人真皮间充质干细胞对白癜风患者皮损周围CD8~+T淋巴细胞表达和分泌IL

发布时间：2016-10-22 15:45

  本文关键词：人真皮间充质干细胞对白癜风患者皮损周围CD8~+T淋巴细胞表达和分泌IL-13的实验研究，由笔耕文化传播整理发布。

《安徽医科大学》 2014年

人真皮间充质干细胞对白癜风患者皮损周围CD8~+T淋巴细胞表达和分泌IL-13的实验研究

鲍华烨  

【摘要】：白癜风是一种常见的皮肤色素脱失性疾病，其发病机制复杂，病因不明，治疗困难，通常以黑素细胞的破坏或者缺失导致色素脱失斑的产生为特征。白癜风可发生于任何年龄以及任何部位。近年来，该病的发病率有上升的趋势。白癜风主要影响患者的容貌，特别是颜面部皮损，给患者造成巨大的精神和心理压力。本病病因复杂，确切的发病机制尚不清楚。发病机制有众多学说，一般广为接受的基本学说包括：遗传学说，黑素细胞自毁学说，自身免疫学说以及神经学说等。本病治疗的手段多种多样，但是均不能达到令患者及医生非常满意的程度。 本课题组前期已经将人真皮来源的间充质干细胞和白癜风患者CD8+T淋巴细胞共同培养，发现DMSC抑制患者CD8+T淋巴细胞的活性和增殖，并促进其凋亡。并且，将DMSC与白癜风患者皮损周围CD8+T淋巴细胞共同培养，做了细胞因子芯片，分析比较各组细胞分泌的细胞因子，研究发现，患者皮损周围CD8+T淋巴细胞和DMSC共同培养后，多种细胞因子分泌下降，其中IL-13的下降更加显著。 本实验以IL-13为靶点，旨在研究IL-13在DMSC和白癜风患者皮损周围CD8+T淋巴细胞介导的免疫反应中可能发挥的作用。 目的 初步探讨人真皮间充质干细胞（DMSC）对白癜风患者皮损周围CD8+T淋巴细胞分泌表达IL-13的影响。 方法 应用细胞增殖检测法（MTS）检测重组IL-13（rIL-13）对黑素细胞增殖的影响。采用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）和蛋白质印迹法（Western印迹法）分别检测8例进展期寻常型白癜风患者皮损周围及外周血中CD8+T淋巴细胞中IL-13基因和蛋白表达。应用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应（qRT-PCR）技术和双抗体夹心ELISA法分别检测DMSC与白癜风患者皮损周围CD8+T淋巴细胞共培养前后细胞IL-13mRNA水平和上清蛋白水平的表达。流式细胞术检测rIL-13对CD8+T淋巴细胞的增殖及活性影响。 结果不同浓度（10,50,100，250,500μg/L）的rIL-13作用黑素细胞24、48、72、96h后黑素细胞的增殖与对照组比较均未见明显变化（均P0.05）。白癜风患者皮损周围及外周血中CD8+T淋巴细胞均可表达IL-13，但皮损周围CD8+T淋巴细胞表达IL-13更显著，，将皮损周围CD8+T淋巴细胞和DMSC共培养，CD8+T淋巴细胞IL-13mRNA(0.100±0.010)和蛋白表达水平(1509.62±148.44)均显著低于单独培养CD8+T淋巴细胞（mRNA：0.383±0.018，蛋白：5507.98±518.11，均P0.05）。100μg/L rIL-13作用CD8+T淋巴细胞24、48、72h, CD8+T淋巴细胞的增殖及活性均为见明显变化。 结论 白癜风患者皮损周围CD8+T淋巴细胞高表达IL-13，DMSC抑制白癜风患者皮损周围CD8+T淋巴细胞表达和分泌IL-13。

【关键词】：
【学位授予单位】：安徽医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2014
【分类号】：R758.41
【目录】：

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