中波紫外线对体外培养HaCaT细胞MAPK信号通路的影响
本文关键词:中波紫外线对体外培养HaCaT细胞MAPK信号通路的影响 出处:《苏州大学》2015年硕士论文 论文类型:学位论文
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【摘要】:目的:探讨中波紫外线照射后不同时间点体外培养的Ha Ca T细胞MAPK信号通路受调控效应。方法:1.5、4.5、7.5、10、20、30、50m J/cm2中波紫外线照射Ha Ca T细胞后8h,对照组细胞除不进行UVB照射外,其他处理同各剂量UVB组,蛋白免疫印迹法测定ERK1/2、JNK和p38蛋白表达及磷酸化水平;50 m J/cm2中波紫外线照射Ha Ca T细胞,蛋白免疫印迹法测定照射后2、4、8、12h 4个时间点,细胞ERK1/2、JNK和p38蛋白表达及磷酸化水平。使用Quantity One软件计算目的条带吸光度,以相应蛋白条带的吸光度值与GAPDH蛋白内参条带吸光度值的比值表示相对蛋白含量。结果:7.5、10、20、30、50 m J/cm2 UVB照射Ha Ca T细胞后8 h,ERK1/2、JNK磷酸化水平明显上调(P0.05),20、30、50 m J/cm2 UVB照射Ha Ca T细胞后p38磷酸化水平上调显著(P0.05),且都在50 m J/cm2照射后效应最为显著(P0.05)。50 m J/cm2 UVB照射Ha Ca T细胞后8h,ERK1/2磷酸化产物水平出现上调,在处理后的第12小时,与对照组(10.277±0.320)比较,差异有统计学意义(44.844±2.023,P0.05),而p38和JNK磷酸化产物水平在照射后2 h即开始上调(P0.05),第4、8、12小时,p38和JNK与对照相比,UVB照射后虽仍然存在着显著地磷酸化水平差异(P0.05),但随时间推移JNK磷酸化产物水平这种上调的趋势逐渐弱化(P0.05)。结论:在50m J/cm2中波紫外线照射后的Ha Ca T细胞中,ERK1/2、p38、JNK这3种MAPK信号通路产生了活化效应,具有一定的时间效应差异。
[Abstract]:Objective: to investigate the regulatory effect of MAPK signaling pathway of Ha Ca T cells cultured in vitro at different time points after ultraviolet B irradiation. After 50 m J / cm 2 UV irradiation on Ha Ca T cells, the control cells were treated with the same doses of UVB except for those without UVB irradiation. The expression and phosphorylation of JNK and p38 in ERK1 / 2 were detected by Western blot. Ha Ca T cells were irradiated with 50 m J / cm 2 ultraviolet radiation. The ERK1/2 of Ha Ca T cells was determined by Western blotting. JNK and p38 protein expression and phosphorylation level. The target band absorbance was calculated by Quantity One software. The relative protein content was expressed by the ratio of the absorbance value of the corresponding protein band to the absorbance value of the internal reference strip of GAPDH protein. The phosphorylation level of ERK1 / 2 JNK was upregulated at 8 h after 50 m J / cm 2 UVB irradiation on Ha Ca T cells. The phosphorylation of p38 in Ha Ca T cells was upregulated by 50 m J / cm 2 UVB irradiation (P 0.05). The effects of 50 m J / cm 2 UVB irradiation on Ha Ca T cells were the most significant at 8 h after irradiation with 50 m J / cm 2 UVB. The level of phosphorylation products of ERK1/2 was up-regulated and compared with that of control group (10.277 卤0.320) at the 12th hour after treatment. The difference was statistically significant (44.844 卤2.023 P0.05), while the phosphorylation products of p38 and JNK began to up-regulate P0.05 and 4M8 at 2 h after irradiation. There was still a significant difference in phosphorylation level between P38 and JNK 12 hours after irradiation compared with control group (P0.05). However, the up-regulation of phosphorylation products of JNK gradually weakened P0.05 with time. Conclusion: in Ha Ca T cells irradiated by 50 m J / cm 2 UVB. The activation effect of ERK1 / 2 / 2 / p38 MAPK signaling pathway is different in some degree.
【学位授予单位】:苏州大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2015
【分类号】:R751
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,本文编号:1401540
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