痤疮患者的痤疮丙酸杆菌对大环内酯类和四环素类抗生素耐药性分析
【图文】：
鈇锛衢婵?Americantypeculturecollection)。四环素(批号:U8IML)、多西环素(7BSTH)、米诺环素(78G4G)、红霉素(VWDPD-HH)、克拉霉素(OF5ＲK-OF)、阿奇霉素(FCKPD-SＲ)均购于日本TCI公司，为试剂级产品。1.3方法1.3.1标本采集患者用清水及洗面奶清洁面部，去除面部灰尘、化妆品等后，，取仰卧位，用75%酒精对取材处皮损进行常规消毒3次，待酒精完全挥发后，用粉刺针刺破丘疹或脓疱表面，再用灭菌粉刺环挤压出丘疹或脓疱内容物;挑取内容物，迅速接种到厌氧血琼脂平板上。1.3.2痤疮丙酸杆菌分离、培养与鉴定操作流程见图1。图1痤疮丙酸杆菌分离、培养与鉴定Fig.1Isolation，cultureandidentificationofPropionibacteriumacnes1.3.3痤疮丙酸杆菌的保存和复苏挑取纯化后培养得到的菌落3满环悬浮于EP保存管(主要成分为脱脂奶粉)中，5min内置于－70℃冰箱内冷冻保存。将保存于－70℃冰箱内的菌种保存管置于36℃恒温箱内复温0.5h，以无菌接种环轻微搅拌脱脂牛奶菌悬液，取适量菌悬液于厌氧血琼脂培养基上，以无菌接种环沾取菌悬液或者磁珠划线涂布平板，将平板迅速放入厌氧罐中，放入厌氧指示剂和催化剂(钯粒)，密闭厌氧罐，使用多功能微生物培养系统进行换气，最终成为厌氧环境，置于36℃恒温箱中培养48h。1.3.4体外药敏试验按照琼脂稀释法［3］分别配制红霉素、阿奇霉素、克拉霉素、四环素、多西环素和米诺环素药物浓度从0.0625～256μg/mL浓度梯度药敏平板。每一种抗菌药物均有空白对照及需氧平板对照。菌悬液的制备:从厌氧血琼脂平板上选择经48h孵育产生的菌落，15min内用0.9%生理盐水稀释，调整浊度等于0.5麦氏浊度标准(相当于105CFU/点)。将所有P.acnes菌悬液用多点加液仪接种到琼脂表面。将接种好的平板放入厌氧
【作者单位】： 暨南大学医学院附属东莞医院;
【基金】：东莞市社会科技发展项目(2013108101042)
【分类号】：R758.733
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