RNAi对SD大鼠瘢痕组织及转化生长因子

发布时间：2016-11-24 03:02

  本文关键词：PAI-1-RNAi对SD大鼠瘢痕组织及转化生长因子-β1的影响，由笔耕文化传播整理发布。

《河北医科大学》 2014年

PAI-1-RNAi对SD大鼠瘢痕组织及转化生长因子-β1的影响

郭铮  

【摘要】：目的：瘢痕疙瘩（keloid）是由于皮肤受到损伤后在伤口愈合过程中成纤维细胞的过度增殖和细胞外基质（extracellular matrixc， ECM）在伤口区域过度沉积而形成的疾病。以往研究认为PAI-1的高表达，或许直接参与瘢痕疙瘩的形成，同时在瘢痕疙瘩的发生过程中转化生长因子-β1也发挥着重要的作用，应用小干扰RNA（siRNA）技术，探讨PAI-1-RNAi对SD大鼠瘢痕组织及转化生长因子的影响，为瘢痕疙瘩的发病机制及治疗开辟新的思路。 方法： 1SD大鼠背部瘢痕模型的建立与分组：(1)选取雄性SD大鼠，10%醛麻醉，去除部皮毛、消毒，于脊柱两侧做半径1.5cm的圆形创面，全层皮肤缺损，每日观察伤口愈合情况。(2)7天后，创面用微量注射器隔日注射，每次注射高浓度组0.05ml(实验试剂浓度为20nmol/ml)，低浓度组0.05ml(实验试剂浓度为10nmol/ml)，瘢痕组与正常组注射等同剂量生理盐水，直至创面愈合。 2采用形态学变化及平均愈合时间，测量瘢痕厚度，HE染色，Masson染色，Van-Gieson染色比较皮肤瘢痕组织学改变。 3通过免疫组化染色（SP法）检测TGF-β1的表达水平 结果： 1平均愈合时间结果：高浓度组、低浓度组、瘢痕组、正常组平均愈合时间为(21.15±1.46)d、(24.92±1.55)d、(27.38±1.19)d、(18.61±1.32)d，统计学结果表明正常组愈合时间最快（P＜0.01），，高浓度组愈合时间明显短于低浓度组和瘢痕组（P＜0.01），低浓度组愈合时间明显短于瘢痕组（P＜0.01），瘢痕组愈合时间最长（P＜0.01）。（见Table1） 2瘢痕测量结果：高浓度组、低浓度组、瘢痕组、正常组四组结果分别为(1.70±0.07)mm、(1.98±0.07)mm、(2.66±0.06)mm、(1.25±0.05)mm，统计学结果表明瘢痕组明显大于高浓度组和低浓度组（P＜0.01），低浓度组明显大于高浓度组（P＜0.01），正常组最小（P＜0.01）。（见Table2） 3HE染色 瘢痕组真皮层明显变厚,为周边正常真皮层厚度的3～4倍,可见胶原纤维粗大，排列紊乱，胶原纤维束形成大量结节样结构，其间有大量炎性细胞浸润及毛细血管扩张。（见Fig.2.4） 高浓度组真皮层轻度增厚,可见少量胶原纤维粗大，排列较整齐，偶见结节样结构，其间可见炎性细胞浸润及毛细血管扩张。（见Fig.2.2） 低浓度组真皮层增厚,可见胶原纤维粗大，排列较紊乱，可见少量胶原纤维束形成的结节样结构，其间有炎性细胞浸润及毛细血管扩张。（见Fig.2.3） 正常组中，真皮层略显增厚，胶原纤维界限清晰，胶原排列致密，结构平整，弹性纤维减少，未见炎性细胞浸润及毛细血管扩张。（见Fig.2.1） 4Masson染色 Masson胶原纤维染色结果：胶原纤维呈蓝色。 瘢痕组真皮层可见大量排列紊乱，粗大的深蓝色胶原纤维，可见大量成纤维细胞，呈梭型。（见Fig.3.4） 高浓度组真皮层蓝色胶原纤维染色相对淡浅，排列稀疏整齐，成纤维细胞数量减少。（见Fig.3.2） 低浓度组真皮层蓝色胶原纤维染色较深，排列致密，较紊乱，可见成纤维细胞。（见Fig.3.3） 正常组真皮层胶原纤维排列致密，整齐，可见少量成纤维细胞。（见Fig.3.1） 5Van-Gieson染色 瘢痕组真皮层可见少量的褐色弹性纤维与粗大的胶原纤维混杂，排列紊乱。（见Fig.4.4） 高浓度组可见少量的弹性纤维排列整齐，颜色较深。（见Fig.4.2） 低浓度组可见少量的弹性纤维排列疏松，颜色为淡褐色，和排列紊乱的胶原纤维混杂。（见Fig.4.3） 正常组褐色着染的弹性纤维在真皮层中排列致密，颜色深。（见Fig.4.1） 6免疫组化结果：TGF-β1在正常皮肤、瘢痕疙瘩的表皮及真皮中均会有阳性表达，为黄或棕黄色颗粒，主要定位于上皮基底层细胞和真皮层的成纤维细胞(Fig.5)。采用二级计分法判定结果，四组中TGF-β1的表达水平比较（Table3），TGF-β1在瘢痕组中阳性率为82．61％，高浓度组中为50.00％，低浓度组中阳性率为66.69%，正常组中为28.00％。TGF-β1四组中表达的阳性率有明显差别(P=0.0010．05)，在瘢痕组中TGF-β1阳性率最高，随着试剂浓度的增高，TGF-β1阳性率降低。 结论： 本研究成功建立了大鼠背部瘢痕疙瘩模型，PAI-1-RNAi干预瘢痕疙瘩后改善其瘢痕厚度，愈合时间，病理形态学也有所改善。同时TGF-β1在瘢痕组表达的阳性率明显高于正常组，且随着试剂浓度的增高，TGF-β1在低浓度组、高浓度组表达的阳性率逐渐下降，说明TGF-β1是参与瘢痕疙瘩形成机制中的重要细胞因子，PAI-1有可能正调节TGF-β1的表达。PAI-1有可能通过正调节TGF-β1抑制瘢痕组织的形成。

