非增殖性糖尿病视网膜病变患者血清miRNA表达谱的分析

发布时间：2017-09-18 08:21

  本文关键词：非增殖性糖尿病视网膜病变患者血清miRNA表达谱的分析

  更多相关文章： 增殖 糖尿病 视网膜 病变 患者 血清 miRNA 表达 分析

【摘要】：目的：通过分析糖尿病视网膜病变非增殖期(NPDR)患者和糖尿病无视网膜病变(NDR)患者血清miRNA表达谱的差异,寻找NPDR患者特异性血清miRNA,为糖尿病视网膜病变(DR)的早期诊断提供生物标志物,并为进一步探讨miRNA在DR发病机制中的作用提供理论依据。方法：根据眼底荧光血管造影结果选取30例2型糖尿病非增殖期视网膜病变(NPDR)患者为实验组,男11例,女19例,30例2型糖尿病无视网膜病变(NDR)患者为对照组,男12例,女18例。采用μ ParafloTM miRNA微流体芯片技术检测并筛选出两组患者血清中表达差异显著的rniRNAs。应用反转录实时荧光定量PCR(qRT-PCR)技术验证芯片结果,确定目的miRNAs。 Pearson法分析目的miRNAs的血清表达量与血糖、血脂的相关性。应用PicTar, TargetScan与MiRanda软件综合预测目的miRNAs的靶基因,取三款软件的交集作为最终靶基因。结果：1.两组患者的年龄、性别、BMI、血压、UAER、 FBG、糖尿病病程、ABI、 PWV相比无统计学意义(P0.05)。与NDR组相比,NPDR组的TG、TC、HbAIC明显增高(P0.05)。2.建立了NPDR患者血清miRNA表达谱。与NDR对照相比,NPDR患者血清中miR-19a, miR-29c, miR-4659b, miR-144表达明显上调(分别为2.09倍、2.34倍、5.46倍、1.01倍),miR-6837, miR-449c,-miR-3139, miR-3944, hsvl-miR-H15表达显著降低(分别为10.18倍、12.59倍、10.48倍、2.07倍、1.26倍)。3.在独立的30例M NPDR和30例NDR患者血清样本中进行差异表达显著的miRNAs的定量PCR检测,选取NPD R患者血清中表达上调的niR-19a, miR-29c, miR-4659b及miR-144进行验证。结果：NPD R患者血清中miR-19a, miR-29c, miR-4659b的表达明显上调,与NDR组相比差异有统计学意义(Z值分别为：-4.184,-4.45,-2.794,双侧P均0.05),与芯片结果相符。1niR-144 Cq值半数以上超出35,提示血清中表达量较低,后续试验中排除。4. Pearson相关性分析显示：血清miR-19a的相对表达量与高密度脂蛋白(HDL)水平显著正相关(r=0.302,P0.05),显示随HDL值升高,血清miR-19a的表达量显著增加；血清miR-29c, miR-4659b的相对表达量与HbA1C值显著正相关(r分别为0.379,0.350,P均0.05),显示随HbA1C值升高,血清miR-29c, miR-4659b 的表达量明显增加。5.受试者工作曲线(ROC)曲线分析显示：miR-19a, miR-29c, miR-4659b的曲线下面积(AUC)分别为：0.814,0.834,0.710,均大于0.7,表明这3个miRNAs对诊断NPDR均有一定的价值,其中miR-29c的AUC面积大于miR-19a和miR-4659b的AUC,表明血清miR-29c对诊断NPDR的敏感度和特异度较高。6.生物信息学分析：通过靶基因软件预测发现,miR-19a调控PIK3CA, PAFAH2, CR2,TFPI, IL20等靶点,广泛参与VEGF信号通路、ErbB信号通路、脂类代谢、细胞凋亡等。miR-29c调控AKT2, LAMA2, MDM2, PMID,CYCS, MAP4KA等靶点,广泛参与MAPK信号通路、胰岛素信号通路、细胞因子及受体的相互作用、细胞外基质受体相互作用、p53信号通路等。MiR-4659b调控ADCY6, CXCL5, TSC1, IL11,EDA2R等靶点,广泛参与间隙连接,血管平滑肌收缩、胰岛素信号通路、mTOR信号通路、细胞因子及受体的相互作用。结论：1.NPDR患者血清miR-19a, miR-29c, miR-4659b高表达。ROC曲线分析提示这3种miRNAs对NPDR的诊断有一定的价值。2.血清miR-19a的表达量与HDL水平呈正相关,miR-29c, miR-4659b的表达量与HbAlC值显著正相关。3. NPDR患者特异性血清niR-19a, miR-29c, miR-4659b可能通过调控糖、脂代谢、VEGF等各种细胞因子、细胞外基质增生、细胞凋亡等,广泛参与了DR的发生发展4.血清miR-19a, miR-29c, miR-4659b极有可能作为早期诊断DR的生物标记物。
【关键词】：
【学位授予单位】：东南大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R774.1;R587.2
【目录】：

