shWnt5a重组慢病毒的制备及其对黑素瘤细胞侵袭的抑制作用

发布时间：2018-06-21 19:25

  本文选题：黑素瘤细胞 + 慢病毒　； 参考：《细胞与分子免疫学杂志》2014年05期

【摘要】：目的构建下调人Wnt5a基因表达的重组质粒并制备重组慢病毒,感染黑素瘤细胞后,观察其对该细胞侵袭的影响。方法构建下调人Wnt5a基因表达的重组质粒pLKO.1-shWnt5a,利用pLKO.1慢病毒包装系统和HEK293T细胞包装、制备携带shWnt5a的重组慢病毒颗粒,并感染WM793B黑素瘤细胞,建立稳定低表达Wnt5a的WM793BWnt5a-黑素瘤细胞株。采取细胞迁移与侵袭实验检测Wnt5a对黑素瘤细胞侵袭的影响。结果成功制备了携带shWnt5a的重组慢病毒,建立低表达Wnt5a的稳定转染细胞株WM793BWnt5a-,细胞迁移与侵袭实验证明抑制Wnt5a基因的表达可以显著抑制黑素瘤的侵袭能力。结论下调Wnt5a基因的表达对黑素瘤的侵袭能力有明显的抑制作用。
[Abstract]:Objective to construct a recombinant plasmid that down-regulates the expression of human Wnt5a gene and prepare a recombinant lentivirus. After infected with melanoma cells, the effect of recombinant lentivirus on the invasion of human Wnt5a cells was observed. Methods Recombinant plasmid pLKO.1-shWnt5awas constructed, and pLKO.1 lentivirus packaging system and HEK293T cell packaging system were used to prepare recombinant lentivirus particles carrying shWnt5a and infect WM793B melanoma cells. WM793BWnt5a-melanoma cell line with low expression of Wnt5a was established. The effect of Wnt5a on the invasion of melanoma cells was detected by cell migration and invasion assay. Results Recombinant lentivirus carrying shWnt5a was successfully prepared, and a stable transfected cell line WM793BWnt5a-expressing Wnt5a was established. Cell migration and invasion experiments showed that inhibiting the expression of Wnt5a gene could significantly inhibit the invasion ability of melanoma. Conclusion down-regulation of Wnt5a gene can inhibit the invasion of melanoma.
【作者单位】： 第四军医大学西京医院皮肤科;第四军医大学生物化学与分子生物学教研室;
【基金】：国家自然科学基金(81072235)
【分类号】：R739.5

【参考文献】

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【二级参考文献】

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本文编号：2049756