【关键词】：
【学位授予单位】：河北医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2014
【分类号】：R751
【目录】：

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1 方方;赵亮;吴信峰;钱革;;手术加综合疗法治疗瘢痕疙瘩的临床观察[J];临床皮肤科杂志;2006年04期

2 秦玲;张淑琴;黄可欣;;动脉粥样硬化与纤溶系统及血管内皮功能关系的研究[J];中风与神经疾病杂志;2006年02期

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1 贾绍华;刘冰洁;张道勇;季宇彬;;秦皮乙素诱导人胃癌SGC-7901细胞凋亡机制的研究[J];黑龙江医药;2012年03期

2 沈新天;;颈动脉粥样硬化研究进展[J];中国实用神经疾病杂志;2007年07期

3 韩德昌;梁建锋;韩新光;;LY294002对舌鳞状细胞癌细胞增殖及PTEN蛋白表达的影响[J];郑州大学学报(医学版);2009年03期

4 梁鸿镖;侯俊;冯亚静;段丽菊;程学敏;巴月;崔留欣;;锌对染氟大鼠生精细胞c-fos和c-jun蛋白表达的影响[J];郑州大学学报(医学版);2011年01期

5 李芳华;张新民;;Notch信号通路与乳腺癌的研究进展[J];海南医学院学报;2011年02期

6 韩德昌;梁建锋;韩新光;;PI3K/AKT信号通路特异性抑制剂LY294002对Tca8113细胞增殖活性的影响[J];医药论坛杂志;2009年06期

7 豁银成;孙国杰;杜艳军;;针灸预刺激对AD大鼠神经元凋亡相关蛋白Bcl-2、NF-κB的影响[J];湖北中医学院学报;2010年03期

8 姜春玲;赵东;张卫星;;PI3K/AKT信号通路在全肝缺血再灌注大鼠肺损伤中的作用[J];基础医学与临床;2009年06期

9 李春燕;江山;岳渝娟;陈晓品;;分化抑制因子1对鼻咽癌细胞增殖的影响及其途径[J];解放军医学杂志;2012年06期

10 朱志农;温桂兰;;环核苷酸与组织纤维化[J];江西医药;2007年09期

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1 方剑乔;梁宜;房军帆;杜俊英;刘晋;邱宇洁;;电针即刻镇痛效应及其脊髓p-ERK1/2调控机制[A];2011中国针灸学会年会论文集（摘要）[C];2011年

