miR-202通过PGC1β调控3T3-L1前脂肪细胞分化

发布时间：2017-09-23 10:02

  本文关键词：miR-202通过PGC1β调控3T3-L1前脂肪细胞分化

  更多相关文章： miR-202 3T3-L1前脂肪细胞 脂肪细胞分化 PGC1β

【摘要】：目的:观察mi R-202对3T3-L1前脂肪细胞分化的影响;探讨miR-202促进3T3-L1前脂肪细胞分化的可能分子机制。方法:1.构建稳定表达AMO-miR-202、乱序对照miRNA细胞系于Gene copoeia公司购得miR-202的反义核苷酸(AMO-mi R-202)及乱序对照miRNA两种重组质粒,经扩增后提取质粒,并经293T细胞行慢病毒包装后,感染3T3-L1前脂肪细胞,于荧光显微镜下观察其感染效率。2.miR-202对3T3-L1前脂肪细胞分化的影响将AMO-miR-202和乱序对照miRNA感染3T3-L1前脂肪细胞,并以未感染的3T3-L1前脂肪细胞作为对照,因此实验分3组:脂肪细胞组、乱序对照组、AMO-miR-202组。随后将3T3-L1前脂肪细胞诱导分化,在诱导第9天,行油红O染色检测脂肪细胞内脂滴的情况,并经RT-PCR检测PPARγ2、aP2的mRNA表达。3.miR-202的靶基因预测主要通过生物学预测网站(TargetScan:http://www.TargetScan.org;miRanda:http://www.miRanda.org;miRBase:http://microna.sanger.ac.uk)寻找miR-202的靶基因。4.miR-202促进3T3-L1前脂肪细胞分化的可能分子机制将上述3组细胞诱导分化至第9天,经western-blot检测pparγ2、ap2、靶基因pgc1β的蛋白表达。结果:1.构建稳定表达amo-mir-202、乱序对照mirna细胞系经293t细胞慢病毒包装amo-mir-202、乱序对照mirna,荧光显微镜下观察,约90%细胞可见荧光;将上述2组病毒液分别感染3t3-l1前脂肪细胞后,荧光显微镜下观察,约80%细胞可见荧光。2.mir-202对3t3-l1前脂肪细胞分化的影响油红o染色结果显示:amo-mir-202组细胞内脂滴明显少于其他两组;rt-pcr结果表明:与脂肪细胞组相比,amo-mir-202组pparγ2和ap2的mrna表达显著降低(p0.05),乱序对照组与脂肪细胞组相比,pparγ2和ap2的mrna表达无显著差异。3.mir-202靶基因的预测通过应用生物信息学方法预测,pgc1β可能是mir-202的靶基因。4.mir-202促进3t3-l1前脂肪细胞分化的可能分子机制western-blot结果显示:与脂肪细胞组相比,amo-mirna-202可显著提高pgc1β蛋白表达,减少pparγ2和ap2的蛋白表达(p0.01),但乱序对照mirna对上述指标无显著影响。结论:1.mir-202可促进3t3-l1前脂肪细胞分化。2.miR-202可能通过靶PGC1β蛋白,提高PPARγ2、aP2的表达来促进3T3-L1前脂肪细胞分化。
【关键词】：miR-202 3T3-L1前脂肪细胞 脂肪细胞分化 PGC1β
【学位授予单位】：南华大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R589.2
【目录】：

• 中文摘要4-7
• 英文摘要7-11
• 主要英文缩略语索11-13
• 第1章 绪论13-17
• 第2章 材料方法17-27
• 第3章 结果27-35
• 第4章 讨论35-39
• 第5章 结论39-41
• 参考文献41-45
• 综述 微小RNA与炎症相关的糖尿病及其并发症关系的研究进展45-53
• 参考文献51-53
• 作者攻读学位期间的科研成果53-55
• 研究基金资助项目55-57
• 致谢57

【相似文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 何静,王平芳;脂肪细胞分化的分子机制研究进展[J];国外医学(生理、病理科学与临床分册);2004年05期

2 祝骥,马文丽,毛向明,李凌,吴清华,郑文岭;绿色荧光蛋白基因在脂肪细胞分化研究中的应用[J];第一军医大学学报;2005年09期

3 龙璐;王平芳;;过氧化物酶体增殖物激活受体及其调控脂肪细胞分化的研究进展[J];中国全科医学;2006年01期

4 王宁;闫晓红;;脂肪细胞分化辅助调节因子的研究进展[J];生理科学进展;2009年04期

5 李名森;蔡东宏;;白色脂肪细胞分化分子机制研究进展[J];中山大学研究生学刊(自然科学.医学版);2013年01期

6 赵琳;脂肪细胞分化过程的细胞表型和分子事件[J];中国康复理论与实践;2002年11期

7 张崇本;脂肪细胞的分化及调控[J];生理科学进展;2004年01期

8 赵萸;脂肪细胞分化的调控及与2型糖尿病的关系[J];国外医学(内分泌学分册);2004年01期

9 倪毓辉,郭锡熔,陈荣华;脂肪细胞分化的表型特征、分子标志和调控[J];国外医学(儿科学分册);2004年06期

10 陈瑾;周训伦;陈洁;;前脂肪细胞分化与肥胖形成关系初探[J];中华中医药学刊;2007年04期

中国重要会议论文全文数据库 前10条

1 束刚;江青艳;傅伟龙;;脂肪细胞分化调控的研究进展[A];动物生理生化学分会第八次学术会议暨全国反刍动物营养生理生化第三次学术研讨会论文摘要汇编[C];2004年

