Kaposi肉瘤中HUMARA基因的克隆性研究

发布时间：2017-10-16 17:30

  本文关键词：Kaposi肉瘤中HUMARA基因的克隆性研究

  更多相关文章： Kaposi肉瘤 X染色体失活 雄激素受体基因 克隆性分析

【摘要】：目的：Kaposi肉瘤是又称多发性、特发性出血性肉瘤，是一种少见的多中心性发生的肿瘤。由于在有关血管肿瘤的命名中将Kaposi肉瘤定义为中度恶性血管肿瘤，且临床上常可见到经典型Kaposi肉瘤患者长期带瘤生存，医源型Kaposi肉瘤患者在去除免疫抑制剂后皮损可自愈，因此一些学者认为Kaposi肉瘤为良性增生性疾病。本研究通过检测HUMARA基因，分析Kaposi肉瘤组织的X染色体失活方式，从而探讨其克隆性起源。 方法：选择25例女性石蜡包埋组织，其中Kaposi肉瘤组15例，皮肤良性血管瘤组10例，分别提取DNA，经甲基化敏感限制性内切酶HpaII酶切消化，聚合酶链反应（PCR）扩增HUMARA基因，产物经10%聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE），溴化乙锭染色后显示该基因多态性，以此判断Kaposi肉瘤克隆状态。 结果：15例Kaposi肉瘤石蜡组织样本中，HUMARA基因杂合子13例，其中X染色体HUMARA基因杂合性丢失（即酶切前为2条带、酶切后为1条带）12例（12/13），，为单克隆性；10例皮肤良性血管瘤中，HUMARA基因杂合子9例，仅1例杂合性丢失，两组差异有统计学意义（P0.01）。不同民族、分期、HIV和HHV-8感染的Kaposi肉瘤单克隆率差异无统计学意义（P0.05）。 结论：Kaposi肉瘤可能是单个细胞克隆起源的肿瘤。Kaposi肉瘤的克隆性可能与民族、分期、HIV和HHV-8感染无明显相关性。
【关键词】：Kaposi肉瘤 X染色体失活 雄激素受体基因 克隆性分析
【学位授予单位】：石河子大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2014
【分类号】：R739.5
【目录】：

• 摘要6-7
• Abstract7-8
• 英文缩略语表8-9
• 前言9-12
• 材料与方法12-23
• 1. 材料12-17
• 1.1 研究对象12
• 1.2 实验所用材料及试剂12-17
• 2. 方法17-21
• 2.1 改良 TES 水浴脱蜡-酚氯仿法提取组织 DNA17-18
• 2.2 基因组 DNA 浓度测定18
• 2.3 甲基化敏感限制性内切酶酶切消化 DNA18
• 2.4 梯度 PCR 扩增 HUMARA 基因18-19
• 2.5 PCR 产物琼脂糖凝胶电泳鉴定19-20
• 2.6 SDS-PAGE 凝胶电泳鉴定扩增成功的 PCR 产物20-21
• 3. 实验室的质量控制21-22
• 3.1 组织 DNA 的制备及梯度 PCR 检测的质量控制方法21
• 3.2 SDS-PAGE 凝胶电泳制备及电泳过程中的质量控制方法21-22
• 4. 数据结果的分析22-23
• 结果23-26
• 1. Kaposi 肉瘤组织和对照组（皮肤血管瘤）的一般资料23
• 2. Kaposi 肉瘤和皮肤良性血管瘤中 HUMARA 基因的检测结果23-26
• 2.1 基因组 DNA 的检测结果23-24
• 2.2 HUMARA 基因的杂合率24
• 2.3 Kaposi 肉瘤与皮肤良性血管瘤组织克隆状态比较24-25
• 2.4 Kaposi 肉瘤克隆状态与 Kaposi 肉瘤相关因素的关系25-26
• 讨论26-33
• 1. Kaposi 肉瘤克隆性研究必要性的探讨26-27
• 2. X 染色体 HUMARA 基因随机失活用于克隆性分析的原理探讨27-29
• 3. Kaposi 肉瘤的克隆状态及意义的探讨29
• 4. 不同民族、分期、HIV 和 HHV-8 感染的 Kaposi 肉瘤克隆性探讨29-30
• 5. 克隆性检测在 Kaposi 肉瘤患者治疗中意义的探讨30-31
• 6. Kaposi 肉瘤克隆性进一步研究的探讨31
• 7. 小结31-33
• 结论33-34
• 参考文献34-38
• 文献综述38-47
• 参考文献44-47
• 附表47-49
• 致谢49-50
• 作者简介50-51
• 导师评阅表51

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前3条

1 康晓静;石得仁;;卡波西肉瘤[J];临床皮肤科杂志;2006年11期

2 王振华,昌红,迪里努尔,柴敏秀;14例Kaposi肉瘤临床与病理分析[J];临床与实验病理学杂志;1997年02期

3 普雄明，石得仁，沈大为;新疆Kaposi肉瘤16例免疫组化观察[J];中国皮肤性病学杂志;1994年02期

本文编号：1043970