2 卿燕;梁艳芳;杜清清;徐以平;徐汉宫;石年;;三甲基氯化锡神经毒作用模式初探——NF-κB信号通路在三甲基氯化锡诱导的细胞凋亡中的作用[A];低碳生活与健康损害论坛——中国环境诱变剂学会风险评价专业委员会全国第十三届学术会议暨第四届第5次委员会会议论文集[C];2011年

3 郭长青;胡波;孙红梅;吴海霞;乔晋林;许红;李晓泓;刘乃刚;卢婧;刘琳;谷世喆;;针刀疗法对腰三横突征模型大鼠局部组织IL-6、IL-10、TNF-α、TGF-β的影响[A];中华中医药学会针刀医学分会2008年度学术会议论文集[C];2008年

4 季宇彬;尹立;汲晨锋;;调控细胞凋亡的线粒体因素[A];肿瘤病因学研究与中西医结合肿瘤综合诊疗交流研讨会论文集[C];2009年

5 田伟;雷燕;朱凌群;陈可冀;;人参和三七提取物在血管生成信号通路上作用靶点的研究[A];弘扬中华养生文化 共享健康新生活——中华中医药学会养生康复分会第七届学术年会论文集[C];2010年

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1 胡华;JAK-STAT信号蛋白磷酸化调控心肌细胞凋亡及心痛舒干预研究[D];湖南中医药大学;2010年

2 张丽雅;通过抑制Aurora-B激酶抑制宫颈癌细胞的生长及对顺铂化疗敏感性影响的研究[D];中国医科大学;2010年

3 徐先伟;定喘穴埋针对哮喘大鼠STAT6 EOTAXIN C-FOS蛋白mRNA表达及相关因子的影响[D];黑龙江中医药大学;2010年

4 颜亭祥;“劳倦过度、房事不节”肾阳虚模型下丘脑—垂体—肾上腺皮质—胸腺轴的改变及分子免疫机制的研究[D];山东中医药大学;2010年

5 靳昌忠;HIV-1性传播的关键分子DC-SIGN特异性表达机制研究[D];浙江大学;2011年

6 曲中原;青龙衣抗肿瘤活性成分及其作用机制研究[D];北京中医药大学;2010年

7 于昉;激活素A-卵泡抑素系统在肝损伤中的作用研究[D];吉林大学;2011年

8 刘晓玲;补中益气汤对脾虚大鼠胃粘膜TFF1表达及MEK/ERK通路的影响[D];广州中医药大学;2011年

9 孙运花;电针促进面神经损伤修复的JAK_1-STAT_3信号转导机制研究[D];成都中医药大学;2011年

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2 李晓茹;外源性TGF-β1对绒癌JEG-3细胞增殖与侵袭的影响及分子机制研究[D];承德医学院;2010年

3 黄厚锋;嗜铬细胞瘤/副神经节瘤中VEGFR-2和PDGFR-α的表达及意义[D];北京协和医学院;2010年

4 苏婕;难治性癫痫细胞模型中整合素alpha2表达的相关研究[D];广西医科大学;2011年

5 柴景伟;组胺对哮喘大鼠气道平滑肌细胞增殖及ERKmRNA、CyclinD1mRNA表达的影响[D];山西医科大学;2011年

6 陈朝青;姜黄素抑制UUO大鼠肾小管上皮细胞转分化作用的实验研究[D];北京中医药大学;2011年

7 刘晓倩;益气活血降浊复方对肾间质纤维化大鼠肾脏保护作用及其TGF-β_1-smads-ILK信号转导通路影响的实验研究[D];北京中医药大学;2011年

8 吕廷洪;倍半萜化合物chabranol对4种肿瘤细胞凋亡和自噬的研究[D];兰州大学;2011年

9 李秀芩;钙调神经磷酸酶/活化T细胞核因子信号通路在大鼠主动脉平滑肌细胞钙化中的作用[D];河北医科大学;2011年

10 魏绪法;泡球蚴感染中期小鼠纤维化肝组织中TGF-β1/Smad信号通路的表达和意义[D];新疆医科大学;2011年

【二级参考文献】

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1 罗定泰,罗定安,陈学杰,宋敏;瘢痕疙瘩术后放射治疗的疗效探讨[J];临床外科杂志;1999年05期

