硫化氢通过抑制ROS-TLR4通路对抗高糖诱导的H9c2心肌细胞损伤和炎症反应

发布时间：2017-09-30 01:24

  本文关键词：硫化氢通过抑制ROS-TLR4通路对抗高糖诱导的H9c2心肌细胞损伤和炎症反应

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【摘要】：目的探讨外源性硫化氢(H2S)能否通过抑制活性氧(ROS)-Toll样受体4(TLR4)通路对抗高糖诱导的H9c2心肌细胞损伤和炎症反应。方法应用细胞计数盒(CCK-8)检测细胞存活率,用试剂盒检测细胞培养液中乳酸脱氢酶(LDH)活性,ELISA检测细胞培养液中白细胞介素1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的水平,Hoechst 33258核染色荧光显微镜照相法测定凋亡细胞数量,Western blot测定TLR4和Cleaved Caspase 3蛋白的表达水平,双氯荧光素染色荧光显微镜照相法测定细胞内ROS水平,罗丹明123染色荧光显微镜照相法检测线粒体膜电位(MMP)。结果应用35 mmol/L葡萄糖(高糖)作用H9c2心肌细胞24 h能上调TLR4的表达水平。在高糖作用前,应用1000μmol/L N-乙酰半胱氨酸(NAC)预处理60 min或400μmol/L硫氢化钠(Na HS)预处理30 min能明显减轻高糖对TLR4蛋白表达的上调作用。高糖作用心肌细胞24 h可引起心肌细胞损伤和炎症反应,使细胞存活率降低,LDH活性、凋亡细胞数量、Cleaved Caspase 3蛋白的表达、ROS生成、MMP丢失及IL-1β和TNF-α的分泌增加;400μmol/L Na HS预处理心肌细胞30 min后再予高糖作用24 h或30μmol/L TAK-242(TLR4抑制剂)和高糖共处理心肌细胞24 h能显著拮抗高糖引起的上述损伤和炎症反应。结论外源性H2S可通过抑制ROS-TLR4通路对抗高糖诱导的H9c2心肌细胞损伤和炎症反应。
【作者单位】： 广州市番禺区中心医院心血管内科;广州市番禺区心血管疾病研究所;东莞市第三人民医院心血管内科;东莞市心血管疾病研究所;
【关键词】： 硫化氢 活性氧 Toll样受体 高糖 心肌细胞损伤 炎症反应
【基金】：广东省自然科学基金资助项目(2015A030313690) 番禺区科技计划项目(2015-Z03-57)
【分类号】：R587.2;R54
【正文快照】： 越来越多的证据表明,高血糖是导致糖尿病所有心血管并发症如冠心病、糖尿病心肌病(diabeticcardiomyopathy,DCM)发生的最主要病理生理机制之一。高血糖引起心血管损伤的机制是多方面的,包括炎症反应、氧化应激、心肌细胞死亡、激活多个信号分子通路等[1-6]。研究表明,在DCM患

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本文编号：945352