柴达木枸杞多糖对UVB诱导HaCaT细胞氧化损伤及凋亡相关蛋白的影响

发布时间：2018-08-06 08:59

【摘要】：目的观察枸杞多糖对UVB照射后HaCaT细胞的氧化损害及P38MAPK、caspase-8、caspase-3和Bcl-2含量的影响。方法超声辅助水提法制备LBP粉末,体外培养HaCaT细胞,将它们随机分为对照组、UVB照射组(UVB 30mJ/cm2照射40min)、UVB+LBP组(UVB 30mJ/cm2照射40min+LBP 1mg/ml),其中UVB+LBP组的LBP在UVB照射前12h加入,照射结束后培养箱中继续培养20h,用倒置显微镜观察细胞的形态变化及凋亡;MTS法检测各组细胞的A值(吸光度);酶生化法检测各组细胞SOD、CAT、GSH-Px和MDA含量;蛋白免疫印迹实验方法检测各组细胞P38MAPK、caspase-8、caspase-3和Bcl-2含量。结果与对照组相比,UVB照射组细胞形态明显异常,漂浮的死细胞明显增多,A值显著下降(P0.05);与UVB照射组相比,UVB+LBP组细胞的形态趋于正常,漂浮的死细胞明显减少,A值显著升高(P0.05)。与对照组相比,UVB照射组细胞SOD活力、CAT活力、GSH-Px含量均显著下降,MDA含量显著上升(P0.05);与UVB照射组相比,UVB+LBP组细胞SOD活力、CAT活力、GSH-Px含量显著上升,MDA含量显著下降(P0.05)。与对照组相比,UVB照射组细胞P38MAPK、caspase-8、caspase-3含量显著上升,Bcl-2含量显著下降(P0.05);与UVB照射组相比,UVB+LBP组细胞P38MAPK、caspase-8、caspase-3含量显著下降,Bcl-2含量显著增高(P0.05)。结论枸杞多糖可显著缓解UVB照射HaCaT细胞所引起的氧化损害,并且下调P38MAPK、caspase-8、caspase-3含量及上调Bcl-2含量。
[Abstract]:Objective to observe the effects of Lycium barbarum polysaccharides on oxidative damage of HaCaT cells and the contents of caspase-8 caspase-3 and Bcl-2 after UVB irradiation. Methods LBP powder was prepared by ultrasonic assisted extraction of water. HaCaT cells were cultured in vitro. They were randomly divided into two groups: the control group (UVB 30mJ/cm2 irradiated 40min) and UVB 30mJ/cm2 LBP group (UVB 30mJ/cm2 irradiation 40min LBP 1mg/ml). LBP of UVB LBP group was added 12 hours before UVB irradiation. After irradiation, the cells were cultured in the incubator for 20 hours. The morphologic changes and apoptosis of the cells were observed by inverted microscope. The A value (absorbance) of the cells in each group was detected by MTS, and the contents of GSH-Px and MDA in the cells of each group were detected by enzyme biochemistry method. Western blot assay was used to detect the content of p38 MAPKT caspase-8 caspase-3 and Bcl-2. Results compared with the control group, the morphology of the cells in UVB irradiation group was obviously abnormal, the number of floating dead cells decreased significantly (P0.05), and the morphology of LBP cells in UVB group tended to be normal, while the dead cells in floating cells decreased significantly (P0.05). Compared with the control group, the content of SOD activity and cat activity and GSH-Px in UVB group decreased significantly (P0.05), and the content of SOD activity and cat activity and GSH-Px in UVB LBP group increased significantly compared with the control group (P0.05). Compared with the control group, the content of P38 MAPKtcaspase-8, caspase-8, caspase-3 in UVB irradiation group increased significantly (P0.05), and the content of Bcl-2 in UVB LBP group decreased significantly (P0.05), while that in UVB LBP group decreased significantly compared with the control group (P0.05). Conclusion Lycium barbarum polysaccharides can significantly alleviate the oxidative damage induced by UVB irradiation on HaCaT cells, and down-regulate the content of p38 MAPK- caspase-8 caspase-3 and up-regulate the content of Bcl-2.
【学位授予单位】：青海大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：R751

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本文编号：2167208