2 薛兴欢,代志军,王西京,刘小旭,薛锋杰,马红兵;手术联合术后早期放疗治疗瘢痕疙瘩[J];中国皮肤性病学杂志;2003年03期

3 符荣,赵甲山,赵洪洋,朱贤立,陈衔城;一氧化碳及一氧化氮对局灶性缺血脑组织的影响[J];中风与神经疾病杂志;2004年01期

4 郝文君,白小涓;兔动脉粥样硬化不同阶段一氧化氮及合酶观察[J];中国公共卫生;2005年04期

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1 翟晓翔,罗文辉;中医药治疗瘢痕疙瘩的现状及展望[J];湖南中医学院学报;2004年05期

2 江沁;陕声国;;瘢痕疙瘩形成机制及治疗研究进展[J];咸宁学院学报(医学版);2008年01期

3 朱小勤;陈国庆;;应用皮肤扩张器修复散在瘢痕疙瘩１例[J];中国美容整形外科杂志;1993年03期

4 贺忠文,袁志芳,王标,高慧;瘢痕疙瘩患者外周血淋巴细胞粘附分子CD_(44)表达[J];中华医学美容杂志;1997年03期

5 康尔恂,吴延芳;血清铜蓝蛋白ELISA法测定及在瘢痕疙瘩诊治中的应用[J];中华医学美容杂志;1998年02期

6 罗定泰!430079武汉,罗定安,陈学杰,宋敏;瘢痕疙瘩术后放射治疗的疗效探讨[J];临床外科杂志;1999年05期

7 钱根健;二氧化碳激光切除配合药物注射治疗瘢痕疙瘩[J];江苏临床医学杂志;2000年05期

8 李建凤;液氮冷冻治疗瘢痕疙瘩100例[J];现代康复;2001年10期

9 袁家德!266011,孙丽双!266011;手术加放射性核素治疗瘢痕疙瘩的疗效观察[J];中华医学美学美容杂志;2001年03期

10 林新瑜,罗旭松;瘢痕疙瘩发病机制研究的新进展[J];临床皮肤科杂志;2002年07期

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1 曹为;;黑布药膏治疗瘢痕疙瘩的临床体会[A];中医美容——2010年中华中医药学会中医美容分会学术年会论文集[C];2010年

2 于波;;应用瘢痕上皮回植术治疗耳部巨大瘢痕疙瘩[A];第七届中国医师协会美容与整形医师大会论文集[C];2010年

3 章俊;汪发生;王玉玲;;瘢痕疙瘩核心摘除术+锶90照射的临床治疗效果观察与分析[A];第七届中国医师协会美容与整形医师大会论文集[C];2010年

4 甘承;;无针注射器治疗瘢痕疙瘩的临床研究[A];中华医学会整形外科学分会第十一次全国会议、中国人民解放军整形外科学专业委员会学术交流会、中国中西医结合学会医学美容专业委员会全国会议论文集[C];2011年

5 秦泽莲;黄琛;李博仑;;基于文献挖掘的瘢痕疙瘩相关基因的生物信息学分析[A];中华医学会整形外科学分会第十一次全国会议、中国人民解放军整形外科学专业委员会学术交流会、中国中西医结合学会医学美容专业委员会全国会议论文集[C];2011年

6 甘承;;无针注射器治疗瘢痕疙瘩的临床研究[A];中华医学会整形外科学分会第十一次全国会议、中国人民解放军整形外科学专业委员会学术交流会、中国中西医结合学会医学美容专业委员会全国会议论文集[C];2011年

7 章俊;王玉玲;汪发生;;瘢痕疙瘩核心摘除术+锶90照射的临床治疗效果观察与分析[A];江西省第六次中西医结合皮肤性病学术交流会、江西省第一次中西医结合医学美容学术交流会论文集[C];2008年