• 中文摘要5-7
• 英文摘要7-11
• 缩略词表11-13
• 前言13-16
• 文献综述16-21
• 材料与方法21-30
• 结果30-43
• 讨论43-47
• 结论47-48
• 参考文献48-54
• 致谢54-55
• 作者简介55

【相似文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 王春梅,姜涛,周春燕;诱导心脏发生的早期信号通路[J];中国生物化学与分子生物学报;2004年05期

2 解文博;叶玲;;p38丝裂原活化蛋白激酶信号通路的部分研究方法[J];牙体牙髓牙周病学杂志;2009年10期

3 黎增辉;廖爱军;;JNK信号通路[J];国际病理科学与临床杂志;2010年03期

4 李林;;Wnt信号通路及其与骨形成的关系[J];临床和实验医学杂志;2010年20期

5 李凤贺;辛世杰;杨栋;惠林萍;杨昱;张健;段志泉;;SHH信号通路在血小板源性生长因子诱导的血管平滑肌细胞增殖中的作用研究[J];中国血管外科杂志(电子版);2010年04期

6 陈建勇;王聪;王娟;曹礼荣;;MAPK信号通路研究进展[J];中国医药科学;2011年08期

7 李宝新;李玉坤;;Wnt信号通路对骨调节研究新进展[J];国际骨科学杂志;2008年03期

8 李佳殷;林丽珠;;JNK信号通路在恶性肿瘤中的研究进展[J];实用中医内科杂志;2012年18期

9 张玉婷;刘立新;;胰岛素样生长因子结合蛋白在相关信号通路中的作用研究进展[J];中华消化病与影像杂志(电子版);2012年05期

10 席晓慧;王福文;牟艳玲;;Wnt信号通路与心血管疾病的研究进展[J];食品与药品;2014年01期

中国重要会议论文全文数据库 前10条

1 程华;王文;;经典Wnt信号通路抑制剂[A];2011全国老年痴呆与衰老相关疾病学术会议第三届山东省神经内科医师（学术）论坛论文汇编[C];2011年

2 蒋莹;程华;张丽;艾厚喜;王文;;经典Wnt信号通路抑制剂[A];第一届全国麻醉药理专业委员会第二次学术会议论文集[C];2011年

3 蒋莹;程华;张丽;艾厚喜;王文;;经典Wnt信号通路抑制剂[A];中国成人医药教育论坛（4）[C];2011年

4 蒋莹;程华;张丽;艾厚喜;王文;;经典Wnt信号通路抑制剂[A];中国药理学会补益药药理专业委员会成立大会暨人参及补益药学术研讨会会议论文集[C];2011年

5 李艳菲;艾厚喜;孙芳玲;张丽;蒋莹;王文;;Wnt信号通路研究新进展[A];2013年中国药学大会暨第十三届中国药师周论文集[C];2013年

6 李艳菲;艾厚喜;孙芳玲;张丽;蒋莹;王文;;Wnt信号通路研究新进展[A];2013年全国老年性痴呆与相关疾病学术会议论文汇编[C];2013年

7 李艳菲;艾厚喜;孙芳玲;张丽;蒋莹;王文;;Wnt信号通路研究新进展[A];第三届中国药理学会补益药药理专业委员会学术研讨会论文集[C];2013年

8 季宇彬;胡哲清;邹翔;;MAPK信号通路及其研究进展[A];转化医学研讨会论文集[C];2010年

9 程华;孙芳玲;艾厚喜;张丽;蒋莹;王文;;Wnt信号通路与血管发生[A];全国第三次麻醉药理学术会议论文集[C];2012年

10 李林;;利用小分子探针研究经典Wnt信号通路的信号转导机制[A];中国生物化学与分子生物学会第十一次会员代表大会暨2014年全国学术会议论文集——专题报告七[C];2014年

