BaP联合UVB对人角质形成细胞Caspase

  本文关键词：BaP联合UVB对人角质形成细胞Caspase-14和Filaggrin表达的影响，由笔耕文化传播整理发布。

《天津医科大学》 2013年

BaP联合UVB对人角质形成细胞Caspase-14和Filaggrin表达的影响

张芳芳  

【摘要】：目的 研究不同浓度苯并芘(BaP)与不同剂量(UVB)(中波紫外线分别及联合作用下对永生化人角质形成细胞株(HaCaT)增殖活性及半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶-14(Caspase-14)和丝聚蛋白(Filaggrin) mRNA表达的影响,探讨其同BaP及UVB所致的细胞损伤的关系。 方法 第一部分：培养HaCaT细胞；绘制细胞生长曲线；分别用浓度为30、50、80、100μmol/L BaP及剂量为10、30、60、90mJ/cm2的UVB分别作用HaCaT细胞,采用四甲基偶氮唑蓝比色实验(MTT法)测定HaCaT细胞增殖活性；逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测不同浓度BaP和不同剂量UVB分别作用24h后HaCaT细胞Caspase-14mRNA和Filaggrin mRNA的表达水平。 第二部分：选取一定浓度BaP和一定剂量UVB联合条件下HaCaT细胞,用MTT法测定作用前后HaCaT细胞增殖活性；RT-PCR方法检测80μmol/L BaP和60mJ/cm2UVB联合作用HaCaT细胞24h后Caspase-14mRNA和Filaggrin mRNA的表达水平。 结果 1.对照组细胞随培养时间的延长细胞增殖活性增加；经BaP和UVB作用后,细胞增殖活性较对照组相应时间点下降,差异有统计学意义(P0.05)； 2.对照组细胞Caspase-14mRNA和Filaggrin mRNA呈低水平表达或基本不表达,经浓度为30、50、80、100μmol/L的BaP及剂量为10、30、60、90mJ/cm2的UVB作用后,HaCaT细胞中Caspase-14mRNA和Filaggrin mRNA相对含量高于相同时间点对照组(P0.05)；不同实验组之间比较差异有统计学意义(P0.01)； 3.80μmol/L BaP联合60mJ/cm2UVB较分别作用对HaCaT细胞增殖活性抑制率明显降低,差异有统计学意义(P0.05)； 4.80μmol/L BaP联合60mJ/cm2UVB作用24h后,HaCaT细胞中Caspase-14mRNA和Filaggrin mRNA表达明显增强,与对照组相比,差异有统计学意义(P0.05),各实验组之间比较,差异性有统计学意义(P0.01)。 结论 1、BaP与UVB可抑制HaCaT细胞的增殖活性,引起细胞的损伤。 2、BaP与UVB作用HaCaT细胞24h后,Caspase-14mRNA和Filaggrin mRNA表达增加,二者存在相互影响关系。 3、BaP联合UVB较分别作用HaCaT细胞后,Caspase-14mRNA和Filaggrin mRNA表达量明显增加,且呈剂量依赖关系。

【关键词】：
【学位授予单位】：天津医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2013
【分类号】：R751
【目录】：

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