用于人体黑素细胞培养和移植的壳聚糖纳米纤维膜的研究

发布时间：2017-10-20 08:08

  本文关键词：用于人体黑素细胞培养和移植的壳聚糖纳米纤维膜的研究

  更多相关文章： 白癜风 黑素细胞 纳米纤维膜 静电纺丝 壳聚糖 聚环氧乙烷 黑素细胞复合膜 细胞活性

【摘要】：白癜风是一种常见的色素脱失性皮肤疾病,发病率约为0.1-2%,白斑处因缺乏黑色素易被阳光灼伤,甚至引发皮肤癌,同时还给患者带来心理困扰,影响工作生活。白癜风的治疗极具挑战,需要有效的治疗手段。将黑素细胞培养于生物相容性膜上形成黑素细胞复合膜,用于移植治疗,为白癜风治疗提供新途径。本课题利用静电纺丝技术,以壳聚糖(Chitosan)为基材,共混不同比例的聚环氧乙烷(PEO),考察了聚合物粘度、电压、接收距离、推进速率等条件对壳聚糖静电纺丝的影响,优化工艺条件,连续制备了直径为250-500nm、厚度为180μm的壳聚糖/PEO纳米纤维膜,纤维形态均匀无珠粒。用Na2CO3中和纳米纤维膜可保持其形态,纳米纤维膜泡水后仍能保持膜的多孔结构。成功构建了壳聚糖/PEO纳米纤维膜黑素细胞复合膜,纳米纤维膜的高比表面积和高孔隙率能更好地模仿人体细胞外基质,促进细胞培养液和黑素细胞代谢产物的更新,有利于黑素细胞保持良好的生物活性,从而改善了传统致密膜基材培养黑素细胞存在老化程度严重的问题。不同PEO/壳聚糖共混比例对培养在纳米纤维膜上的黑素细胞形态和内部结构影响不大,纳米纤维膜对黑素细胞的生物相容性随PEO从5%增至10%略有提升,含10% PEO的纳米纤维膜培养的黑素细胞的活性最佳。本课题创新之处在于：利用静电纺丝技术制备用于培养人体黑素细胞的纳米纤维膜,其对黑素细胞的生物相容性明显优于传统致密膜。纳米纤维膜不仅能支持黑素细胞生长增殖,改善黑素细胞老化的问题,同时纳米纤维膜具有良好的机械性能,满足黑素细胞负载、培养、转移和移植的使用要求,为治疗白癜风提供优越的生物基材。
【关键词】：白癜风 黑素细胞 纳米纤维膜 静电纺丝 壳聚糖 聚环氧乙烷 黑素细胞复合膜 细胞活性
【学位授予单位】：浙江大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R758.41;TB383.2
【目录】：

• 摘要5-6
• Abstract6-11
• 第一章 绪论11-24
• 1.1 白癜风11-13
• 1.1.1 白癜风危害11
• 1.1.2 黑素细胞11-12
• 1.1.3 传统白癜风治疗方法12-13
• 1.2 组织工程和组织工程皮肤13-17
• 1.2.1 组织工程13-14
• 1.2.2 组织工程材料14-15
• 1.2.3 组织工程皮肤15
• 1.2.4 组织工程技术治疗白癜风15-16
• 1.2.5 黑素细胞在组织工程方面的研究进展16-17
• 1.3 静电纺丝17-22
• 1.3.1 静电纺丝简介17-18
• 1.3.2 静电纺丝制备的纳米纤维的应用18-19
• 1.3.3 静电纺丝工作原理19
• 1.3.4 静电纺丝工艺影响因素19-21
• 1.3.5 壳聚糖静电纺丝的研究21-22
• 1.3.6 静电纺丝纳米纤维在组织工程的应用22
• 1.4 课题提出与研究思路22-24
• 第二章 壳聚糖/PEO纳米纤维膜的制备及研究24-37
• 2.1 引言24-25
• 2.2 实验部分25-28
• 2.2.1 原料和试剂25
• 2.2.2 壳聚糖/PEO纳米纤维膜的制备25-26
• 2.2.3 壳聚糖/PEO溶液及纳米纤维膜表征26-28
• 2.3 结果与讨论28-36
• 2.3.1 不同质量分数的壳聚糖/PEO溶液对粘度的影响28
• 2.3.2 壳聚糖/PEO纳米纤维膜厚度28-29
• 2.3.3 纳米纤维膜红外光谱29-30
• 2.3.4 壳聚糖/PEO静电纺丝工艺条件确立30-31
• 2.3.5 不同中和条件对纳米纤维膜形态的影响31-32
• 2.3.6 壳聚糖/PEO纳米纤维膜交联32-33
• 2.3.7 纳米纤维膜的吸水率33-34
• 2.3.8 纳米纤维膜泡水后的稳定性34-36
• 2.4 本章小结36-37
• 第三章 黑素细胞复合膜的构建37-48
• 3.1 引言37
• 3.2 实验部分37-41
• 3.2.1 原料和试剂37-38
• 3.2.2 黑素细胞复合膜的构建38
• 3.2.3 黑素细胞形态表征38-39
• 3.2.4 黑素细胞的贴附39
• 3.2.5 黑素细胞增殖39-40
• 3.2.6 单个黑素细胞的黑素含量40-41
• 3.3 结果与讨论41-47
• 3.3.1 黑素细胞形态41-43
• 3.3.2 黑素细胞的贴附43-44
• 3.3.3 黑素细胞增殖44-45
• 3.3.4 单个黑素细胞黑素含量45-46
• 3.3.5 壳聚糖/PEO纳米纤维膜生物相容性评价46-47
• 3.4 本章小结47-48
• 第四章 PEO对纳米纤维膜的生物相容性的影响48-60
• 4.1 引言48
• 4.2 实验部分48-52
• 4.2.1 原料和试剂48
• 4.2.2 不同共混比例的壳聚糖/PEO纳米纤维膜的制备48-49
• 4.2.3 不同共混比例的壳聚糖/PEO溶液及纳米纤维膜表征49-50
• 4.2.4 不同共混比例纳米纤维膜的黑素细胞复合膜构建50
• 4.2.5 黑素细胞形态50
• 4.2.6 黑素细胞增殖50-51
• 4.2.7 单个细胞的黑素含量51-52
• 4.3 结果与讨论52-59
• 4.3.1 不同共混比例的壳聚糖/PEO纳米纤维膜性能52
• 4.3.2 不同共混比例壳聚糖/PEO纳米纤维膜红外光谱52-54
• 4.3.3 纳米纤维膜泡水后稳定性54-56
• 4.3.4 黑素细胞形态56-57
• 4.3.5 不同共混比例纳米纤维膜上黑素细胞增殖57-58
• 4.3.6 不同共混比例纳米纤维膜上单个细胞黑素含量58-59
• 4.4 本章小结59-60
• 第五章 全文结论60-61
• 参考文献61-68
• 致谢68-69
• 作者简历69

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本文编号：1066172