2 张娟;唐红菊;王晓;周丽斌;;小檗碱抑制脂肪细胞分化的机制研究[A];中华医学会第十二次全国内分泌学学术会议论文汇编[C];2013年

3 刘峰;;脂肪细胞分化、功能与调控[A];细胞—生命的基础——中国细胞生物学学会2013年全国学术大会·武汉论文摘要集[C];2013年

4 潘杰;;脂肪细胞分化成熟中脂质调控因子的作用[A];第11届全国脂质与脂蛋白学术会议论文汇编[C];2012年

5 肖宏涛;刘毅;陈克明;;冻存复苏人脐带间充质干细胞体外扩增和向脂肪细胞分化的研究[A];第七届全国创伤学术会议暨2009海峡两岸创伤医学论坛论文汇编[C];2009年

6 肖宏涛;刘毅;陈克明;;冻存复苏人脐带间充质干细胞体外扩增和向脂肪细胞分化的研究[A];中华医学会烧伤外科学分会2009年学术年会论文汇编[C];2009年

7 张志威;荣恩光;史明欣;陈月婵;闫晓红;王宁;李辉;;鸡KLF2基因的表达分析和功能研究[A];中国的遗传学研究——遗传学进步推动中国西部经济与社会发展——2011年中国遗传学会大会论文摘要汇编[C];2011年

8 许金飞;洪尚宇;廖侃;;Akt是3T3L1前脂肪细胞分化和克隆扩增所必需的信号分子[A];中国细胞生物学学会第八届会员代表大会暨学术大会论文摘要集[C];2003年

9 武春艳;王宇祥;张志威;李辉;;过表达SREBP1基因对鸡脂肪细胞分化标志基因启动子活性的影响[A];中国畜牧兽医学会家禽学分会第九次代表会议暨第十六次全国家禽学术讨论会论文集[C];2013年

10 夏黎;季晨博;郭锡熔;;miRNA与脂肪细胞分化、肥胖[A];中华医学会第十七次全国儿科学术大会论文汇编（下册）[C];2012年

中国博士学位论文全文数据库 前10条

1 黄家鑫;C/EBPβ在脂肪细胞分化过程中对自噬的调控及SC01在肥胖相关代谢性疾病中的机制研究[D];复旦大学;2014年

2 王姗;RNA结合蛋白QKI在脂肪细胞分化中的作用研究[D];第四军医大学;2015年

3 高鹏;生长激素与其信号分子STAT5B对脂肪细胞分化的影响[D];山东大学;2015年

4 段中潮;Tudor-SN蛋白调控脂肪分化的机制及其对代谢的影响[D];天津医科大学;2015年

5 何群;TAZ在脂肪细胞分化过程中的作用及调节[D];复旦大学;2010年

6 潘士锋;调控猪脂肪代谢的microRNAs的筛选和功能研究[D];南京农业大学;2014年

7 丁芳;鸭前脂肪细胞分化调控及FAS与SCD1基因的克隆与表达[D];四川农业大学;2015年

8 韩吉龙;脂尾型绵羊尾部脂肪富集的蛋白质组学研究[D];中国农业科学院;2016年

9 周一然;蛋白激酶C-βΙ和-δ在脂肪细胞分化中的作用[D];中国科学院研究生院（上海生命科学研究院）;2006年

10 杜宝文;新基因筛选及其在脂肪细胞中的功能研究[D];西北农林科技大学;2013年

中国硕士学位论文全文数据库 前10条

1 张露;优质肉鸡脂肪沉积相关基因的筛选及其在前脂肪细胞分化过程中的表达研究[D];四川农业大学;2015年

2 徐慧;三种不同结构的叶瓜参鞘脂对脂肪细胞分化和脂质代谢的调控作用研究[D];中国海洋大学;2015年

3 王彤彤;Gpr54在脂质代谢中的生物学功能及其机理研究[D];华东师范大学;2015年

4 杨yN琦;维生素D受体在SD大鼠原代脂肪细胞分化过程中的表达规律及脂质沉积研究[D];陕西理工学院;2016年

5 迟玉杨;LiCl对3T3-L1前脂肪细胞分化以及Villin2和β-catenin基因表达的影响[D];吉林大学;2016年

6 秦佑;树豆酮酸A抑制3T3-L1脂肪细胞分化及调控其脂质代谢的作用研究[D];广州中医药大学;2016年

7 占猛斯;miR-425对3T3-L1细胞分化的抑制作用研究[D];华中农业大学;2016年

8 王昌兰;miR-196b-5p对脂肪细胞分化的调控[D];天津医科大学;2016年

9 曹参;miR-202通过PGC1β调控3T3-L1前脂肪细胞分化[D];南华大学;2016年

10 姬俊;桑属异戊烯基黄酮类化合物干预脂肪细胞分化作用的研究[D];复旦大学;2012年

，

本文编号：904608