8 卓阳;曾兴业;周雪雪;黄大道;;瘢痕疙瘩发病风险与Fas基因-670位点多态性[A];2011年浙江省整形美容学术会议论文汇编[C];2011年

9 沈頔;邢新;王晓云;徐达圆;杨超;;环孢素A对瘢痕疙瘩成纤维细胞增殖及凋亡的影响[A];中华医学会整形外科学分会第十一次全国会议、中国人民解放军整形外科学专业委员会学术交流会、中国中西医结合学会医学美容专业委员会全国会议论文集[C];2011年

10 阮仁杰;;髓核剥离术加得宝松针局封治疗耳廓瘢痕疙瘩46例疗效观察[A];2011年浙江省皮肤病学学术会议论文汇编[C];2011年

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1 赵晴晴;[N];健康时报;2004年

2 皮肤科 黎胜强;[N];家庭医生报;2003年

3 胡献国（副主任医师）;[N];上海中医药报;2003年

4 衣晓峰;[N];健康报;2004年

5 特约记者 衣晓峰;[N];家庭医生报;2004年

6 四川省雅安市人民医院 王乡宁　杨正兵 熊浩;[N];健康报;2011年

7 南国;[N];健康报;2002年

8 胡献国;[N];中国中医药报;2002年

9 河北 主治医师 胡松;[N];家庭医生报;2005年

10 付德明;[N];中国医药报;2004年

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1 斯楼斌;槲皮素对瘢痕疙瘩成纤维细胞放疗增敏作用及乏氧诱导因子表达影响的研究[D];北京协和医学院;2013年

2 朱飞;中国汉族人瘢痕疙瘩易感基因相关性研究[D];安徽医科大学;2013年

3 刘旺;瘢痕疙瘩p53基因突变的实验研究[D];第二军医大学;2003年

4 陆闻生;HLA等位基因及单倍型与汉族人瘢痕疙瘩的相关性研究[D];安徽医科大学;2010年

5 刁建升;HDAC参与瘢痕疙瘩形成的作用及机制研究[D];第四军医大学;2013年

6 周智;相对静息期增生性瘢痕、瘢痕疙瘩瘢痕凋亡相关抗原的表达及相关因素的影响[D];中国人民解放军第四军医大学;2003年

7 郭丽丽;瘢痕疙瘩成纤维细胞核转录因子-kB信号通路及其与锌指蛋白A20相关性研究[D];郑州大学;2010年

8 何淑芳;复方芪参提取物抗瘢痕疙瘩的TGF-β/Smad信号转导及MAPK通路调控机制[D];安徽医科大学;2012年

9 杨力;SMAD3和SMAD7在瘢痕疙瘩成纤维细胞TGF-β/SMADs信号通路中的介导作用研究[D];第四军医大学;2002年

10 李友良;他莫昔芬和腺病毒转染对瘢痕疙瘩成纤维细胞p53表达及细胞周期影响的实验研究[D];第二军医大学;2003年

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1 丁云鹏;两种瘢痕疙瘩综合治疗方案对比研究[D];重庆医科大学;2012年

2 任刘生;203例瘢痕疗效分析及瘢痕疙瘩的最新研究进展[D];山东大学;2012年

3 甘承;无针注射器治疗瘢痕疙瘩的临床研究[D];中国协和医科大学;2010年

4 李永峰;雷帕霉素对体外培养瘢痕疙瘩成纤维细胞增殖的影响[D];福建医科大学;2011年

5 李辉正;瘢痕疙瘩术后电子线治疗70例回顾性研究[D];河北医科大学;2011年

6 黄维娟;复方芪参提取物体外抗瘢痕疙瘩作用及其作用机制[D];安徽医科大学;2011年

7 杨荞榕;脉冲染料激光对瘢痕疙瘩中结缔组织生长因子表达的研究[D];复旦大学;2011年

8 龚桃根;耳部瘢痕疙瘩的临床疗效分析及相关细胞因子表达的研究[D];暨南大学;2012年

9 郭雷洋;瘢痕疙瘩微淋巴管密度与侵袭性生长的相关性研究[D];河北医科大学;2012年

10 吕玉琳;重组人内抑素对人瘢痕疙瘩成纤维细胞增殖的影响及机制研究[D];安徽医科大学;2012年

  本文关键词：PAI-1-RNAi对SD大鼠瘢痕组织及转化生长因子-β1的影响，由笔耕文化传播整理发布。

本文编号：189660