脐血多能干细胞对重症斑秃的临床治疗及相关免疫机制研究

发布时间：2017-03-18 22:05

  本文关键词：脐血多能干细胞对重症斑秃的临床治疗及相关免疫机制研究，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的：探讨脐血多能干细胞（human cord blood-derived multipotent stemcells，CB-SCs）对重症斑秃（alopecia areata，AA）的临床治疗作用，并初步评估其疗效；其次评估其对自身免疫的调节。 方法： 1使用脐血多能干细胞治疗9例严重的斑秃患者。分离出的脐血多能干细胞，转移到一个由9层培养皿组成的干细胞教育器（Stem CellEducator）中，在37℃，8%CO2的条件下在含有1640和7%胎牛血清的培养基上进行培养，待80%-90%的细胞汇合后进行治疗。干细胞教育器是一个闭合的回路系统，使用带有16号IV型针头的采血袋，连接血细胞采集仪进行肘正中静脉采血，同时采出的全血经过血细胞采集仪分离出患者的淋巴细胞，收集到的淋巴细胞被转移到教育器中与脐血多能干细胞共同培养，其它的血液成分自动地回输到患者体内。经过教育的淋巴细胞与生理盐水通过患者的手背静脉回输到体内。脐血多能干细胞紧紧地黏附于教育器的内表面，所以仅是经受脐血多能干细胞教育的自体淋巴细胞被回输到患者体内。整个过程大概需要8-9个小时。随访观察1、3、6、9和12个月患者毛发再生的情况，并进行拍照做治疗前和治疗后的对比。 29例患者在治疗前和治疗后1个月时采集外周静脉血，用流式细胞仪分别检测IL-4、IL-13、IL-17A、TNF-α、TGF-β1、IL-5、IL-12和FoxP3的表达水平，以及CD28和ICOS-CD278的表达水平。 39例患者在治疗前和治疗后3个月时行头皮病理组织活检，使用石蜡切片做HE染色，使用冰冻切片做直接免疫荧光染色，染色抗体分别为TGF-β1、CD14、CD11b、CD83、DEC205和FoxP3。 结果： 1临床治愈有2例，其中全秃1例，斑秃1例。显效1例，为普秃患者在治疗后3个月时有80%以上的头发长出，同时眉毛和胡须也长出。好转5例，其中普秃1例，为自1岁时出现脱发的17岁的患者，在治疗后3个月时其眉毛和胡须出现再生。斑秃1例，在治疗后3个月时其双手十指甲板上小凹明显减少变浅。无效1例，为普秃患者对此治疗没有反应。 2流式细胞仪检测表明斑秃患者在接受治疗后，IL-4（P0.05)和IL-5（P0.05)在治疗后出现了升高， IL-13（P0.05）虽然无统计学意义，，但在治疗后也有升高的趋势。故患者表现出了Th2细胞因子的上调（如：IL-4、IL-5、IL-13）。IL-12（P0.05）无明显变化。TGF-β1（P0.05)在治疗后1个月时有显著增高。FoxP3（P0.05)的百分比无明显变化。CD28（P0.05)的表达明显升高，但是ICOS（P0.05)的水平没有明显变化。 3HE染色，治疗前镜下观察可见毛囊及皮脂腺周围大量淋巴细胞浸润，偶见少量嗜酸性粒细胞。治疗后3个月时镜下观察头皮HE染色切片，可见毛囊及皮脂腺周围淋巴细胞浸润基本消失。 4直接免疫荧光测定表明TGF-β1在治疗后表达增强，其在毛囊周围形成“TGF-β1环”。为了说明TGF-β1产生的源头，我们做了双染，通过使用单核细胞/巨噬细胞（CD14和CD11b）、朗格汉斯细胞（CD83和DEC205）和Treg T细胞（FoxP3）的表面标记，仅有一部分CD14+的单核细胞/CD11b+的巨噬细胞和FoxP3+的Treg细胞移行进入到了真皮内产生TGF-β1，我们发现治疗后在毛囊的角质形成细胞内有TGF-β1的强表达。CD83和DEC205在治疗前后均无表达。 结论： 脐血多能干细胞对于重症斑秃的治疗是可行的，并且安全有效。它调节了斑秃患者的自身免疫，恢复了Th1/Th2型细胞因子的平衡。改善了毛发的生长情况，并且产生了持久的作用。
【关键词】：斑秃 脐血多能干细胞 干细胞教育器 自身免疫 免疫调节 细胞因子 TGF-β1
【学位授予单位】：河北医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2014
【分类号】：R758.71
【目录】：

• 摘要4-6
• ABSTRACT6-9
• 英文缩写9-10
• 引言10-11
• 材料与方法11-16
• 结果16-18
• 附图18-27
• 附表27-29
• 讨论29-32
• 结论32
• 参考文献32-36
• 综述36-46
• 参考文献42-46
• 致谢46-47
• 个人简历47

