跨膜接头蛋白PAG1过表达对皮肤鳞癌细胞A431运动能力的影响
本文关键词：跨膜接头蛋白PAG1过表达对皮肤鳞癌细胞A431运动能力的影响 出处：《肿瘤防治研究》2016年09期 论文类型：期刊论文
【摘要】：目的研究跨膜接头蛋白PAG1过表达对人皮肤鳞状细胞癌A431运动能力的影响。方法构建PAG1-EGFP融合蛋白的慢病毒表达载体,采用反转录病毒转染的方法建立PAG1过表达的A431细胞株,实验分为3组:亲本细胞组(未进行基因转染的A431细胞)、对照组(A431细胞转染仅含EGFP阴性对照病毒)、实验组(A431细胞转染PAG1-EGFP病毒)。流式细胞术检测细胞转染率,实时荧光定量PCR及Western blot检测转染后PAG1 mRNA及其蛋白表达,进一步验证细胞转染成功与否;利用划痕修复实验、Transwell迁移实验、侵袭实验三种不同的方法检测PAG1基因的过表达是否会对皮肤鳞癌细胞的生长、迁移和侵袭能力产生影响。结果实验组和对照组目的基因病毒的转染表达率分别为(94.97±0.15)%、(94.60±0.35)%;实验组细胞中PAG1基因m RNA的表达量约为亲本细胞组的1.6倍(P=0.000),转染后实验组中PAG1蛋白的相对表达水平明显增加(P=0.000),建立了稳定过表达PAG1的A431细胞系;PAG1过表达明显降低A431细胞愈合率(P=0.000);实验组A431细胞迁移、侵袭能力明显降低(P=0.001,P=0.000)。结论 PAG1的过表达能抑制人皮肤鳞癌细胞运动能力,影响肿瘤的浸润及远处转移。
[Abstract]:Objective To investigate the effect of overexpression of PAG1 overexpression on the expression of PAG1 - EGFP fusion protein in human skin squamous cell carcinoma A431 cells . Conclusion The overexpression of PAG1 can inhibit the movement of human skin squamous carcinoma cells and influence invasion and distant metastasis of tumor .
【作者单位】： 青岛大学附属医院烧伤整形外科;青岛大学医学院免疫教研室;青岛市市立医院(集团)胸外科;
【分类号】：R739.5
【正文快照】： 0引言物:5’-GATGACCTTGCCCACAGCCT-3’,下游引皮肤鳞状细胞癌(cutaneous squamous cell物:5’-ATCTCTGCCCCCTCTGCTGA-3’。反应条carcinoma,c SCC)起源于表皮角质形成细胞,是件:95℃10 min;95℃10 s、60℃20 s、72℃10 s,世界第二大最常见的非黑色素瘤皮肤癌[1]。肿瘤40个循
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，本文编号：1392936
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