UVB对体外培养皮肤干细胞某些标记分子表达的影响研究
本文选题：体外培养 切入点：皮肤干细胞 出处：《福建医科大学》2010年硕士论文
【摘要】： 目的:探讨UVB对体外培养的皮肤干细胞某些标记分子表达的影响。 方法:利用快速贴壁的方法分离培养皮肤干细胞,K15、β整合素鉴定其干细胞性质。利用峰值在305nm的UVB照射皮肤干细胞,照射剂量为10mJ/cm2。观察皮肤干细胞在经过UVB照射(实验组)与未经过照射(对照组)其形态学变化。免疫组化分别检测实验组与对照组皮肤干细胞标记分子K15、β整合素、CD34、beta-catenin、P53的表达变化。 结果:①成功分离并培养了皮肤干细胞。分离出来皮肤干细胞其特征性标记分子K15及β整合素表达阳性。②对照组干细胞密度大,细胞呈圆形或多角形,细胞形态清晰,胞质均匀,可见有核分裂细胞,核质比例大。实验组细胞密度稀,细胞变形、不规则,细胞质出现空泡,核质比例变小。部分细胞出现核固缩和凋亡。③对照组皮肤干细胞beta-Catenin主要在细胞膜和细胞质表达,其胞膜和胞核染色阳性率分别为64.74%,8.4%。P53主要在胞质表达,其胞核染色阳性率为6.9%;实验组皮肤干细胞beta-Catenin主要在细胞质和细胞核表达,其胞膜和胞核染色阳性率分别为70.54%和0。P53主要在细胞核表达,其胞核染色阳性率为100%。CD34在两种情况下均不表达。④对照组K15和β整合素在细胞质表达,实验组两者均不表达。 结论: 1.利用快速贴壁法可分离出皮肤干细胞,其皮肤干细胞特征性标记分子K15及β整合素表达阳性。 2.UVB能使皮肤干细胞的形态发生明显的改变。 3.UVB能使CD34阴性皮肤干细胞beta-Catenin在细胞质积聚并内移入胞核。 4.P53可定位于皮肤干细胞的细胞质,在经过UVB照射后可转移入细胞核。 5.UVB能使皮肤干细胞的标记分子K15和β整合素表达消失。
[Abstract]:Objective: to investigate the effect of UVB on the expression of some marker molecules in cultured skin stem cells. Methods: skin stem cells were isolated and cultured by rapid adherent method. The stem cells were identified by 尾 integrin. Skin stem cells were irradiated by peak value of 305nm in UVB. The morphological changes of skin stem cells were observed by UVB irradiation (experimental group) and unirradiated skin stem cells (control group). The expression of K15, 尾 integrin CD34 and beta-catenin p53 were detected by immunohistochemistry. Results the skin stem cells were isolated and cultured successfully by 1: 1. The stem cells in the control group with positive expression of K15 and 尾 integrin were characterized by large density, round or polygonal cells, and clear morphology. The cytoplasm was homogeneous, mitotic cells could be seen, and the ratio of nucleus to cytoplasm was large. In the experimental group, the density of the cells was thin, the cells were deformed, the cells were irregular, and the cytoplasm was vacuolar. In the control group, beta-Catenin was mainly expressed in cell membrane and cytoplasm, and the positive rate of membrane and nucleus staining was 64.748.4. p53 was mainly expressed in cytoplasm. The positive rate of beta-Catenin in the skin stem cells of the experimental group was mainly expressed in the cytoplasm and nucleus, and the positive rates of beta-Catenin in the membrane and nucleus were 70.54% and 70.54%, respectively. The positive rate of nuclear staining was that 100%.CD34 did not express K15 and 尾 integrin in cytoplasm of the control group in both cases, and neither of the two groups in the experimental group expressed K15 and 尾 integrin in the cytoplasm. Conclusion:. 1. Skin stem cells were isolated by rapid adherent method, and K15 and 尾 integrin were positive. 2.UVB can significantly change the morphology of skin stem cells. 3.UVB can induce beta-Catenin accumulation in cytoplasm and transfer into nucleus of CD34 negative skin stem cells. 4.P53 can be localized in the cytoplasm of skin stem cells and metastasized into the nucleus after UVB irradiation. 5.UVB reduced the expression of K 15 and 尾 integrin in skin stem cells.
【学位授予单位】：福建医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2010
【分类号】：R751
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，本文编号：1677991
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