵抗脂肪细胞脂联素分泌及PPARγ和PTP1B蛋白表达的影响42-53
• 3.材料与方法42-53
• 3.1 实验细胞42
• 3.2 溶液与试剂42-43
• 3.3 主要实验仪器43
• 3.4 主要试剂配制方法43
• 3.5 实验方法43-44
• 3.6 统计学处理44
• 3.7 实验结果44-50
• 3.8 讨论50-53
• 结论53-54
• 参考文献54-61
• 硕士期间发表论文61-62
• 致谢62

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前1条

1 王淼;邹大进;;蛋白酪氨酸磷酸酶-1B与2型糖尿病[J];国际内分泌代谢杂志;2006年06期

  本文关键词：番石榴叶三萜化合物改善3T3-L1脂肪细胞胰岛素抵抗及其作用机制，由笔耕文化传播整理发布。

本文编号：420139