中国重要报纸全文数据库 前6条

1 刘海英;美发现两种细胞信号通路互动机制[N];科技日报;2009年

2 记者 刘海英;英发现细胞信号通路新“刹车”蛋白[N];科技日报;2012年

3 衣晓峰　陈英云 记者 李丽云;结肠癌发生中新的信号通路找到[N];科技日报;2009年

4 记者 许琦敏;减肥信号受控于脑中“通讯员”[N];文汇报;2008年

5 记者 刘海英;一种蛋白决定人的抗压能力[N];科技日报;2011年

6 通讯员 乔蕤琳 记者 衣晓峰 聂松义;癌症中小分子和微小核苷酸有关联[N];健康报;2012年

中国博士学位论文全文数据库 前10条

1 王森;乙型肝炎病毒表面抗原抑制TLR2和TLR4信号通路的机制研究[D];复旦大学;2014年

2 尚果果;NRF2抗氧化应激信号通路的活化在糖尿病肾病中的保护作用及其机制研究[D];复旦大学;2014年

3 孙鼎琪;Akt信号通路在膀胱肿瘤的进展及化疗敏感性的实验研究[D];山东大学;2015年

4 白秀峰;新基因Gsdma3对小鼠毛囊周期及Wnt/β-catenin信号通路作用的研究[D];第三军医大学;2015年

5 张俊波;PI3K/Akt信号通路调控胞内布鲁氏菌16M存活的分子机制研究[D];石河子大学;2014年

6 成旭东;黄芪活性物质筛选及基于PKC-ERK信号通路抑制肺癌的作用机理研究[D];南京中医药大学;2015年

7 路康;STAT3信号通路介导CLL和MCL发生组蛋白去乙酰化酶抑制剂耐药的机制研究[D];山东大学;2015年

8 赵睿;Wnt信号通路在臂丛神经根性撕脱伤诱发的神经病理性痛中的作用机制研究[D];第四军医大学;2015年

9 刘海燕;Sonic hedgehog信号通路对正常角质形成细胞增殖及凋亡的影响及其分子机制[D];第四军医大学;2015年

10 祁义军;胃肠道间质瘤中Shh信号通路作用的实验研究[D];安徽医科大学;2015年

中国硕士学位论文全文数据库 前10条

1 韩绍芳;小鼠主要嗅觉表皮组织内AC3缺失对相关因子及信号通路的影响[D];河北大学;2015年

2 李玉娟;Hedgehog信号通路在大鼠急性胰腺炎中的作用及其对TNF-α、IL-10的影响[D];河北医科大学;2015年

3 赵玲玲;FLCN与PAT1相互作用调控mTORC1信号通路的机理研究[D];西北农林科技大学;2015年

4 努尔古丽·苏里坦;mir-260和mir-240调控钱虫寿命的研究[D];华中师范大学;2015年

5 王瑜;晚期糖基化终末产物和骨髓间充质干细胞对血管内皮细胞VEGF信号通路的影响及其机制探讨[D];河北医科大学;2015年

6 杨莹莹;microRNA-203通过APC介导活化Wnt/β-catenin信号通路在佐剂性关节炎大鼠成纤维样滑膜细胞中的调控作用及机制研究[D];安徽医科大学;2015年

7 徐贞贞;PM2.5对人支气管上皮细胞JAK/STAT信号通路的影响[D];山西医科大学;2015年

8 徐国栋;芪蛭皱肺颗粒调控肺泡Ⅱ型上皮细胞NF-κB信号通路的研究[D];甘肃中医药大学(原名：甘肃中医学院);2015年

9 陆兆双;多聚左旋精氨酸促进LPS诱导的NCI-H292细胞释放炎症因子IL-6、IL-8的信号通路研究[D];安徽医科大学;2015年

10 修丽梅;P38MAPK信号通路在肢体缺血预处理脑保护中的作用[D];山西医科大学;2015年

，

本文编号：874420