大鼠皮肤成纤维细胞在低密度培养条件下基质金属蛋白酶9和13基因表达的抑制
发布时间:2017-10-18 08:09
本文关键词:大鼠皮肤成纤维细胞在低密度培养条件下基质金属蛋白酶9和13基因表达的抑制
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【摘要】:为探索体外促进原代皮肤成纤维细胞转分化为肌成纤维细胞的培养条件及原代皮肤成纤维细胞转分化前后两种状态下经肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor alpha,TNF-α)刺激,其MMP基因的表达情况。利用Wistar大鼠真皮分离出的原代成纤维细胞为模型,分别以高密度与低密度将细胞培养于塑料界面,通过Western Blot和q RT-PCR检测肌成纤维细胞的标志物α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达量;同时经TNF-α刺激后,利用q RT-PCR和明胶酶谱检测高密度与低密度两种状态下MMP-9和MMP-13的表达及两种状态下MMP-9的活性。发现大鼠真皮中分离出的原代成纤维细胞在低密度培养条件下,可以有效地转分化为肌成纤维细胞,其标志物α-SMA显著上调;经肿瘤坏死因子刺激,成纤维细胞在低密度培养条件下MMP-9和MMP-13对TNF-α刺激的响应程度较高密度培养时显著降低。初步表明在大鼠真皮(dermis)中,原代成纤维细胞体外转分化为肌成纤维细胞且MMP-9和MMP-13在肌成纤维细胞中下调的现象是细胞密度依赖型。
【作者单位】: 四川大学生命科学学院;
【关键词】: 基质金属蛋白酶 原代成纤维细胞 密度培养 转分化 肿瘤坏死因子
【基金】:四川省科技支撑项目(2014SZ0194)
【分类号】:R751
【正文快照】: 0引言基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinases,MMPs)是一类锌离子依赖的肽链内切酶,属于金属蛋白酶家族。目前已发现至少20种MMPs,按照作用底物可分为明胶酶、胶原酶、基质溶解酶和膜型基质金属蛋白酶[1]。MMPs在结构上具有较高的同源性,大多数MMPs都包括前肽结构域、催化,
本文编号:1053880
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