5-氨基酮戊酸联合红光的光动力疗法对皮肤Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白及TGF-β1的影响

发布时间：2017-10-12 22:33

本文关键词：5-氨基酮戊酸联合红光的光动力疗法对皮肤Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白及TGF-β1的影响

【摘要】：背景：皮肤老化通常分为自然老化与光老化。自然老化是随年龄增长由个体遗传背景差异占主导因素导致的老化,表现为皮肤细小皱纹、松弛、粗糙、干燥等。光老化是以紫外线照射为主,吸烟、空气污染等造成的皮肤老化,表现为皮肤粗而深的皱纹、弹性降低、色素沉着等。肤色浅的严重光老化患者还可伴皮肤毛细血管扩张、萎缩及光化性角化病等癌前病变,肤色深的严重光老化患者还可表现出皮革样外观。人们通常在30岁以前即可表现出上述皮肤老化症状,不但影响外观同时也给人们造成严重心理负担。随着我国科学技术与经济水平的不断发展,人们生活水平逐步提高,对美容嫩肤的需求也日益增加。近年来,强脉冲光、激光、红蓝光均被用于治疗皮肤老化的研究并取得一定疗效。目前,光动力疗法由于安全简便、耐受性高、可重复操作、不良反应少等诸多优点在皮肤科被广泛应用,是一种较有前景的治疗手段。临床医生在采取光动力疗法治疗皮肤肿瘤的过程中发现这一方法在治疗光化性角化病等皮肤癌前期病变的同时,对周围皮肤还具有嫩肤的作用,促进了人们对光动力治疗皮肤老化的探索。在我国及德国,红光作为光动力疗法(photodynamic therapy,PDT)的主要光源被广泛应用。皮肤真皮的主要成分为I、Ⅲ型胶原,研究发现转化生长因子-β1 (transforming growth factor-betal,TGF-β1)可通过增加Ⅰ、Ⅲ型胶原基因的表达促进胶原合成抑制其降解。Ⅰ、Ⅲ型胶原及TGF-β1与皮肤老化紧密相关,这三项指标是评价皮肤老化治疗足否有效的主要相关因子。因此,我们展开一项关于5-氨基酮戊酸联合红光光动力疗法对ICR小鼠皮肤Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白及TGF-β1表达影响的研究,并探索其治疗的适宜光敏剂浓度和照射剂量。目的：本实验采用不同浓度的光敏剂作用于ICR小鼠,通过检测小鼠背部皮肤Ⅰ、Ⅲ型胶原及TGF-β1表达探讨5-氨基酮戊酸联合红光的光动力疗法治疗皮肤老化的作用及可能的最适浓度。从而为红光光源的光动力疗法应用于临床皮肤老化的治疗提供新的指导思路。方法：1采用不同浓度的光敏剂5-氨基酮戊酸及不同剂量红光作用于ICR小鼠背部皮肤,观察两周,根据小鼠背部皮肤表现,初步确定合适的光动力参数即光敏剂浓度和照光剂量。2将24只4月龄ICR小鼠随机分为空白对照组、单纯红光组、光动力组,每组8只,其中光动力组每只小鼠背部皮肤相等面积区域分别给予3%、5%、10%的光敏剂。各组小鼠每2周给予一次相应处理,共3次。3于ICR小鼠处理后第1、7、14、28天4个不同时间点取同等大小ICR小鼠背部皮肤HE染色观察小鼠背部皮肤大体形态变化。免疫组织化学染色制片,每个切片随机选取5个大小相等的视野,计算每个视野中IⅢ型胶原含量面积百分比以及TGF-β1的积分光密度值,然后计算每张切片5个视野的平均值。4采用SPSS13.0统计软件对实验数据进行统计学分析,结果以均数±标准差(X±S)表示。经统计,数据均符合正态分布,方差齐,多样本均数比较采用单因素方差分析(ANOVA),多重比较采用SNK检验。结果：1为选择合适的光动力参数,我们分别采用30J、60J、90J、120J的红光照射剂量联合3%、5%、10%、20%的光敏剂浓度作用于ICR小鼠背部皮肤,观察两周发现,120J的红光照射剂量及20%的光敏剂浓度均会导致小鼠皮肤明显水疱、渗出等不良反应,因此我们排除了上述红光照射剂量及光敏剂浓度。考虑到小鼠个体差异及实验有效性,我们选取了未导致皮肤不良反应的90J临界红光照射剂量及3%、5%、10%的光敏剂浓度进行试验。2经处理后第7天单纯红光组及3%、5%、10%的光动力组与空白对照组比较小鼠背部皮肤Ⅰ型胶原含量增加,不同浓度光动力组较单纯红光组Ⅰ型胶原表达量增加明显,且随光敏剂浓度递增Ⅰ型胶原含量增加有统计学意义(P0.05)。第14天仅10%光动力组ICR小鼠与空白对照组、单纯红光组比较Ⅰ型胶原含量面积百分比差异有统计学意义(P0.05)。结果显示与单纯红光组及3%、5%光动力组比较,10%光动力组促进Ⅰ胶原增加作用更明显、持久。3经处理后第1天仅5%光动力组Ⅲ型胶原含量与空白对照组比较差异有统计学意义,但其Ⅲ型胶原含量减少。第7天、第14天单纯红光组ICR小鼠与空白对照组进行比较,Ⅲ型胶原含量增加无统计学意义(P0.05),3%、5%、10%光动力组与空白对照组比较,Ⅲ型胶原含量增加均有统计学意义(P0.05)。第28天单纯红光组及3%、5%、10%光动力组与空白对照组比较Ⅲ型胶原含量增加均有统计学意义(P0.05)。结果提示光动力组ICR小鼠较单纯红光组更早表现出Ⅲ型胶原含量增加,且10%光动力组在第14天、28天Ⅲ型胶原含量增加较其他各组差异有统计学意义(P0.05)。4单纯红光组及3%、5%、10%光动力组ICR小鼠在处理后第1天、第7天与空白对照组比较,TGF-β1光密度值增加均有统计学意义(P0.05),第1天以10%光动力组TGF-β1光密度值增加最为显著,第7天以3%光动力处理组TGF-β1光密度值增加最为显著。此后逐渐下降,至第14天、第28天时各组TGF-β1光密度值比较无统计学意义(P0.05)。结论：15-氨基酮戊酸联合红光的光动力疗法可促进Ⅰ、Ⅲ型胶原、TGF-β1的表达,对皮肤老化的改善具有一定积极作用。2适宜的光敏剂浓度是治疗皮肤老化的关键,本实验提示10%的5-氨基酮戊酸光动力疗法对Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白、TGF-β1的改善多数情况下较3%、5%的光动力疗法及单纯红光更明显,可能为治疗皮肤老化的适宜浓度。
【关键词】：皮肤老化 光动力疗法 5-氨基酮戊酸 红光 Ⅰ型胶原 Ⅲ型胶原 转化生长因子-β1
【学位授予单位】：河北医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R751.05
【目录】：