【共引文献】

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1 丛璐;蒲传强;;Th17细胞与Treg细胞在肌肉疾病免疫机制中作用的研究进展[J];国际神经病学神经外科学杂志;2015年01期

2 李福高;徐承智;虞英民;;依巴斯汀临床研究进展[J];中国医药导刊;2015年04期

3 徐银土;徐浩锋;;米诺地尔酊治疗脱发的临床观察[J];海峡药学;2010年06期

4 潘莉;郭新东;罗海英;冼燕萍;柯振华;陈意光;吴玉銮;;高效液相色谱法测定洗发护发类化妆品中米诺地尔[J];江南大学学报(自然科学版);2011年02期

5 黄卫宁;黄卓辉;卢肖霞;卢浩锵;侯显曾;;甘草酸苷对重型斑秃外周血Th1/Th2细胞因子的调控研究[J];皮肤性病诊疗学杂志;2011年05期

6 冯素英;靳培英;;30例全秃和普秃患者的临床特点和治疗分析[J];中国麻风皮肤病杂志;2008年03期

7 刘维;申洪;;米诺地尔纳米结构脂质体的体外透皮吸收研究[J];中国美容医学;2011年05期

8 吴仁根;;米诺地尔酊联合养血生发胶囊治疗男性型脱发临床观察[J];海峡药学;2013年01期

9 李洁思;陈雷宁;;螺内酯联合米诺地尔搽剂治疗女性雄激素源性脱发的疗效观察[J];皮肤性病诊疗学杂志;2013年02期

10 孙玉财;冯子轩;;八珍汤加味联合外用米诺地尔酊治疗斑秃30例临床观察[J];江苏中医药;2013年10期

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1 郭红卫;黑素皮质素受体-2在斑秃组织中表达异常及其可能机制的探讨[D];第三军医大学;2010年

2 郑国沛;旁分泌或自分泌细胞因子在乳腺癌上皮—间质转化（EMT）及耐药和转移中的作用[D];中南大学;2013年

3 封海波;川牛膝多糖对小鼠免疫反应的影响及机理研究[D];四川农业大学;2013年

4 高鑫;负性免疫分子TIM-3和细胞因子IL-33在T细胞介导的肿瘤免疫中的作用及机制[D];苏州大学;2013年

5 彭永东;miR-224、miR-146b、miR-215和miR-135a 对脂肪细胞分化和脂质代谢的作用研究[D];华中农业大学;2014年

6 孙敏;脂肪干细胞治疗小鼠卵巢早衰的初步研究[D];第四军医大学;2014年

7 胡瑞铭;口服非那雄胺1mg/d、外用5%米诺地尔溶液及联合治疗男性雄激素性秃发的疗效评估及相关血清学变化[D];复旦大学;2013年

8 王玉亮;共刺激分子OX40/OX40L mRNA表达与急性移植排斥的相关性研究[D];天津医科大学;2012年

9 胡克邦;Treg/Th17/Th1细胞及其细胞因子在肾移植排斥反应中的机制研究及临床意义[D];吉林大学;2014年

10 李晓燕;TGF-β诱导的LMO1上调促进食管鳞癌的EMT和转移[D];第二军医大学;2014年

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1 吴学春;苡仁祛湿汤治疗湿热型雄激素性脱发的临床观察与头发元素含量分析[D];南京中医药大学;2011年

2 刘维;米诺地尔纳米脂质载体的制备及其体外经皮吸收研究[D];南方医科大学;2011年

3 李峥;PUVA-头巾帽疗法治疗斑秃疗效观察[D];大连医科大学;2008年

4 王瑶;紫檀浸膏对雄激素失调所致疾病治疗作用的研究[D];西南交通大学;2008年

5 薛芬;章光101生发系列产品对C57BL/6J小鼠毛发生长的影响[D];西北农林科技大学;2009年

6 方晓玲;生发汤治疗脂溢性脱发（血热风燥型）的临床观察[D];成都中医药大学;2009年

7 程毅;IGF-1、FGF7与毛乳头细胞生物学特性的相关性及复方甘草酸苷、地塞米松对毛乳头细胞活性影响的研究[D];河北医科大学;2010年

8 丛南南;吴景东教授应用养血通络生发汤治疗肝肾亏损型脂溢性脱发病的经验总结[D];辽宁中医药大学;2010年

9 柳小婧;斑秃患者Th17/Treg细胞亚群失衡及其临床意义探讨[D];复旦大学;2012年

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  本文关键词：脐血多能干细胞对重症斑秃的临床治疗及相关免疫机制研究，由笔耕文化传播整理发布。

本文编号：255080