二甲双胍在3T3-L1前脂肪细胞诱导过程中对v-SNAREs蛋白家族mRNA表达的影响

发布时间：2017-08-07 15:10

  本文关键词：二甲双胍在3T3-L1前脂肪细胞诱导过程中对v-SNAREs蛋白家族mRNA表达的影响

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【摘要】：目的:通过观察3T3-L1前脂肪细胞诱导分化过程中二甲双胍对v-SNAREs m RNA表达变化,探讨二甲双胍在GLUT4转运中的作用机制。方法:购买3T3-L1前脂肪细胞进行培养,当细胞生长至融合度达到100%或过融合时开始诱导,予以诱导液诱导分化,A液3天、B液1天,交替3次,共12天,在诱导过程中,分别给予不同浓度二甲双胍(0、0.5、1、2mmol/L)持续干预,第12天收集标本。诱导成脂通过油红O染色鉴定。运用RT-PCR技术检测脂肪细胞中AMPK、GLUT4、VAMP2、3、4、5、7、8的m RNA水平。实验数据应用SPSS13.0软件进行统计分析,组间差异采用单因素方差分析,组间多重比较用LSD检验,检验水准取a=0.05。结果:AMPK、VAMP4、VAMP7 m RNA结果以单因素方差分析无统计学意义。GLUT4、VAMP2、3、5、8 m RNA结果以单因素方差分析达统计学意义,再行LSD检验结果:1)与0mmol/L组相比,0.5mmol/L组GLUT4、VAMP2、3、8 m RNA水平无统计学差异(P0.05);2)与0mmol/L组相比,1mmol/L组GLUT4、VAMP2、3、8 m RNA水平上调,差异达统计学意义(P0.05);3)与1mmol/L组相比,2mmol/L组GLUT4、VAMP2、3、8 m RNA水平下调,差异有统计学意义(P0.05)。结论:二甲双胍可以作用于前脂肪细胞诱导分化过程中,在1mmol/L浓度范围内,随着二甲双胍浓度增加,可以上调脂肪细胞中GLUT4、VAMP2、3、8 m RNA的表达,且具有一定的剂量依赖效应。1mmol/L可能是二甲双胍在3T3-L1前脂肪细胞作用的最大浓度。二甲双胍可能通过调节v-SNAREs蛋白家族发挥对脂肪细胞GLUT4的转运的调控。当二甲双胍浓度达到2mmol/L,则下调脂肪细胞中GLUT4、VAMP2、3、8 m RNA的表达。本实验为进一步探索二甲双胍在GLUT4转运中的具体作用机制提供理论依据。
【关键词】：可溶性N-乙基马来酰亚胺敏感性因子附着型的蛋白受体 3T3-L1前脂肪细胞 二甲双胍
【学位授予单位】：山西医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R587.1
【目录】：

• 摘要5-7
• Abstract7-9
• 缩略词表9-10
• 前言10-12
• 1 材料与方法12-18
• 1.1 实验材料12-14
• 1.2 实验方法14-17
• 1.3 统计学方法17-18
• 2 结果18-30
• 2.1 3T3-L1前脂肪细胞的诱导分化及鉴定18-20
• 2.2 不同浓度二甲双胍对成脂分化能力的影响20-22
• 2.3 RT-PCR结果22-30
• 3 讨论30-32
• 4 结论32-33
• 参考文献33-38
• 综述38-47
• 参考文献42-47
• 致谢47-48
• 个人简历48

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本文编号：635241